HiMedia M1494I-2.5KG Буферная пептонная вода

Сухая питательная среда HiMedia M1494I-2.5KG Буферная пептонная вода для предварительного обогащения микроорганизмов семейства Enterobacteriaceae. Применяется для выделения Salmonella и Cronobacter из пищевых продуктов, кормов, воды и молока; состав соответствует стандартам ISO 6579-1:2017, ISO 6887-1:2017 и ISO 21528-1:2017.

Принцип измерения

Среда предназначена для реанимации микроорганизмов, которые могли быть повреждены в результате воздействия факторов окружающей среды или процессов консервации пищевых продуктов. В селективных средах такие поврежденные клетки не способны к репликации, поэтому требуется инкубация в подходящей неселективной среде для восстановления структуры и метаболизма клеток. Буферная система среды предотвращает повреждение бактерий, вызванное изменением pH в процессе роста.

Область применения

Рекомендуется для предварительного обогащения Salmonella, Cronobacter и Listeria (согласно рекомендациям APHA и FDA BAM), а также для выявления Enterobacteriaceae. Используется в качестве разбавителя при подсчёте всех видов микроорганизмов.

Типы исследуемых образцов

Согласно ISO 6579-1:2017, ISO 6887-1:2017, ISO 11290-1:2017, ISO 21528-1:2017, ISO 22964:2017:

• пищевые продукты, включая молоко и молочные продукты;
• корма для животных;
• фекалии животных;
• вода;
• образцы окружающей среды с этапа первичного производства.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендировать 20,07 г сухого остатка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть до полного растворения компонентов.
3. Разлить по флаконам и стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.

Процедуры анализа по стандартам ISO

Выявление Salmonella (ISO 6579-1:2017)

1. Предварительное обогащение: Образцы (25 г в 225 мл) помещают в буферную пептонную воду (M1494I) и инкубируют при 34–38 °C в течение 18 $\pm$ 2 ч.
2. Селективное обогащение: 0,1 мл предварительно обогащенного образца инокулируют в 10 мл бульона RVS (M1448I) или агар MSRV (M1428) и инкубируют при 41,5 $\pm$ 1 °C в течение 24 $\pm$ 3 ч; 1 мл культуры инокулируют в бульон MKTTn (M1496I) и инкубируют при 37 $\pm$ 1 °C в течение 24 $\pm$ 3 ч.
3. Изоляция: Культуру высевают на модифицированный агар XLD (M031I) и инкубируют при 37 $\pm$ 1 °C в течение 24 $\pm$ 3 ч. Параллельно проводят посев на второй изоляционный агар.
4. Подтверждение: Проводят биохимические и серологические тесты.

Выявление Enterobacteriaceae (ISO 21528-1:2017)

1. Предварительное обогащение: Образцы (10 г в 90 мл) помещают в буферную пептонную воду (M1494I) и инкубируют при 37 $\pm$ 1 °C в течение 18 $\pm$ 2 ч.
2. Изоляция: Культуру высевают на агар с желчным экстрактом, виолевым красным и глюкозой (VRBG) (M1684) и инкубируют при 37 $\pm$ 1 °C в течение 24 $\pm$ 2 ч.
3. Подтверждение: Проводят биохимические и серологические тесты.

Выявление Cronobacter (ISO 22964:2017)

1. Предварительное обогащение: Образцы (10 г в 90 мл) помещают в буферную пептонную воду (M1494I) и инкубируют при 34–38 °C в течение 18 $\pm$ 2 ч.
2. Селективное обогащение: 0,1 мл образца инокулируют в 10 мл селективного бульона для Cronobacter (M1786I) и инкубируют при 41,5 $\pm$ 1 °C в течение 24 $\pm$ 2 ч.
3. Изоляция: Культуру высевают на изоляционный агар HiCrome™ Cronobacter (CCI Agar) (M2062I) и инкубируют при 41,5 $\pm$ 1 °C в течение 24 $\pm$ 2 ч.
4. Подтверждение: Проводят биохимические и серологические тесты.

Выявление Salmonella в воде (ISO 19250:2010)

1. Неселективное предварительное обогащение: Инокулируют 50 мл BPW (M1494I) комнатной температуры образцом или его разведениям и инкубируют при 36 $\pm$ 2 °C в течение 18 $\pm$ 2 ч.
2. Селективное обогащение: 0,1 мл культуры переносят в 10 мл бульона RVS (M1448I) (инкубация при 41,5 $\pm$ 1 °C, 24 $\pm$ 3 ч) и 1 мл культуры в бульон MKTTn (M1496I) (инкубация при 36 $\pm$ 2 °C, 24 $\pm$ 3 ч).
3. Подтверждение: Посев на модифицированный агар XLD (M031I), инкубация при 36 $\pm$ 2 °C в течение 24 $\pm$ 3 ч, далее биохимические и серологические тесты.

Технические характеристики

Состав (ISO 6579-1:2017, ISO 6887-1:2017, ISO 21528-1:2017, ISO 22964:2017), г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 7,0 $\pm$ 0,2
• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый прозрачный раствор без осадка
• Вес: 2,5 кг
• Происхождение компонентов: животное
• Форма выпуска: порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)

Культуральные характеристики

Восстановление при разведении (ISO 6887-1:2017)

Условие: время выдержки инокулированного образца 45–60 мин при 20–25 °C. Инкубация чашек при 37 $\pm$ 2 °C в течение 18 $\pm$ 2 ч. Восстановление оценивается на агаре триптон-соя (M290).

Восстановление при разведении (ISO 6887-1:2017)

Условие: время выдержки инокулированного образца 1 ч $\pm$ 5 мин при 20 $\pm$ 2 °C. Инкубация чашек при 37 $\pm$ 2 °C в течение 18 $\pm$ 2 ч.

Продуктивность (ISO 6579-1:2017 и ISO 21528-1:2017)

Инкубация при 34–38 °C в течение 18 $\pm$ 2 ч.

Продуктивность (ISO 22964:2017)

Инкубация при 34–38 °C в течение 18 $\pm$ 2 ч.

Продуктивность (ISO 19250:2010)

Инкубация при 36 $\pm$ 2 °C в течение 24 $\pm$ 3 ч.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать для предотвращения образования комков. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и меры предосторожности

1. Различные организмы могут демонстрировать разный характер роста в данной среде.
2. Каждая партия среды протестирована на микроорганизмы, указанные в сертификате анализа (COA). При необходимости использования для специфических микроорганизмов, не указанных в COA, рекомендуется провести валидацию среды.
3. При работе с образцами и культурами соблюда