Питательная среда HiMedia M1494I-500G Буферная пептонная вода в форме порошка, масса упаковки — 500 г. Применяется для предварительного обогащения энтеробактерий в пищевых продуктах, воде, молоке и других образцах; хранение — при 10–30 °C.

Назначение

Буферная пептонная вода предназначена для предварительного неселективного обогащения микроорганизмов семейства Enterobacteriaceae, включая Salmonella и Cronobacterium, из следующих образцов:

• пищевые продукты, включая молоко и молочные продукты;
• корма для животных;
• фекалии животных;
• вода;
• образцы окружающей среды на стадии первичного производства.

Среда также применяется как разбавитель при количественном определении всех микроорганизмов.

Состав и критерии эффективности соответствуют требованиям ISO 6579-1:2017, ISO 6887-1:2017, ISO 21528-1:2017, ISO 22964:2017, ISO 19250:2010, ISO 11133:2014 и A1:2018 в части соответствующих методик.

Состав

Состав соответствует спецификации буферной пептонной воды (BPW) по ISO 6579-1:2017, ISO 6887-1:2017 (E), ISO 21528-1:2017 и ISO 22964:2017.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих параметров.

Эквивалентен ферментативному гидролизату казеина.

• Массовая доля при приготовлении раствора для контроля реакции: 2,0 % м/о.
• Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,80–7,20.

Технические характеристики

Приготовление среды

1. Взвесьте 20,07 г обезвоженной среды.
2. Суспендируйте навеску в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
3. При необходимости нагрейте для полного растворения среды.
4. Разлейте приготовленную среду в необходимую тару.
5. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (ориентировочно 0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.

Принцип действия и интерпретация

Микроорганизмы, подвергшиеся воздействию факторов окружающей среды, могут получить структурные или метаболические повреждения. Такие клетки не способны размножаться в селективных средах, поэтому перед последующим выделением их необходимо ресусцитировать или предоставить им возможность восстановить повреждения в подходящей неселективной среде.

Буферная пептонная вода обеспечивает восстановление повреждённых клеток. Инкубация в среде M1494I при 35 °C в течение 18–24 ч приводит к восстановлению повреждённых клеток. Буферная система предотвращает повреждение бактерий, связанное с изменением pH среды.

Среда рекомендована для предварительного обогащения Salmonella, Cronobacter и Listeria в методиках APHA и FDA BAM. Сублетальные повреждения Salmonellae могут возникать при различных процессах консервирования пищевых продуктов. ISO также рекомендует буферную пептонную воду для обнаружения Enterobacteriaceae, Salmonella, Cronobacter и Listeria в пищевых продуктах, воде и других материалах.

Типы образцов

Применимые методики:

• ISO 6579-1:2017;
• ISO 6887-1:2017;
• ISO 11290-1:2017;
• ISO 21528-1:2017;
• ISO 22964:2017.

Образцы включают пищевые продукты, молоко и молочные продукты, корма для животных, фекалии животных, воду и образцы окружающей среды на стадии первичного производства.

Подготовка и обработка образцов

Разведение образцов по ISO 6887-1:2017 и ISO 11290-1:2017

Подготовка испытуемых образцов, исходной суспензии и десятикратных разведений выполняется для микробиологического исследования.

Обнаружение Salmonella по ISO 6579-1:2017

1. Предварительное обогащение: внесите 25 г образца в 225 мл буферной пептонной воды M1494I. Инкубируйте при 34–38 °C в течение 18 ч ± 2 ч.
2. Селективное обогащение: внесите 0,1 мл предварительно обогащённого образца в 10 мл бульона RVS M1448I или агара MSRV M1428. Инкубируйте при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч. Одновременно внесите 1 мл культуры в бульон MKTTn M1496I и инкубируйте при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч.
3. Выделение: полученную культуру высейте на модифицированный агар XLD M031I и инкубируйте при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч. Одновременно выполните высев на вторую изолирующую агаризованную среду.
4. Подтверждение: выполните биохимические и серологические тесты.

Обнаружение энтеробактерий по ISO 21528-1:2017

1. Предварительное обогащение: внесите 10 г образца в 90 мл буферной пептонной воды M1494I. Инкубируйте при 37 ± 1 °C в течение 18 ч ± 2 ч.
2. Выделение: полученную культуру высейте на агар с глюкозой и фиолетовым красным и желчным (VRBG) M1684. Инкубируйте при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.
3. Подтверждение: выполните биохимические и серологические тесты.

Обнаружение Cronobacter по ISO 22964:2017

1. Предварительное обогащение: внесите 10 г образца в 90 мл буферной пептонной воды M1494I. Инкубируйте при 34–38 °C в течение 18 ч ± 2 ч.
2. Селективное обогащение: внесите 0,1 мл предварительно обогащённого образца в 10 мл селективного бульона для Cronobacter M1786I. Инкубируйте при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.
3. Выделение: полученную культуру высейте на хромогенный агар для выделения Cronobacter — HiCrome™ Cronobacter Isolation Agar (агар CCI) M2062I. Инкубируйте при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.
4. Подтверждение: выполните биохимические и серологические тесты.

Обнаружение Salmonella в воде по ISO 19250:2010 (E)

1. Неселективное предварительное обогащение: при комнатной температуре внесите образец или его разведения в 50 мл буферной пептонной воды M1494I. Инкубируйте при (36 ± 2) °C в течение (18 ± 2) ч.
2. Селективное обогащение: перенесите 0,1 мл культуры из обогатительного бульона в пробирку с 10 мл бульона RVS M1448I. Инкубируйте при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч. Одновременно внесите 1 мл культуры в бульон MKTTn M1496I и инкубируйте при 36 ± 2 °C в течение 24 ± 3 ч.
3. Подтверждение методом выделения: полученную культуру высейте на модифицированный агар XLD M031I и инкубируйте при 36 ± 2 °C в течение 24 ± 3 ч. Одновременно выполните высев на вторую изолирующую агаризованную среду.
4. Подтверждение: выполните биохимические и серологические тесты.

Контроль качества