HiMedia M149-100G Среда Cooked M (R.C. среда)

Сухая питательная среда HiMedia M149-100G Cooked M (R.C. среда) для культивирования аэробных и анаэробных микроорганизмов. Рекомендуется для выделения патогенных клостридий из клинических, пищевых и водных образцов, а также используется в качестве среды для поддержания стоковых культур.

Принцип измерения и интерпретация

Среда предназначена для роста строгих анаэробов, в частности представителей рода Clostridium — грамположительных спорообразующих бактерий. Благодаря наличию пептона HMH B и глутатиона (восстанавливающего вещества), среда обеспечивает рост облигатных анаэробов. Добавление декстрозы способствует быстрому и интенсивному росту анаэробных бактерий, что ускоряет их идентификацию.

Интерпретация результатов:

• Рост характеризуется помутнением среды или образованием пузырьков газа.
• Почернение и распад частиц мяса свидетельствуют о протеолитической активности.
• Сахаролитические виды разлагают сахара с образованием масляной и уксусной кислот, а также спиртов; при этом пептон HMH в среде Робертсона приобретает красный оттенок с выделением газа.
• Протеолитические виды атакуют аминокислоты, что приводит к почернению и разложению пептона HMH B, сопровождающемуся появлением неприятного запаха.

Область применения

Среда применяется для анализа следующих типов образцов:

• Клинические материалы: фекалии, содержимое ран, ткани, гной и др.
• Образцы пищевых продуктов и молочной продукции.
• Пробы воды.

Для выделения Clostridium из пищевых продуктов рекомендуется подготовить 10 % суспензию образца в пептонной воде (M028) с помощью гомогенизатора (stomacher).

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 12,5 г порошка в 100 мл очищенной или дистиллированной воды (или 1,25 г в 10 мл для пробирок).
2. Тщательно перемешайте и оставьте на 15 минут до полного увлажнения всех частиц.
3. Разлейте по пробиркам или колбам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C и давлении $\approx$0,1 МПа (15 psi) в течение 15 минут.

Посев и инкубация

• Для анаэробных культур инокуляцию следует проводить в нижней части пробирки, непосредственно в частицах мяса.
• Аэробы растут в верхней части среды, анаэробы — в глубоких слоях.
• Для достижения наилучших результатов среду следует использовать в день приготовления. Если это невозможно, среду необходимо прокипятить или пропарить в течение нескольких минут, дать остыть без встряхивания и затем произвести посев.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 7,2 $\pm$ 0,2
• Эквивалент: Beef heart, solids

Общие параметры:

Контроль качества

• Внешний вид: гранулы коричневого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: янтарный цвет, супернатант от прозрачного до слегка опалесцирующего над нерастворимыми гранулами.
• Реакция: pH 7,00–7,40 (водная суспензия 12,5 % при 25 °C: 7,2 $\pm$ 0,2).

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухого порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать для предотвращения комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и меры предосторожности

• Среда предназначена только для профессионального использования in vitro.
• Для окончательного подтверждения результатов необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.
• Работа с клиническими образцами должна проводиться в соответствии с установленными правилами микробиологической безопасности.
• Загрязненные материалы после использования подлежат обязательному автоклавированию перед утилизацией.