HiMedia M1712-100G Среда HiCrome Nickels and Leesment

Питательная микробиологическая среда HiMedia M1712-100G Среда HiCrome Nickels and Leesment производства HiMedia предназначена для количественного определения молочнокислых бактерий, ферментирующих цитрат. Среда применяется для анализа молока, молочных продуктов и мезофильных заквасок; инкубацию проводят при 25–30 °C в течение 48–72 ч.

Назначение

Среда HiCrome® Nickels and Leesment рекомендована для количественного определения молочнокислых бактерий, ферментирующих цитрат, в пищевых и молочных образцах, включая молоко, молочные продукты и мезофильные заквасочные культуры.

Исследование молочнокислых бактерий в молочных продуктах применяют для:

• оценки молочных заквасочных культур;
• определения причин кислотных дефектов молочных продуктов;
• контроля качества выдержанных сыров, кисломолочных продуктов и неферментированных продуктов с добавленными культурами.

Состав

Состав среды на 1 л:

Эквивалентная масса обезвоженной среды: 66,0 г/л.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Принцип измерения и интерпретация результатов

Среда HiCrome® Nickels and Leesment является модификацией модифицированной среды Nickels and Leesment, составленной в соответствии с методикой APHA. Среду используют для количественного определения молочнокислых бактерий, ферментирующих цитрат, методом подсчёта колоний при 25 °C.

Функции компонентов среды:

• триптон и дрожжевой экстракт служат источниками углерода и азота, длинноцепочечных аминокислот, витаминов и других необходимых питательных веществ;
• лактоза и глюкоза являются источниками углеводов;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие;
• соли обеспечивают микроорганизмы необходимыми ионами;
• X-gal обеспечивает дифференциацию между Lactococcus lactis subsp. lactis и видами Leuconostoc.

Интерпретация окраски колоний:

• Lactococcus lactis subsp. lactis biovar diacetylactis образует белые колонии с прозрачной зоной;
• Lactococcus lactis subsp. lactis и Lactococcus lactis subsp. cremoris образуют белые колонии без прозрачной зоны;
• виды Leuconostoc образуют синие колонии с прозрачной зоной или без неё.

Среда HiCrome® Nickels and Leesment с добавлением селективной добавки Van100 (FD245) может применяться для селективного выделения Leuconostoc из смешанной микрофлоры молочнокислых бактерий.

Методика приготовления среды

1. Взвесьте 66,0 г сухой среды — эквивалентное количество обезвоженной среды на 1 л.
2. Суспендируйте препарат в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
3. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. При необходимости добавьте восстановленное содержимое 2 флаконов селективной добавки Van100 (FD245).
7. Тщательно перемешайте.
8. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Тип образцов

• Пищевые образцы.
• Молочные образцы.

Отбор и обработка образцов

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам по микробиологическому исследованию.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 25–30 °C в течение 48–72 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный, свободно пересыпающийся порошок от кремового до светло-жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется непрозрачный гель белого цвета с белым осадком.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 6,6 % масс./об. при 25 °C.
• pH: 6,60–6,70.
• Конечное значение pH при 25 °C: 6,65 ± 0,05.

Ограничения применения

1. Из-за различий в питательных потребностях некоторые штаммы могут плохо расти на этой среде.
2. В зависимости от утилизации субстрата микроорганизмом могут наблюдаться небольшие различия в окраске.
3. Для подтверждения результата необходимо дополнительно провести биохимические и серологические исследования.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого препарата: 15–25 °C.
• Условия хранения сухого препарата: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните препарат в сухом виде, плотно закрывая флакон.
• Препарат гигроскопичен; неплотное закрытие может привести к образованию комков.
• Храните в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

Отличие методики

В отличие от неспецифического подсчёта молочнокислых бактерий, среда использует хромогенный субстрат X-gal для дифференциации Lactococcus lactis и Leuconostoc по цвету колоний, а добавка Van100 (FD245) обеспечивает селективное выделение Leuconostoc из смешанной микрофлоры молочнокислых бактерий.