Среда Раппопорта – Вассилиадиса модифицированная для исследования воды HiMedia M1658I-500G (уп/500 гр)

Селективная питательная среда «Среда Раппопорта – Вассилиадиса модифицированная для исследования воды HiMedia M1658I-500G (уп/500 гр)» предназначена для селективного обогащения бактерий рода Salmonella из проб воды. Среда используется при микробиологическом контроле воды с последующей инкубацией посевного материала при 42 ± 0,5 °C в течение 18–24 ч.

Назначение

Модифицированная среда Раппопорта – Вассилиадиса рекомендуется для селективного обогащения видов Salmonella из воды.

• Назначение изделия: питательная микробиологическая среда
• Область применения: исследование воды, выявление Salmonella
• Сертификат: ФСЗ 2009/03706

Состав

Расчётный состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

• Конечный pH при 25 °C: 5,2 ± 0,1

Приготовление среды

1. Приготовьте суспензию 25,93 г обезвоженной среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости осторожно нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду в пробирки в необходимом объёме.
4. Стерилизуйте автоклавированием при 115 °C в течение 15 мин.

Принцип действия и интерпретация

Исходная рецептура, описанная Раппопортом и соавторами, была модифицирована Вассилиадисом и соавторами: концентрацию малахитового зелёного снизили, а температуру инкубации повысили до 43 °C. Модифицированная рецептура используется как селективная среда обогащения для выявления Salmonella в воде.

Компоненты среды выполняют следующие функции:

• пептоны животного и растительного происхождения — ферментативный перевар тканей животного происхождения и пептон из соевых бобов — обеспечивают необходимые питательные факторы;
• хлорид натрия поддерживает осмотический баланс клеток;
• соли калия обеспечивают буферное действие среды;
• двухвалентные ионы магния регулируют клеточный метаболизм;
• малахитовый зелёный действует как селективный агент и подавляет рост многих грамположительных бактерий.

Пробоподготовка и методика анализа воды

Пробы объёмом более 10 мл

Для образцов воды объёмом более 10 мл предусмотрены два варианта пробоподготовки:

1. Добавьте образец к такому же объёму буферной пептонной воды двойной концентрации M614.
2. Либо профильтруйте образец через стерильный мембранный фильтр и поместите фильтр в 50 мл буферной пептонной воды стандартной концентрации.
3. При необходимости используйте фильтрующие добавки.

Пробы объёмом 10 мл и менее

Для образцов объёмом 10 мл и менее используйте не менее 50 мл буферной пептонной воды стандартной концентрации либо объём буферной пептонной воды, как минимум в 10 раз превышающий объём образца.

Предварительное обогащение

Инкубируйте подготовленную пробу при 36 ± 2 °C в течение 16–20 ч.

Селективное обогащение

1. Перенесите 0,1 мл предварительно обогащённой культуры в 10 мл модифицированной среды Раппопорта – Вассилиадиса M1658I.
2. Альтернативно внесите 1 мл предварительно обогащённой культуры в 100 мл среды M1658I.
3. Инкубируйте в водяной бане при 42 ± 0,5 °C в течение 18–24 ч.
4. Если вместо водяной бани используется другой тип инкубатора, предварительно прогрейте среду до этой температуры перед инокуляцией.

Использование большего объёма посевного материала может повысить вероятность выявления бактерий Salmonella.

В отдельных случаях дополнительно рекомендуется использовать селенит-цистиновую среду. После селективного обогащения выполняют дальнейший пересев на агар с бриллиантовым зелёным M016 или агар XLD M031.

Для выявления медленно растущих видов Salmonella рекомендуется повторно инокулировать плотные среды после дополнительной инкубации селективной жидкой среды в течение ещё 24 ч.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или светло-синий однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Раствор синего цвета, прозрачный, без осадка.

Реакция среды

Реакция водного раствора концентрацией 2,59 % масс./об. при 25 °C:

• pH: 5,2 ± 0,1

Диапазон pH

• pH: 5,10–5,30

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при различных температурах в течение 24–48 ч с последующим пересевом на основу агара с бриллиантовым зелёным M016 и инкубацией при 35–37 °C в течение 18–24 ч.