Среда с отваром мяса для анаэробов HiMedia M149-500G (уп/100 гр)

Питательная среда с отваром мяса для анаэробов HiMedia M149-500G (среда R.C.) предназначена для культивирования аэробов и анаэробов, в частности патогенных видов Clostridium. Используется для анализа клинических, пищевых и водных проб, а также в качестве среды для поддержания стоковых культур.

Принцип измерения и интерпретация

Среда разработана для выделения и поддержания жизнеспособности строгих анаэробов, включая спорообразующие и неспорообразующие виды. В состав входит пептон HMH B, обеспечивающий аминокислоты и питательные вещества, а также глутатион — восстановитель, позволяющий расти облигатным анаэробам. Добавление декстрозы способствует быстрому и интенсивному росту анаэробных бактерий.

Интерпретация результатов:

• Рост: проявляется в виде помутнения среды или образования пузырьков газа.
• Протеолиз: почернение и распад частиц мяса указывают на протеолитическую активность анаэробов.
• Сахаролитическая активность: некоторые виды Clostridium разлагают сахара с образованием масляной и уксусной кислот, а также спиртов, что приводит к покраснению пептона HMH в среде и выделению газа.

Область применения

Среда применяется для:

• Выделения и идентификации Clostridium perfringens из пищевых продуктов (рекомендовано FDA).
• Оценки протеолитической активности анаэробов.
• Длительного хранения и поддержания жизнеспособности аэробных и анаэробных микроорганизмов.

Типы исследуемых образцов:

• Клинические материалы: фекалии, содержимое ран, ткани, гной и др.
• Образцы пищевой и молочной продукции.
• Пробы воды.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендировать 12,5 г порошка в 100 мл очищенной или дистиллированной воды (или 1,25 г в 10 мл для приготовления в пробирках).
2. Тщательно перемешать и оставить на 15 минут до полного увлажнения всех частиц.
3. Разлить по пробиркам или колбам.
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C и давлении $\approx$0,1 МПа (15 psi) в течение 15 минут.

Посев и инкубация

• Для анаэробных культур: инокуляцию следует проводить в нижней части пробирки, непосредственно в частицы мяса.
• Особенности роста: аэробы растут в верхней части среды, в то время как анаэробные виды развиваются глубже.
• Рекомендация: для достижения наилучших результатов использовать среду в день приготовления. Если это невозможно, среду следует прокипятить или подвергнуть воздействию пара в течение нескольких минут, дать остыть без встряхивания и затем произвести посев.

Выделение Clostridium из пищевых продуктов

1. Подготовить 10 % суспензию продукта в разбавляющем растворе — пептонной воде (M028) с помощью гомогенизатора (stomacher).
2. Выполнить разведения.
3. Посеять суспензии и разведения на среды: Willis and Hobbs Medium Base (M1375) и Tryptose Sulphite Cycloserine (T.C.S.) Agar Base (M837).
4. Поместить на инокулят диск с метронидазолом.
5. Инкубировать в анаэробных условиях при 37 °C в течение ночи.
6. Для подсчета клостридий перенести разведения на Perfringens Agar Base (O.P.S.P.) (M579). Инкубировать дубликаты посевов в аэробных и анаэробных условиях для дифференциации клостридий от других организмов.
7. Добавить часть суспензии в две пробирки со средой Cooked Medium: одну пробирку прогреть 10 мин при 80 °C, затем обе инкубировать как указано выше. Рост клостридий визуализируется как помутнение или пузырьки газа.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,2 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40

Дополнительные параметры

Контроль качества

Внешний вид: гранулы коричневого цвета. Цвет и прозрачность готовой среды: янтарный цвет, от прозрачного до слегка опалесцирующего супернатанта над нерастворимыми гранулами.

Культуральные характеристики

Результаты наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать для предотвращения комкования. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: до даты, указанной на этикетке.

Ограничения и меры предосторожности

• Ограничения: для подтверждения результатов необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.
• Меры безопасности: только для профессионального использования в лабораторных условиях (In Vitro). При работе с клиническими образцами соблюдать стандартные меры предосторожности и использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).
• Утилизация: загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.

Комплект поставки

• Среда с отваром мяса для анаэробов HiMedia M149-500G (упаковка 500 г, фасовка по 100 г).
• Сертификат соответствия: ФСЗ 2009/03707.