Модифицированная среда для подтверждения выделения E.sakszakii HiMedia M1644-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда Модифицированная среда для подтверждения выделения E.sakszakii HiMedia M1644-500G (уп/500 гр) производства HiMedia предназначена для биохимического подтверждения Enterobacter sakazakii из молока и молочных продуктов. Среда используется для определения аргининдигидролазы и применима к образцам пищевой и молочной продукции, при этом может быть непригодна для выявления гидролиза аргинина у других видов.

Назначение и область применения

L-аргининовая среда для определения аргининдигидролазы, модифицированная, применяется как одна из сред для подтверждения выделения Enterobacter sakazakii из молока и молочных продуктов.

• Тип образцов: пищевые продукты и молочная продукция.
• Тип питательной среды: диагностическая.
• Назначение изделия: питательная среда.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705.
• Ограничение применения: среда предназначена для гидролиза аргинина у Cronobacter sakazakii и может быть непригодна для определения гидролиза аргинина у других видов.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия установленным рабочим параметрам.

• Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2.
• Физическая форма: порошок.
• Происхождение: без компонентов животного происхождения, микробиологическое происхождение.
• Тип продукта: стандартный.
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE).

Принцип измерения и интерпретация

Среды для определения декарбоксилаз, применяемые для выявления аргининдигидролазы, лизиндекарбоксилазы и орнитиндекарбоксилазы, впервые были введены Мёллером. Модифицированная L-аргининовая среда относится к средам, рекомендованным для подтверждения Enterobacter sakazakii из молока и молочных продуктов в соответствии со спецификациями ISO.

Дифференциация бактерий основана на их декарбоксилирующей активности по отношению к аминокислоте. Бактерии, продуцирующие фермент аргининдигидролазу, декарбоксилируют аргинин с образованием путресцина. Образование амина путресцина повышает pH среды; изменение регистрируется индикатором бромкрезоловым пурпурным, который приобретает пурпурную окраску в щелочной среде.

Положительной реакцией считается изменение окраски с пурпурной на жёлтую с последующим возвращением к пурпурной.

Дрожжевой экстракт обеспечивает микроорганизмы необходимыми питательными веществами, L-аргинин стимулирует синтез аргининдигидролазы, а глюкоза служит источником энергии.

Реакция с аргинином протекает строго в анаэробных условиях, поэтому пробирки с бульоном необходимо покрывать слоем минерального масла. Для дифференциации представителей семейства Enterobacteriaceae используют контрольные пробирки без аргинина. Если в контрольных пробирках появляется пурпурная окраска, результат считают отрицательным.

Подготовка образца и последовательность исследования

В соответствии со спецификациями ISO исследуемый образец обогащают в буферной пептонной воде M614S. Обогащённую среду используют для инокуляции основы бульона с лаурилсульфатом и триптоном, модифицированной, M1643.

1. Инкубируйте обогащённую культуру при 44 °C в течение 24 ч.
2. После инкубации петлёй нанесите материал на агар HiCrome для Enterobacter sakazakii, модифицированный, M1641.
3. После инкубации отберите предположительно положительные колонии сине-зелёного цвета.
4. Подтвердите выделенные колонии с помощью биохимических тестов.
5. Используйте модифицированную L-аргининовую среду M1644 как одну из биохимических сред подтверждения.
6. Для реакции с аргинином создайте анаэробные условия, покрыв содержимое пробирок минеральным маслом.
7. При дифференциации Enterobacteriaceae параллельно используйте контрольные пробирки без аргинина.
8. Пурпурную реакцию в контрольных пробирках интерпретируйте как отрицательный результат.

Приготовление среды

1. Растворите 9,01 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте раствор для полного растворения среды.
3. Распределите приготовленную среду по пробиркам размером 13 × 100 мм.
4. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов-сил на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите пробирки в вертикальном положении.

Тип образцов и обращение с ними

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или серый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор пурпурного цвета в пробирках.

Реакция

• Условия определения: реакция 0,9 % водного раствора при 25 °C.
• pH: 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Cronobacter sakazakii ранее назывался Enterobacter sakazakii.
# Соответствует WDCM.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытая ёмкость.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде. Порошок обладает гигроскопичностью; попадание влаги может привести к образованию комков. Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте ёмкость.

Рабочие характеристики среды ожидаются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах установленного срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения. Наилучшие рабочие характеристики обеспечиваются при использовании продукта в течение указанного срока годности.

Меры предосторожности

Перед открытием контейнера прочитайте этикетку. При работе с образцами и культурами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности в соответствии с утверждёнными руководствами. Информацию по безопасности можно получить в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов среды посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

• Наименование: модифицированная L-аргининовая среда для определения аргининдигидролазы.
• Модель: M1644.
• Артикул фасовки: M1644-500G.
• Фасовка: 500 г.
• Производитель: HiMedia.
• Тип питательной среды: диагностическая.
• Физическая форма: порошок.
• Происхождение: без компонентов животного происхождения, микробиологическое происхождение.
• Упаковка: полиэтилен высокой плотности (HDPE).
• Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2.
• pH 0,9 % водного раствора при 25 °C: 6,8 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,60–7,00.
• Стерилизация: автоклавирование при 121 °