HiMedia M1494I-5KG Буферная пептонная вода

Сухая питательная среда HiMedia M1494I-5KG Буферная пептонная вода для предварительного обогащения культур Enterobacteriaceae, включая виды Salmonella и Cronobacter. Применяется для анализа пищевых продуктов, кормов, воды и молока; состав и характеристики соответствуют стандартам ISO 6579-1:2017, ISO 6887-1:2017 и ISO 21528-1:2017.

Принцип измерения

Среда предназначена для реанимации микроорганизмов, которые могли быть структурно или метаболически повреждены в результате воздействия стрессовых факторов окружающей среды. Такие поврежденные клетки не способны расти в селективных средах, поэтому требуется их инкубация в подходящей неселективной среде для восстановления. Буферная система предотвращает повреждение бактерий, вызванное изменением pH среды.

Область применения

Рекомендуется для предварительного обогащения Salmonella, Cronobacter и Listeria из следующих образцов:

• пищевые продукты, включая молоко и молочные продукты;
• корма для животных;
• фекалии животных;
• вода;
• образцы окружающей среды с этапа первичного производства.

Также используется в качестве разбавителя при подсчете всех видов микроорганизмов.

Состав

Состав соответствует спецификациям ISO 6579-1:2017, ISO 6887-1:2017, ISO 21528-1:2017, ISO 22964:2017.

Конечный pH (при 25 °C): 7,0 ± 0,2.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Растворить 20,07 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть для полного растворения компонентов.
3. Разлить по флаконам и стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.

Процедуры анализа по стандартам ISO

Поиск Salmonella (ISO 6579-1:2017 / ISO 19250:2010):

1. Предварительное обогащение: Образцы (25 г в 225 мл) помещают в буферную пептонную воду (M1494I) и инкубируют при 34–38 °C в течение 18 ± 2 ч.
2. Селективное обогащение: 0,1 мл культуры переносят в 10 мл бульона RVS (M1448I) (инкубация при 41,5 ± 1 °C, 24 ± 3 ч) и 1 мл в бульон MKTTn (M1496I) (инкубация при 37 ± 1 °C или 36 ± 2 °C, 24 ± 3 ч).
3. Изоляция: Посев на модифицированный агар XLD (M031I), инкубация при 37 ± 1 °C (или 36 ± 2 °C) в течение 24 ± 3 ч.
4. Подтверждение: Биохимические и серологические тесты.

Поиск Enterobacteriaceae (ISO 21528-1:2017):

1. Предварительное обогащение: Образцы (10 г в 90 мл) в среде M1494I, инкубация при 37 ± 1 °C в течение 18 ± 2 ч.
2. Изоляция: Посев на агар с виолевым красным, желчью и глюкозой (VRBG) (M1684), инкубация при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.
3. Подтверждение: Биохимические и серологические тесты.

Поиск Cronobacter (ISO 22964:2017):

1. Предварительное обогащение: Образцы (10 г в 90 мл) в среде M1494I, инкубация при 34–38 °C в течение 18 ± 2 ч.
2. Селективное обогащение: 0,1 мл культуры в 10 мл селективного бульона для Cronobacter (M1786I), инкубация при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.
3. Изоляция: Посев на изоляционный агар HiCrome™ Cronobacter (CCI Agar) (M2062I), инкубация при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.
4. Подтверждение: Биохимические и серологические тесты.

Технические характеристики

Культуральные характеристики

Восстановление микроорганизмов (ISO 6887-1:2017)

Восстановление ± 30 % от исходного числа (контроль на агаре с соевым триптоном M290). Инкубация чашек при 37 ± 2 °C в течение 18 ± 2 ч.

Условие 1: время выдержки инокулированного образца 45–60 мин при 20–25 °C.

Условие 2: время выдержки инокулированного образца 1 ч ± 5 мин при 20 ± 2 °C.

Продуктивность (ISO 6579-1:2017, ISO 21528-1:2017, ISO 22964:2017, ISO 19250:2010)

Характеристики роста после инкубации при 34–38 °C в течение 18 ± 2 ч (для ISO 19250: 36 ± 2 °C в течение 24 ± 3 ч).

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения (сухая среда): 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения (готовая среда): 20–30 °C.
• Особенности: Продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.

Ограничения и меры предосторожности

• Отдельные организмы могут иметь разные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов роста в данной среде.
• Рекомендуется проводить валидацию среды для конкретных микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа (COA), исходя из уникальных требований пользователя.
• При работе с образцами и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности, использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты должны быть утилизированы путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.