HiMedia M1494I-500G Буферная пептонная вода

Сухая питательная среда HiMedia M1494I-500G Буферная пептонная вода для предварительного обогащения микроорганизмов семейства Enterobacteriaceae. Рекомендуется для выделения Salmonella и Cronobacter из пищевых продуктов, кормов, воды и молока; состав соответствует стандартам ISO 6579-1:2017, ISO 6887-1:2017 и ISO 21528-1:2017.

Принцип измерения

Среда предназначена для реанимации микроорганизмов, которые могли быть повреждены или метаболически угнетены в результате воздействия факторов окружающей среды. Такие поврежденные клетки не способны расти в селективных средах, поэтому требуется их инкубация в подходящей неселективной среде для восстановления структуры и функций. Буферная система предотвращает повреждение бактерий, вызванное изменением pH среды в процессе роста. Среда также рекомендована APHA и FDA BAM для предварительного обогащения Salmonella, Cronobacter и Listeria.

Область применения

Используется для анализа следующих типов образцов:

• Пищевые продукты, включая молоко и молочные продукты.
• Корма для животных.
• Фекалии животных.
• Вода.
• Экологические пробы с этапа первичного производства.

Среда также применяется в качестве разбавителя при подсчете общего числа микроорганизмов.

Состав

Состав соответствует спецификациям ISO 6579-1:2017, ISO 6887-1:2017 (E), ISO 21528-1:2017, ISO 22964:2017.

Конечный pH (при 25 °C): 7,0 ± 0,2.

Методика приготовления и применения

Приготовление среды

1. Суспендируйте 20,07 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте до полного растворения компонентов.
3. Разлейте по емкостям и стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.

Процедуры анализа по стандартам ISO

По ISO 6887-1:2017 / ISO 6579-1:2017 (выделение Salmonella):

1. Предварительное обогащение: Образцы (25 г в 225 мл) помещают в буферную пептонную воду (M1494I) и инкубируют при 34–38 °C в течение 18 ± 2 ч.
2. Селективное обогащение: 0,1 мл пробы переносят в 10 мл бульона RVS (M1448I) (инкубация при 41,5 ± 1 °C, 24 ± 3 ч) и 1 мл в бульон MKTTn (M1496I) (инкубация при 37 ± 1 °C, 24 ± 3 ч).
3. Изоляция: Посев на модифицированный агар XLD (M031I), инкубация при 37 ± 1 °C, 24 ± 3 ч.
4. Подтверждение: Биохимические и серологические тесты.

По ISO 21528-1:2017 (выделение Enterobacteriaceae):

1. Предварительное обогащение: Образцы (10 г в 90 мл) в среде M1494I инкубируют при 37 ± 1 °C в течение 18 ± 2 ч.
2. Изоляция: Посев на агар с виолевым красным, желчью и глюкозой (VRBG) (M1684), инкубация при 37 ± 1 °C, 24 ± 2 ч.
3. Подтверждение: Биохимические и серологические тесты.

По ISO 22964:2017 (выделение Cronobacter):

1. Предварительное обогащение: Образцы (10 г в 90 мл) в среде M1494I инкубируют при 34–38 °C в течение 18 ± 2 ч.
2. Селективное обогащение: 0,1 мл пробы переносят в 10 мл селективного бульона для Cronobacter (M1786I), инкубация при 41,5 ± 1 °C, 24 ± 2 ч.
3. Изоляция: Посев на изоляционный агар HiCrome™ Cronobacter (CCI Agar) (M2062I), инкубация при 41,5 ± 1 °C, 24 ± 2 ч.
4. Подтверждение: Биохимические и серологические тесты.

По ISO 19250:2010 (E) (выделение Salmonella в воде):

1. Неселективное обогащение: В 50 мл среды M1494I комнатной температуры вносят образец или его разведения, инкубируют при 36 ± 2 °C в течение 18 ± 2 ч.
2. Селективное обогащение: 0,1 мл культуры переносят в 10 мл бульона RVS (M1448I) (41,5 ± 1 °C, 24 ± 3 ч) и 1 мл в бульон MKTTn (M1496I) (36 ± 2 °C, 24 ± 3 ч).
3. Подтверждение: Посев на модифицированный агар XLD (M031I), инкубация при 36 ± 2 °C, 24 ± 3 ч, далее биохимические и серологические тесты.

Технические характеристики

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый прозрачный раствор без осадка.
• pH (2% водный раствор при 25 °C): 6,80–7,20 (номинал 7,0 ± 0,2).
• Вес: 500 г.

Культуральные характеристики

Восстановление микроорганизмов (ISO 6887-1:2017)

Восстановление ± 30 % от исходного числа (подсчет на соево-казеиновом-триптон-агаре M290). Пластины инкубируют при 37 ± 2 °C в течение 18 ± 2 ч.

Условие 1: время выдержки инокулированного образца 45–60 мин при 20–25 °C.

Условие 2: время выдержки инокулированного образца 1 ч ± 5 мин при 20 ± 2 °C.

Продуктивность (ISO 6579-1:2017 и ISO 21528-1:2017)

Инкубация при 34–38 °C в течение 18 ± 2 ч.

Продуктивность (ISO 22964:2017)

Инкубация при 34–38 °C в течение 18 ± 2 ч.

Продуктивность (ISO 19250:2010 E)

Инкубация при 36 ± 2 °C в течение 24 ± 3 ч.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 20–30 °C.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков.

Ограничения и меры предосторожности

1. Различные микроорганизмы могут иметь разные требования к росту и демонстрировать вариативность роста в данной среде.
2. Каждая партия среды протестирована на организмах, указанных в сертификате анализа (COA). При необходимости использования для специфических микроорганизмов, не указанных в COA, рекомендуется провести валидацию среды под конкретные требования пользователя.
3. При работе с образцами и культурами следует соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики, использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты должны быть утилизированы путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.