Среда Раппопорта – Вассилиадиса модифицированная для исследования воды HiMedia M1658I-500G (уп/500 гр)

Селективная обогатительная среда Раппопорта – Вассилиадиса модифицированная для исследования воды HiMedia M1658I-500G. Применяется для селективного выделения бактерий рода Salmonella из проб воды; содержит малахитовый зеленый в качестве ингибитора грамположительной микрофлоры.

Область применения

Среда рекомендована для селективного обогащения проб воды с целью обнаружения видов Salmonella.

Принцип измерения и интерпретация

Основой среды является рецептура Раппопорта и др., модифицированная Вассилиадисом и др. путем снижения концентрации малахитового зеленого и повышения температуры инкубации до 43 °C.

Технические особенности состава:

• Питательные вещества: животный пептон (ферментативный гидролизат тканей животных) и растительный пептон (из сои) обеспечивают необходимые факторы роста.
• Осмотический баланс: поддерживается хлоридом натрия.
• Буферизация: осуществляется солями калия.
• Метаболизм: двухвалентные ионы магния регулируют клеточный метаболизм.
• Селективность: краситель малахитовый зеленый подавляет рост многих грамположительных бактерий.

Методика проведения анализа

Пробоподготовка

1. Для проб объемом более 10 мл: добавить пробу в равный объем буферной пептонной воды (M614) двойной концентрации или профильтровать пробу через стерильный мембранный фильтр, поместив фильтр в 50 мл буферной пептонной воды (одинарной концентрации). При необходимости использовать вспомогательные средства фильтрации.
2. Для проб объемом 10 мл и менее: использовать минимум 50 мл буферной пептонной воды (одинарной концентрации) или объем, в 10 раз превышающий объем пробы.
3. Инкубация: выдержать при температуре 36 ± 2 °C в течение 16–20 часов.

Посев на среду M1658I

1. Перенести культуру из предварительно обогащенной пептонной воды: 0,1 мл в 10 мл среды M1658I или 1 мл в 100 мл среды M1658I.
2. Инкубировать на водяной бане при температуре 42 ± 0,5 °C в течение 18–24 часов. При использовании обычного инкубатора среду необходимо предварительно прогреть до этой температуры перед инокуляцией.
3. Для повышения вероятности обнаружения Salmonella рекомендуется использовать большие объемы инокулята.
4. В некоторых случаях рекомендуется дополнительное использование селенитовой цистиновой среды с последующим пересевом на агар с бриллиантовым зеленым (M016) или агар XLD (M031).

Примечание: Для обнаружения медленно растущих видов Salmonella рекомендуется повторный пересев на твердые среды после дополнительной инкубации в селективной жидкой среде еще в течение 24 часов.

Приготовление среды

1. Растворить 25,93 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости осторожно нагреть до полного растворения.
3. Разлить по пробиркам и стерилизовать в автоклаве при температуре 115 °C в течение 15 минут.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 5,2 ± 0,1

Дополнительные параметры:

Контроль качества:

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от светло-желтого до светло-голубого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: голубой прозрачный раствор без осадка.
• Реакция: pH 2,59% (масса/объем) водного раствора при 25 °C составляет 5,2 ± 0,1.
• Диапазон pH: 5,10–5,30.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдались после инкубации при различных температурах в течение 24–48 часов с последующим пересевом на базовый агар с бриллиантовым зеленым (M016) и инкубацией при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: в плотно закрытом контейнере при температуре ниже 30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Дополнительная информация

• Сертификат: ФСЗ 2009/03706.
• Назначение: селективная питательная среда.