Пектиновая среда с кристаллическим фиолетовым HiMedia M1392-500G (уп/500 гр)

Питательная микробиологическая среда Пектиновая среда с кристаллическим фиолетовым HiMedia M1392-500G (уп/500 гр) предназначена для культивирования пектолитических микроорганизмов, разлагающих полипектат натрия. Среда применяется для выявления микроорганизмов, продуцирующих пектолитические ферменты, и обладает селективностью в отношении грамотрицательных бактерий.

Назначение

Пектиновая среда с кристаллическим фиолетовым предназначена для культивирования пектолитических микроорганизмов, способных разлагать полипектат натрия, входящий в состав среды. Большинство пектолитических микроорганизмов связано с сельскохозяйственным сырьём и почвой.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с рабочими параметрами среды.

Принцип действия и интерпретация результатов

Полипектат или пектат представляет собой пектиновую кислоту, карбоксильные группы которой находятся в солевой форме. Пектинолитические микроорганизмы — это микроорганизмы, разлагающие пектин; пектолитические микроорганизмы — микроорганизмы, разлагающие пектиновую кислоту или пектат.

Кристаллический фиолетовый придаёт среде селективность в отношении грамотрицательных бактерий и подавляет рост нежелательных микроорганизмов. Полипектат служит источником углерода для микроорганизмов, использующих полипектат.

Образование фермента культурой на этой среде выявляют одним из следующих способов:

• по углублениям в геле вокруг колонии, возникающим вследствие разложения субстрата;
• после заливки чашки раствором осадителя. В качестве осадителя можно использовать 1 % водный раствор бромида гексадецилтриметиламмония.

Вокруг колоний микроорганизмов, продуцирующих фермент, появляется прозрачная зона: субстрат в ней разложен, поэтому осаждение не происходит. Вокруг непродуцирующих колоний сохраняется непрозрачный гель, содержащий неразложенный пектиновый или пектатный субстрат.

Для исследования ферментативной активности в агаризованном геле можно сделать отверстия пробочным сверлом и исследовать жидкие образцы, например фильтраты культур. Такой способ анализа ферментов называют лунковым или чашечным методом.

Приготовление и использование среды

1. Суспендируйте 24,96 г обезвоженной среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Поместите ёмкость на магнитную мешалку без нагрева.
3. При перемешивании обеспечьте смачивание каждой частицы среды.
4. После равномерного смачивания всех частиц, находящихся во взвеси, включите нагрев и при непрерывном перемешивании доведите суспензию почти до кипения.
5. В горячем состоянии проверьте pH и при необходимости откорректируйте его 1 М раствором NaOH. Добавляйте NaOH по каплям, не допуская превышения требуемого значения pH.
6. Нагрейте среду до кипения для полного растворения.
7. Закройте колбу алюминиевой фольгой, а не ватной пробкой.
8. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C в течение 25 мин; давление 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа; ≈1,03 бар).
9. Не допускайте образования пены.
10. Как можно быстрее разлейте горячую среду по чашкам Петри при температуре 50 °C, поскольку среда быстро затвердевает и не подлежит повторному расплавлению.
11. Выполните штриховой или точечный посев на чашки.

Поверхность агара перед использованием должна быть полностью сухой.

Технические характеристики

• Наименование: Crystal Violet Pectate Medium — пектиновая среда с кристаллическим фиолетовым
• Артикул: M1392-500G
• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: среда
• Тип среды: химически определённая
• Тип продукта: стандартный
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: HDPE — полиэтилен высокой плотности
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• pH 2,49 % масс./об. водного раствора при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40
• Гелеобразование: полутвёрдый гель, сопоставимый с 0,4 % агаровым гелем
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705

Контроль качества

Внешний вид

Кремовый или жёлтый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Полутвёрдый гель, сопоставимый с 0,4 % агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри или пробирках образуется гель голубовато-серого цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция среды

Реакция 2,49 % масс./об. водного раствора при 25 °C: pH 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 72 ч.

Условия хранения и срок годности

• Хранение сухой среды: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Хранение приготовленной среды: при 2–8 °C.
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.

Область применения

Среда используется в микробиологических лабораториях для культивирования и выявления пектолитических микроорганизмов, а также для качественной оценки продукции пектолитических ферментов по зонам разложения субстрата вокруг колоний.

Сравнительное техническое отличие

В отличие от неспецифических питательных сред, состав M1392 содержит полипектат натрия как субстрат для пектолитических микроорганизмов и кристаллический фиолетовый для селективного подавления нежелательного роста.