HiMedia M1494I-10KG Буферная пептонная вода

Сухая питательная среда HiMedia M1494I-10KG «Буферная пептонная вода» предназначена для предварительного обогащения культур Enterobacteriaceae, включая виды Salmonella и Cronobacterium. Среда применяется для анализа пищевых продуктов, кормов для животных, воды, молока и молочных продуктов; состав и показатели эффективности соответствуют стандартам ISO 6579-1:2017, ISO 6887-1:2017, ISO 21528-1:2017, ISO 22964:2017, ISO 19250:2010, ISO 11133:2014 и A1:2018.

Принцип измерения и интерпретация

Микроорганизмы, подвергшиеся воздействию стрессовых факторов окружающей среды, могут получить структурные или метаболические повреждения, что делает их неспособными к репликации в селективных средах. Для восстановления таких поврежденных клеток требуется инкубация в подходящей неселективной среде.

Буферная пептонная вода (M1494I) обеспечивает условия для регенерации поврежденных клеток (например, Salmonellae после процессов консервации пищевых продуктов) при инкубации при 35 °C в течение 18–24 часов. Буферная система предотвращает повреждение бактерий, вызванное изменением pH среды. Среда также рекомендована APHA и FDA BAM для предварительного обогащения Salmonella, Cronobacter и Listeria, а также в качестве разбавляющего раствора для подсчета всех видов микроорганизмов.

Состав

Состав соответствует спецификациям ISO 6579-1:2017, ISO 6887-1:2017 (E), ISO 21528-1:2017, ISO 22964:2017:

Конечный pH (при 25 °C): 7,0 ± 0,2.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 20,07 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте до полного растворения компонентов.
3. Разлейте по емкостям и стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.

Процедуры анализа по стандартам ISO

Для обнаружения Salmonella (ISO 6579-1:2017):

• Предварительное обогащение: образцы (25 г в 225 мл) помещают в буферную пептонную воду (M1494I) и инкубируют при 34–38 °C в течение 18 ± 2 ч.
• Селективное обогащение: 0,1 мл пробы переносят в 10 мл бульона RVS (M1448I) (инкубация при 41,5 ± 1 °C, 24 ± 3 ч) и 1 мл в бульон MKTTn (M1496I) (инкубация при 37 ± 1 °C, 24 ± 3 ч).
• Изоляция: посев на модифицированный агар XLD (M031I), инкубация при 37 ± 1 °C, 24 ± 3 ч.
• Подтверждение: биохимические и серологические тесты.

Для обнаружения Enterobacteriaceae (ISO 21528-1:2017):

• Предварительное обогащение: образцы (10 г в 90 мл) в среде M1494I, инкубация при 37 ± 1 °C, 18 ± 2 ч.
• Изоляция: посев на агар с виолевым красным, желчью и глюкозой (VRBG) (M1684), инкубация при 37 ± 1 °C, 24 ± 2 ч.
• Подтверждение: биохимические и серологические тесты.

Для обнаружения Cronobacter spp. (ISO 22964:2017):

• Предварительное обогащение: образцы (10 г в 90 мл) в среде M1494I, инкубация при 34–38 °C, 18 ± 2 ч.
• Селективное обогащение: 0,1 мл пробы в 10 мл селективного бульона для Cronobacter (M1786I), инкубация при 41,5 ± 1 °C, 24 ± 2 ч.
• Изоляция: посев на изоляционный агар HiCrome™ Cronobacter (CCI Agar) (M2062I), инкубация при 41,5 ± 1 °C, 24 ± 2 ч.
• Подтверждение: биохимические и серологические тесты.

Для обнаружения Salmonella в воде (ISO 19250:2010):

• Неселективное предварительное обогащение: инокуляция 50 мл среды M1494I при комнатной температуре образцом или его разведениями, инкубация при 36 ± 2 °C в течение 18 ± 2 ч.
• Селективное обогащение: перенос 0,1 мл культуры в 10 мл бульона RVS (M1448I) (41,5 ± 1 °C, 24 ± 3 ч) и 1 мл в бульон MKTTn (M1496I) (36 ± 2 °C, 24 ± 3 ч).
• Подтверждение: посев на модифицированный агар XLD (M031I), инкубация при 36 ± 2 °C, 24 ± 3 ч, далее биохимические и серологические тесты.

Область применения

Среда используется для анализа следующих типов образцов:

• Пищевые продукты, включая молоко и молочные продукты.
• Корма для животных.
• Фекалии животных.
• Вода.
• Экологические пробы с этапа первичного производства.

Технические характеристики

• Вес: 10 кг

Культуральные характеристики

Восстановление при разведении (ISO 6887-1:2017)

Восстановление ± 30 % от исходного числа (на агаре триптон-соя M290) при времени выдержки инокулированного образца 45–60 мин при 20–25 °C. Инкубация чашек при 37 ± 2 °C в течение 18 ± 2 ч.

Восстановление ± 30 % от исходного числа (на агаре триптон-соя M290) при времени выдержки инокулированного образца 1 ч ± 5 мин при 20 ± 2 °C. Инкубация чашек при 37 ± 2 °C в течение 18 ± 2 ч.

Продуктивность (ISO 6579-1:2017 и ISO 21528-1:2017)

Характеристики наблюдаются после инкубации при 34–38 °C в течение 18 ± 2 ч.

Продуктивность (ISO 22964:2017)

Характеристики наблюдаются после инкубации при 34–38 °C в течение 18 ± 2 ч.

Продуктивность (ISO 19250:2010)

Характеристики наблюдаются после инкубации при 36 ± 2 °C в течение 24 ± 3 ч.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать для предотвращения комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.

Ограничения и меры предосторожности

1. Различные организмы могут иметь разные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов роста в данной среде.
2. Каждая партия среды протестирована на микроорганизмы, указанные в сертификате анализа (COA). При необходимости использования для специфических микроорганизмов, не указанных в COA, рекомендуется провести валидацию среды.
3. При работе с образцами и культурами следует соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, защитная одежда, средства защиты глаз и лица).