HiMedia M1484-100G Полимиксин-пируват-яично-желточно-маннитная среда

Селективная питательная среда HiMedia M1484-100G Полимиксин-пируват-яично-желточно-маннитная (PEMBA) для культивирования Bacillus cereus. Рекомендуется для выделения и подсчета B. cereus в пищевых и молочных продуктах в соответствии со стандартом ISO 21871:2006.

Принцип измерения

Среда PEMBA является высокоспецифичной и селективной для изоляции B. cereus. Селективность обеспечивается добавлением полимиксина B сульфата и строгим контролем концентрации питательных веществ.

Основные механизмы анализа:

• Индикация ферментации: Бромтимоловый синий служит pH-индикатором для обнаружения ферментации маннита.
• Лецитиназная активность: Эмульсия яичного желтка позволяет выявить выраженную реакцию опалесценции (образование зоны помутнения вокруг колоний) за счет лецитиназной активности.
• Регуляция роста: Низкое содержание пептона способствует споруляции, а пируват натрия уменьшает размер колоний микроорганизмов.

Методика приготовления и использования

1. Суспендируйте 4,39 г порошка в 90 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте содержимое одного флакона добавки PEMBA Supplement (FD200) и 5 мл стерильной эмульсии яичного желтка (FD045).
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Область применения

Среда предназначена для анализа проб пищевых продуктов и молочной продукции. Применяется для выявления B. cereus, который является возбудителем пищевых отравлений (при употреблении загрязненных овощей, мяса, заварных кремов, супов, вареного или жареного риса), а также вызывает глазные инфекции, абсцессы, менингит и септикемию.

Технические характеристики

Состав (г / 100 мл)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,4 $\pm$ 0,2
• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до зеленовато-желтого цвета.
• Цвет готовой среды: базовый гель — зеленый, прозрачный или слегка опалесцирующий; после добавления эмульсии желтка — темно-зеленый непрозрачный гель.
• Желирование: плотный гель (сопоставимо с 1,8 % агаром).

Дополнительные параметры

Культуральные характеристики

Инкубация проводится при 37 $\pm$ 1 °C. Оценка продуктивности осуществляется в интервале от 21 $\pm$ 3 до 44 $\pm$ 4 часов.

Ограничения и интерпретация результатов

• B. cereus образует синие колонии с зазубренными краями, окруженные зоной помутнения.
• На данной среде B. cereus неотличим от B. thuringiensis.
• Некоторые штаммы B. cereus могут проявлять очень слабую реакцию с яичным желтком.
• Для окончательного подтверждения идентификации B. cereus после анализа характеристик колоний необходимо провести дополнительные биохимические тесты.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Меры предосторожности: продукт гигроскопичен, необходимо плотно закрывать флакон для предотвращения комкования.
• Утилизация: использованные среды и загрязненные материалы подлежат обязательному автоклавированию или сжиганию.