HiMedia M1712-100G Среда HiCrome Nickels and Leesment

Сухая питательная среда HiMedia M1712-100G HiCrome Nickels and Leesment для количественного определения цитрат-ферментирующих молочнокислых бактерий. Применяется для анализа молока, молочных продуктов и мезофильных заквасочных культур; позволяет дифференцировать виды Lactococcus и Leuconostoc по цвету колоний.

Принцип измерения и интерпретация

Среда HiCrome® Nickels and Leesment является модификацией среды Nickels and Leesment, разработанной в соответствии с методиками APHA. Она предназначена для подсчета цитрат-ферментирующих молочнокислых бактерий методом прямого посева при температуре 25 °C.

Триптон и экстракт дрожжей служат источниками углерода, азота, длинноцепочечных аминокислот и витаминов. Лактоза и глюкоза являются основными углеводами. Хромогенный субстрат X-gal обеспечивает дифференциацию микроорганизмов:

• Lactococcus lactis subsp. lactis biovar diacetylactis: белые колонии с прозрачной зоной.
• Lactococcus lactis subsp. lactis и Lactococcus lactis subsp. cremoris: белые колонии без прозрачной зоны.
• Виды Leuconostoc: синие колонии (с прозрачной зоной или без неё).

При добавлении селективной добавки Van100 (FD245) среда используется для селективной изоляции Leuconostoc из смешанной флоры молочнокислых бактерий. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс, а соли обеспечивают необходимыми ионами.

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 6,65 ± 0,05.

Методика приготовления и использования

1. Суспендируйте 66,0 г сухой среды (эквивалентный вес на литр) в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. При необходимости добавьте содержимое 2 флаконов селективной добавки Van100 (FD245).
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Область применения и работа с образцами

Среда предназначена для анализа пищевых и молочных продуктов. Сбор и обработка проб должны осуществляться в соответствии с руководствами APHA и стандартными методиками анализа молочных продуктов. После использования загрязненные материалы подлежат обязательному автоклавированию перед утилизацией.

Технические характеристики

• Вес: 100 г
• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до светло-желтого цвета
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5% агаром
• Цвет и прозрачность готовой среды: белый непрозрачный гель с образованием белого осадка в чашках Петри
• pH (6,6% водный раствор при 25 °C): 6,60–6,70

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 25–30 °C в течение 48–72 часов.

Ограничения и предупреждения

• Из-за вариативности потребностей в питательных веществах некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост.
• Возможны незначительные отклонения в цвете колоний в зависимости от степени утилизации субстрата организмом.
• Для окончательного подтверждения результатов требуется проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
• При работе со средой использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица) и соблюдать правила микробиологической безопасности.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C в сухом вентилируемом помещении.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; неправильное хранение может привести к образованию комков.