Диагностическая сухая среда для испытания антибиотика № 9 HiMedia M147-500G (Polymyxin Base Agar) производства HiMedia. Рекомендуется в качестве базового слоя для количественного определения препаратов, содержащих полимиксин B.
Область применения
Среда используется для анализа полимиксина B, колистиметата натрия и колистина с использованием Bordetella bronchiseptica в качестве тест-организма. Также применяется для анализа карбенициллина с использованием Pseudomonas aeruginosa. Среда соответствует спецификациям Грува и Рандалла (Grove and Randall).
Принцип действия
Триптон и соевый пептон служат источниками необходимых питательных веществ. Декстроза (глюкоза) стимулирует рост микроорганизмов, обеспечивая их углеродом и энергией. Фосфаты усиливают буферное действие, а хлорид натрия поддерживает осмотический баланс. Концентрация агара обеспечивает контроль диффузионной активности антибиотиков полимиксина B и создает твердый субстрат для поддержки посевного слоя агара.
Методика проведения анализа
Для проведения анализа базовый агар должен быть приготовлен в тот же день, когда проводится тест. При использовании цилиндрического метода требуется базовый слой объемом 21 мл. После затвердевания базовой среды на неё наносится посевной слой, инокулированный стандартизированной культурой; крайне важна равномерность распределения слоя.
Приготовление среды
- Суспендируйте 50 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
- Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
- Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут.
- Охладите до 45–50 °C.
- Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри или иные подходящие емкости.
Технические характеристики
Состав, г/л:
| Компонент | г/л |
|---|
| Триптон | 17,000 |
| Соевый пептон | 3,000 |
| Хлорид натрия | 5,000 |
| Гидрофосфат калия двузамещенный | 2,500 |
| Декстроза (глюкоза) | 2,500 |
| Агар | 20,000 |
- Конечный pH (при 25 °C): 7,2 ± 0,2
- Сертификат: ФСЗ 2009/03707
- Вес: 500 г
Дополнительные параметры:
| Параметр | Значение |
|---|
| Происхождение компонентов | Животное |
| Тип продукта | Стандартный |
| Физическая форма | Порошок |
| Тип упаковки | ПНД (HDPE) |
Контроль качества
- Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета.
- Желирование: плотный гель, сопоставимый с 2,0% агаром.
- Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель в чашках Петри.
- Реакция 5% (масса/объем) водного раствора при 25 °C: pH 7,2 ± 0,2.
- Диапазон pH: 7,00–7,40.
Культуральные характеристики
Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.
| Организм | Посевная доза (КОЕ) | Рост | Восстановление | Анализируемые антибиотики |
|---|
| Bordetella bronchiseptica ATCC 4617 | 50–100 | хороший | 50–70 % | Колистиметат натрия, колистин, полимиксин B |
| Pseudomonas aeruginosa ATCC 25619 | 50–100 | обильный | ≥70 % | Карбенициллин |
| Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 (00025*) | 50–100 | обильный | ≥70 % | Карбенициллин |
* Соответствующие номера WDCM.
Условия эксплуатации и хранения
- Температура хранения: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
- Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков.
- Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.
- Ограничения: необходимо использовать только свежеприготовленные среды, так как использование старых пластин может привести к ошибочным результатам.
Меры предосторожности и утилизация
- При работе использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица.
- Соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
- Утилизация: загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с установленными лабораторными процедурами.