Модифицированная среда для подтверждения выделения E.sakszakii HiMedia M1644-500G (уп/500 гр)

Диагностическая модифицированная среда для подтверждения выделения Enterobacter sakazakii HiMedia M1644-500G (уп/500 г). Рекомендуется для идентификации Enterobacter sakazakii в молоке и молочных продуктах в соответствии со спецификациями ISO.

Принцип измерения

Среда основана на определении активности аргинин-дигидролазы. Бактерии, вырабатывающие фермент аргинин-дигидролазу, декарбоксилируют аргинин с образованием путресцина. Выделение этого амина повышает pH среды, что фиксируется индикатором бромкрезоловым пурпурным, который в щелочной среде приобретает пурпурный цвет. Положительной реакцией считается изменение цвета с пурпурного на жёлтый и последующий возврат к пурпурному.

В составе среды:

• Экстракт дрожжей: обеспечивает необходимые питательные вещества для роста микроорганизмов.
• L-аргинин: стимулирует синтез аргинин-дигидролазы.
• Глюкоза: служит источником энергии.

Методика проведения анализа

Подготовка образцов

Согласно спецификациям ISO, образец подвергается обогащению в буферной пептонной воде (M614S). Затем обогащенная среда используется для инокуляции модифицированного бульона с лаурилсульфатом и триптоном (M1643). После инкубации при 44 °C в течение 24 часов петлю с культурой высевают на модифицированный агар HiCrome Enterobacter Sakazakii (M1641). Полученные предположительные сине-зелёные колонии подтверждают с помощью биохимических тестов, одним из которых является использование среды L-Arginine Dihydrolase Medium, Modified (M1644).

Процедура анализа

1. Приготовьте среду: растворите 9,01 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. При необходимости нагрейте до полного растворения.
2. Распределите среду по пробиркам размером 13 × 100 мм.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите пробирки в вертикальном положении.
5. Внесите исследуемый образец.
6. Поскольку реакция на аргинин протекает строго анаэробно, поверхность среды в пробирках необходимо залить минеральным маслом.
7. Для дифференциации представителей Enterobacteriaceae необходимо использовать контрольные пробирки без добавления аргинина. Если в контрольных пробирках наблюдается пурпурная реакция, тест считается отрицательным.

Технические характеристики

Свойства готовой среды

• Внешний вид порошка: однородный свободно текущий порошок от светло-жёлтого до серого цвета.
• Цвет и прозрачность раствора: прозрачный раствор пурпурного цвета.
• pH (при 25 °C): 6,8 ± 0,2 (диапазон 6,60–7,00).

Состав (г/л)

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

* — ранее именовался Enterobacter sakazakii; # — соответствующий WDCM.

Область применения и ограничения

Среда предназначена для анализа пищевых и молочных проб. Оптимизирована для определения гидролиза аргинина у Cronobacter sakazakii; может быть непригодна для обнаружения гидролиза аргинина у других видов бактерий.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрыть во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

• При работе использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности при работе с образцами и культурами.
• Загрязнённые материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с лабораторными протоколами.

Дополнительная информация

• Сертификат: ФСЗ 2009/03705.
• Соответствие: состав и методика опираются на стандарты ISO (в частности, проект ISO/TS 22964: 2006).