HiMedia M1496I-100G Тетратионатная среда Мюллера-Кауффмана

HiMedia·Арт.: 0049234·Арт. произв.: M1496I-100G

HiMedia M1496I-100G Тетратионатная среда Мюллера-Кауффмана

Name: HiMedia M1496I-100G Тетратионатная среда Мюллера-Кауффмана
Brand: HiMedia
SKU: 0049234
Price: 3781 RUB
Availability: PreOrder

Под заказ3 781 руб.

Сухая питательная среда HiMedia M1496I-100G Тетратионатная среда Мюллера-Кауффмана для улучшенного обогащения и изоляции Salmonellae. Применяется для анализа пищевых продуктов, кормов, фекалий животных и проб окружающей среды на этапе первичного производства; состав и критерии эффективности соответствуют стандартам ISO 6579-1:2017 и ISO 11133:2014 (E) /Amd. : 2020.

Описание

Принцип измерения

Среда предназначена для выделения Salmonella из образцов, где патогены могут находиться в малом количестве или в поврежденном физиологическом состоянии после воздействия стрессовых факторов при переработке или хранении. Селективность обеспечивается тетратионат-ионами (S₄O₆²⁻), которые образуются в результате реакции тиосульфата и иода.

Основные компоненты и их функции:

Триптон (ферментативный гидролизат казеина) и экстракт HM: источники углерода, азота, витаминов и минералов.
Желчь говяжья и бриллиантовый зеленый: селективные агенты, подавляющие рост грамположительных и некоторых грамотрицательных микроорганизмов (в частности, видов Proteus).
Карбонат кальция: буферный агент.
Хлорид натрия: поддержание осмотического равновесия.
Тиосульфат натрия: источник серы.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

Суспендировать 89,42 г сухой среды (эквивалентный вес на 1 л) в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
Нагреть среду до кипения. Автоклавирование запрещено.
Охладить до 45–50 °C.
Перед использованием асептически добавить содержимое 1 флакона добавки MKTT Novobiocin (FD203) и 20 мл иодно-иодидного раствора (20 г иода и 25 г иодида калия на 100 мл стерильной дистиллированной воды).
Тщательно перемешать для равномерного распределения карбоната кальция перед разливом в стерильные пробирки.

Примечание: из-за наличия карбоната кальция приготовленная среда представляет собой опалесцирующий раствор с белым осадком.

Процедура анализа

Пре-обогащение: Образцы (25 г в 225 мл) помещают в буферную пептонную воду (M1494I) и инкубируют при 34–38 °C в течение 18 ± 2 ч.
Селективное обогащение:
- 0,1 мл пре-обогащенного образца инокулируют в 10 мл бульона RVS (M1448I) или агар MSRV (M1428I), инкубируют при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч.
- 1 мл культуры инокулируют в бульон MKTTn (M1496I) и инкубируют при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч.
Изоляция: Полученную культуру высевают на модифицированный агар XLD (M031I) и инкубируют при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч. Параллельно проводится посев на второй изоляционный агар.
Подтверждение: Для окончательного подтверждения выполняют биохимические и серологические тесты.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Компонент	г/л
Экстракт HM	4,300
Ферментативный гидролизат казеина	8,600
Желчь говяжья (для бактериологических целей)	4,780
Хлорид натрия (NaCl)	2,600
Карбонат кальция (CaCO₃)	38,700
Тиосульфат натрия, пентагидрат (Na₂S₂O₃ · 5H₂O)	47,800
Бриллиантовый зеленый	0,0096

Конечный pH (при 25 °C): 8,0 ± 0,2

Добавки (вносятся после автоклавирования/нагрева)

Компонент	Количество
Новибиоцин (натриевая соль)	0,040 г
Иодно-иодидный раствор (готовится свежим)	20,00 мл
— Иод	4,000 г
— Иодид калия (KI)	5,000 г

Общие параметры

Параметр	Значение
Происхождение компонентов	Животное
Тип продукта	Регулярный
Физическая форма	Порошок
Тип упаковки	ПНД (HDPE)
Внешний вид порошка	Гомогенный свободнотекущий порошок от кремового до зеленовато-желтого цвета
Цвет и прозрачность среды	Светло-зеленый опалесцирующий раствор с тяжелым белым осадком
Диапазон pH	7,80–8,20

Контроль качества

Продуктивность

Инкубация при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч с добавлением 20 мл иодного раствора и добавки MKTT (FD203). Последующий пересев на модифицированный агар XLD (M031I), инкубация при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч.

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Восстановление на агаре XLD (M031I)	Цвет колоний на агаре XLD (M031I)
Salmonella Enteritidis ATCC 13076 + Escherichia coli ATCC 8739 + Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853	50–100 $\ge 10^4$ $\ge 10^4$	> 10 колоний	красные колонии с черным центром
Salmonella Typhimurium ATCC 14028 + Escherichia coli ATCC 25922 + Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853	50–100 $\ge 10^4$ $\ge 10^4$	> 10 колоний	красные колонии с черным центром

Селективность

Инкубация при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч с добавлением 20 мл иодного раствора и добавки MKTT (FD203). Последующий пересев на агар триптон-соевый (M290), инкубация при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч.

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Рост	Восстановление на агаре триптон-соевом
Escherichia coli ATCC 8739	$\ge 10^4$	частичное подавление	$\le 100$ колоний
Escherichia coli ATCC 25922	$\ge 10^4$	частичное подавление	$\le 100$ колоний
Enterococcus faecalis ATCC 29212	$\ge 10^4$	подавление — частичное подавление	< 10 колоний
Enterococcus faecalis ATCC 19433	$\ge 10^4$	подавление — частичное подавление	< 10 колоний

Ограничения и предостережения

Полностью приготовленная среда нестабильна и должна быть использована немедленно. После инкубации допускается хранение среды селективного обогащения при 5 °C не более 72 ч.
Различные микроорганизмы могут иметь разные требования к росту и демонстрировать вариативность роста в данной среде.
Все предполагаемые колонии Salmonella должны пройти подтверждающие тесты.
При работе с образцами и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности и использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).

Условия эксплуатации и хранения

Температура хранения: 10–30 °C.
Хранить в плотно закрытом контейнере в сухом вентилируемом помещении, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.
Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть для предотвращения образования комков.
Использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.