HiMedia M1494I-100G Буферная пептонная вода

Сухая питательная среда HiMedia M1494I-100G Буферная пептонная вода (BPW) производства HiMedia. Рекомендуется для предварительного обогащения культур Enterobacteriaceae, включая виды Salmonella и Cronobacterium, из пищевых продуктов, кормов, воды и молока.

Область применения

Среда используется для анализа следующих типов образцов:

• пищевые продукты, включая молоко и молочные продукты;
• корма для животных;
• фекалии животных;
• вода;
• образцы окружающей среды на этапе первичного производства.

Состав и критерии эффективности среды соответствуют спецификациям стандартов ISO 6579-1:2017, ISO 6887-1:2017, ISO 21528-1:2017, ISO 22964:2017, ISO 19250:2010, ISO 11133:2014 и A1:2018. Также среда рекомендована APHA и FDA BAM для предварительного обогащения Salmonella, Cronobacter и Listeria.

Принцип измерения

Микроорганизмы, подвергшиеся воздействию факторов окружающей среды, могут получить структурные или метаболические повреждения. Такие поврежденные клетки не способны к репликации в селективных средах, поэтому требуется их реанимация (ресусцитация) и восстановление в подходящей неселективной среде.

Буферная пептонная вода (M1494I) при инкубации при 35 °C в течение 18–24 часов способствует восстановлению поврежденных клеток. Буферная система предотвращает повреждение бактерий, вызванное изменением pH среды. Кроме того, среда рекомендуется в качестве разбавителя для количественного определения всех микроорганизмов.

Состав

Состав соответствует спецификациям ISO 6579-1:2017, ISO 6887-1:2017 (E), ISO 21528-1:2017, ISO 22964:2017.

Конечный pH (при 25 °C): 7,0 ± 0,2.

Приготовление и стерилизация

1. Растворить 20,07 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть для полного растворения компонентов.
3. Разлить по емкостям и стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.

Методика проведения анализа

Поиск Salmonella (ISO 6579-1:2017)

1. Предварительное обогащение: Образцы (25 г в 225 мл) помещают в буферную пептонную воду (M1494I) и инкубируют при 34–38 °C в течение 18 ± 2 ч.
2. Селективное обогащение: 0,1 мл предварительно обогащенного образца вносят в 10 мл бульона RVS (M1448I) и инкубируют при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч; параллельно 1 мл культуры вносят в бульон MKTTn (M1496I) и инкубируют при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч.
3. Изоляция: Полученную культуру высевают на модифицированный агар XLD (M031I) и инкубируют при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч. Одновременно проводят посев на второй изоляционный агар.
4. Подтверждение: Проводят биохимические и серологические тесты.

Поиск Enterobacteriaceae (ISO 21528-1:2017)

1. Предварительное обогащение: Образцы (10 г в 90 мл) помещают в буферную пептонную воду (M1494I) и инкубируют при 37 ± 1 °C в течение 18 ± 2 ч.
2. Изоляция: Культуру высевают на агар с виолевым красным и желчью (VRBG) (M1684) и инкубируют при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.
3. Подтверждение: Проводят биохимические и серологические тесты.

Поиск Cronobacter (ISO 22964:2017)

1. Предварительное обогащение: Образцы (10 г в 90 мл) помещают в буферную пептонную воду (M1494I) и инкубируют при 34–38 °C в течение 18 ± 2 ч.
2. Селективное обогащение: 0,1 мл предварительно обогащенного образца вносят в 10 мл селективного бульона для Cronobacter (M1786I) и инкубируют при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.
3. Изоляция: Культуру высевают на изоляционный агар HiCrome™ Cronobacter (CCI Agar) (M2062I) и инкубируют при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.
4. Подтверждение: Проводят биохимические и серологические тесты.

Поиск Salmonella в воде (ISO 19250:2010)

1. Неселективное предварительное обогащение: В 50 мл BPW (M1494I) при комнатной температуре вносят образец или его разведения и инкубируют при 36 ± 2 °C в течение 18 ± 2 ч.
2. Селективное обогащение: 0,1 мл культуры переносят в 10 мл бульона RVS (M1448I) и инкубируют при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч; 1 мл культуры вносят в бульон MKTTn (M1496I) и инкубируют при 36 ± 2 °C в течение 24 ± 3 ч.
3. Подтверждение: Культуру высевают на модифицированный агар XLD (M031I) и инкубируют при 36 ± 2 °C в течение 24 ± 3 ч. Параллельно проводят посев на второй изоляционный агар. Затем выполняют биохимические и серологические тесты.

Технические характеристики

Культуральные характеристики

Восстановление при разведении (ISO 6887-1:2017)

Восстановление ± 30 % от исходного числа (на агаре с триптоном и соей M290). Время выдержки инокулированного образца: 45–60 мин при 20–25 °C. Инкубация чашек при 37 ± 2 °C в течение 18 ± 2 ч.

Восстановление при разведении (ISO 6887-1:2017, вариант 2)

Восстановление ± 30 % от исходного числа (на агаре с триптоном и соей M290). Время выдержки инокулированного образца: 1 ч ± 5 мин при 20 ± 2 °C. Инкубация чашек при 37 ± 2 °C в течение 18 ± 2 ч.

Продуктивность (ISO 6579-1:2017 и ISO 21528-1:2017)

Инкубация при 34–38 °C в течение 18 ± 2 ч.

Продуктивность (ISO 22964:2017)

Инкубация при 34–38 °C в течение 18 ± 2 ч.

Продуктивность (ISO 19250:2010)

Инкубация при 36 ± 2 °C в течение 24 ± 3 ч.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать для предотвращения образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников воспламенения и экстремальных температур.

Ограничения и меры предосторожности

1. Отдельные организмы могут иметь различные требования