HiMedia M1484-100G Полимиксин-пируват-яично-желточно-маннитная среда

Питательная селективная агаровая среда HiMedia M1484-100G Полимиксин-пируват-яично-желточно-маннитная среда производства HiMedia предназначена для культивирования Bacillus cereus и имеет конечный pH 7,4 ± 0,2. Среда используется для выделения и количественного определения Bacillus cereus в пищевых и молочных образцах, при этом Bacillus cereus неотличим от Bacillus thuringiensis только по культуральным характеристикам.

Назначение

Среда рекомендована для культивирования Bacillus cereus из пищевых и молочных образцов. Состав и показатели эффективности соответствуют требованиям ISO 21871:2006.

Состав

Состав на 100 мл:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных показателей эффективности.

Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 4,39 г порошка в 90 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при 121 °C в течение 15 мин. Указанное давление — 15 фунтов на кв. дюйм, ориентировочно 0,103 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерильное восстановленное содержимое одного флакона добавки PEMBA (FD200) и 5 мл стерильной эмульсии яичного желтка (FD045).
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Bacillus cereus — аэробная спорообразующая бактерия, широко распространённая в почве и выделяемая из различных овощей, сырых и обработанных пищевых продуктов. Bacillus cereus может вызывать пищевые отравления при употреблении загрязнённых сырых овощей, проростков, мяса, заварных кремов, супов, варёного или жареного риса. Бактерия также связана с глазными инфекциями, формированием абсцессов, менингитом, септицемией и раневыми инфекциями, а также является известной причиной мастита, особенно у овец и тёлок.

Полимиксин-пируват-яично-желточно-маннитная агаровая среда с бромтимоловым синим (PEMBA), составленная по Холбруку и Андерсону, предназначена для селективного выделения и количественного определения Bacillus cereus из пищевых продуктов. Среда также рекомендована стандартами ISO.

• Селективность обеспечивается полимиксином и критической концентрацией питательных компонентов.
• Среда поддерживает рост даже небольшого количества клеток и спор Bacillus cereus в пищевых продуктах с высокой общей микробной обсеменённостью.
• Низкое содержание пептона способствует спорообразованию.
• Пируват натрия уменьшает размер колоний микроорганизмов.
• Эмульсия яичного желтка выявляет выраженную реакцию помутнения, связанную с лецитиназой.
• Бромтимоловый синий служит индикатором pH и выявляет ферментацию маннита.
• Добавление сульфата полимиксина B до конечной концентрации 100 ЕД/мл среды обеспечивает селективность при выделении Bacillus cereus.
• Для подавления роста плесневых грибов может использоваться циклогексимид в концентрации 4 мг/л.

Некоторые штаммы Bacillus cereus дают очень слабую реакцию с яичным желтком. На этой среде Bacillus cereus неотличим от Bacillus thuringiensis. Bacillus cereus образует зубчатые сине-бирюзовые колонии, окружённые зоной помутнения среды.

Тип образцов

• Пищевые образцы.
• Молочные образцы.

Отбор и обработка образцов

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными руководствами и методиками.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный, сыпучий порошок кремового или зеленовато-жёлтого цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,8%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность базовой среды: прозрачный или слегка опалесцирующий гель зелёного цвета.

После добавления эмульсии яичного желтка: непрозрачный гель лесного зелёного цвета, формирующийся в чашках Петри.

Реакция среды

Реакция: для 4,4%-ного водного раствора базовой среды при 25 °C значение pH составляет 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Продуктивность

Культуральные характеристики оценивают после добавления PEMBA (FD200) и эмульсии яичного желтка (FD045), инкубации при 37 ± 1 °C в течение 21 ± 3–44 ± 4 ч.

Коэффициент восстановления принимают равным 100 % для роста бактерий на референсной среде — агаре с переваром соевых бобов и казеина, также известном как триптон-соевый агар.

Селективность

Культуральные характеристики оценивают после добавления PEMBA (FD200) и эмульсии яичного желтка (FD045), инкубации при 37 ± 1 °C в течение 44 ± 4 ч.

Специфичность

Культуральные характеристики оценивают после добавления PEMBA (FD200) и эмульсии яичного желтка (FD045), инкубации при 37 ± 1 °C в течение 44 ± 4 ч.

• — соответствующие номера WDCM.

Ранее Bacillus spizizenii был известен как Bacillus subtilis subsp. spizizenii.

Характеристики продукта

• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: питательная среда
• Масса: 100 г
• Температура хранения продукта: 10–30 °C

Условия хранения и срок годности

Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости. Приготовленную среду храните при 2–8 °C.

Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию.

Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте ёмкость. Э