Питательная среда HiMedia M1494I-2.5KG Буферная пептонная вода производства HiMedia в форме порошка массой 2,5 кг, с конечным pH 7,0 ± 0,2. Буферная пептонная вода применяется для не селективного предварительного обогащения микроорганизмов семейства Enterobacteriaceae и как разбавитель при микробиологических исследованиях пищевых продуктов, кормов, воды, молока и молочных продуктов.

Назначение и область применения

Буферная пептонная вода используется как среда предварительного обогащения для выявления Salmonella, Cronobacter и других представителей Enterobacteriaceae, а также Listeria в пищевых продуктах, кормах для животных, воде, молоке, молочных продуктах, фекалиях животных и образцах окружающей среды на этапе первичного производства.

Среда предназначена для:

• восстановления структурно или метаболически повреждённых микроорганизмов перед переносом в селективные среды;
• предварительного обогащения при выявлении Salmonella, Cronobacter, Listeria и Enterobacteriaceae;
• подготовки исходных суспензий и десятичных разведений образцов;
• использования в качестве разбавителя при количественном определении всех микроорганизмов.

Состав и критерии эффективности среды соответствуют требованиям ISO 6579-1:2017, ISO 6887-1:2017, ISO 21528-1:2017, ISO 22964:2017, ISO 19250:2010, ISO 11133:2014 и A1:2018. Указанные документы приведены как нормативная основа методик применения среды.

Состав

Состав буферной пептонной воды BPW:

Компонент	г/л
Ферментативный гидролизат казеина (пептон#)	10,000
Хлорид натрия	5,000
Динатрий гидрофосфат, додекагидрат (Na₂HPO₄·12H₂O)	9,000
Дигидрофосфат калия (KH₂PO₄)	1,500

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия установленным параметрам эффективности.

Эквивалент ферментативного гидролизата казеина.

Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация

Микроорганизмы, подвергшиеся воздействию неблагоприятных факторов окружающей среды, могут получить структурные или метаболические повреждения. Такие клетки не способны размножаться в селективных средах, поэтому перед селективным культивированием их необходимо восстановить или предоставить им возможность устранить повреждения в подходящей не селективной среде.

Предварительное обогащение в буферной пептонной воде при 35 °C в течение 18–24 ч обеспечивает восстановление повреждённых клеток Salmonella. Буферная система предотвращает повреждение бактерий, связанное с изменением pH среды.

Буферная пептонная вода также рекомендована APHA и FDA BAM для предварительного обогащения Salmonella, Cronobacter и Listeria. Комитет ISO рекомендует применение среды для выявления Enterobacteriaceae, Salmonella, Cronobacter и Listeria в пищевых продуктах, воде и других материалах.

Типы исследуемых образцов

Применяется в соответствии с ISO 6579-1:2017, ISO 6887-1:2017, ISO 11290-1:2017, ISO 21528-1:2017 и ISO 22964:2017 для следующих образцов:

• пищевые продукты, включая молоко и молочные продукты;
• корма для животных;
• фекалии животных;
• вода;
• образцы окружающей среды на этапе первичного производства.

Приготовление среды

1. Приготовьте суспензию 20,07 г обезвоженной среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду в требуемые ёмкости.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм² (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.

Методики пробоподготовки и анализа

ISO 6887-1:2017 — подготовка разведений

Подготовка испытуемых образцов, исходной суспензии и десятичных разведений выполняется для микробиологического исследования.

ISO 6579-1:2017 — выявление Salmonella

Предварительное обогащение:

1. Внесите 25 г образца в 225 мл буферной пептонной воды M1494I.
2. Инкубируйте при 34–38 °C в течение 18 ч ± 2 ч.

Селективное обогащение:

1. Внесите 0,1 мл предварительно обогащённого образца в 10 мл бульона RVS M1448I или на агар MSRV M1428.
2. Инкубируйте при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч.
3. Внесите 1 мл культуры в бульон MKTTn M1496I.
4. Инкубируйте при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч.

Выделение:

1. Полученную культуру высейте на модифицированный агар XLD M031I.
2. Инкубируйте при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч.
3. Одновременно выполните высев на второй агар для выделения.

Подтверждение:

Для подтверждения выполняют биохимические и серологические тесты.

ISO 21528-1:2017 — выявление Enterobacteriaceae

Предварительное обогащение:

1. Внесите 10 г образца в 90 мл буферной пептонной воды M1494I.
2. Инкубируйте при 37 ± 1 °C в течение 18 ч ± 2 ч.

Выделение:

1. Полученную культуру высейте на желчно-красно-фиолетовый глюкозный агар VRBG M1684.
2. Инкубируйте при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.

Подтверждение:

Для подтверждения выполняют биохимические и серологические тесты.

ISO 22964:2017 — выявление Cronobacter

Предварительное обогащение:

1. Внесите 10 г образца в 90 мл буферной пептонной воды M1494I.
2. Инкубируйте при 34–38 °C в течение 18 ч ± 2 ч.

Селективное обогащение:

1. Внесите 0,1 мл предварительно обогащённого образца в 10 мл селективного бульона для Cronobacter M1786I.
2. Инкубируйте при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.

Выделение:

1. Полученную культуру высейте на хромогенный агар для выделения Cronobacter HiCrome™ (агар CCI) M2062I.
2. Инкубируйте при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.

Подтверждение:

Для подтверждения выполняют биохимические и серологические тесты.

ISO 19250:2010(E) — выявление Salmonella в воде

Не селективное предварительное обогащение:

1. При комнатной температуре внесите образец или его разведения в 50 мл буферной пептонной воды M1494I.
2. Инкубируйте при (36 ± 2) °C в течение (18 ± 2) ч.

Селективное обогащение:

1. Перенесите 0,1 мл полученной культуры в пробирку с 10 мл бульона RVS M1448I.
2. Инкубируйте при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч.
3. Внесите 1 мл культуры в бульон MKTTn M1496I.
4. Инкубируйте при 36 ± 2 °C в течение 24 ± 3 ч.

Подтверждение:

1. Полученную культуру высейте на модифицированный агар XLD M031I.
2. Инкубируйте при 36 ± 2 °C в течение 24 ± 3 ч.
3. Одновременно выполните высев на второй агар для выделения.
4. Для подтверждения выполняют биохимические и серологические тесты.

Технические характеристики

Параметр	Значение
Назначение изделия	Питательная среда
Форма выпуска	Порошок
Масса	2,5 кг
Происхождение	Животное
Тип продукта	Стандартный
Тип упаковки	Полиэтилен высокой плотности (HDPE)
Конечный pH при 25 °C	7,0 ± 0,2
pH 2,0 % водного раствора	6,80–7,20
Внешний вид	Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета
Цвет и прозрачность приготовленной среды	Прозрачный раствор светло-жёлтого цвета без осадка

Контроль качества

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор светло-жёлтого цвета без осадка.

Реакция: реакция 2,0 % масс./об. водного раствора при 25 °C; pH 7,0 ± 0,2.

Диапазон pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики и оценка эффективности

ISO 6887-1:2017 — разведения, контроль восстановления

Восстановление должно составлять ±30 % от исходного количества при восстановлении на триптон-соевом агаре M290, если время выдержки инокулированного образца составляет от 45 мин до 1 ч при 20–25 °C. Чашки инкубируют при 37 ± 2 °C в течение 18 ч ± 2 ч.