Пектиновая среда с кристаллическим фиолетовым HiMedia M1392-500G (уп/500 гр)

Пектиновая среда с кристаллическим фиолетовым HiMedia M1392-500G (уп/500 гр) предназначена для культивирования пектолитических микроорганизмов, способных расщеплять натрий-полипектат. Среда используется для селективного выделения грамотрицательных бактерий, ассоциированных с почвой и сельскохозяйственной продукцией.

Принцип измерения и интерпретация

Полипектат (пектат) представляет собой пектиновую кислоту, в которой карбоксильные группы находятся в форме соли. Пектолитические организмы расщепляют пектиновую кислоту или пектат.

В состав среды входит кристаллический фиолетовый, который обеспечивает селективность в отношении грамотрицательных бактерий и подавляет рост нежелательных микроорганизмов. Полипектат служит источником углерода для организмов-утилизаторов.

Выработка ферментов культурой на данной среде определяется одним из двух способов:

1. Наблюдение углублений в геле вокруг колонии, где произошла деградация субстрата.
2. Заливка чашки раствором-осадителем (например, 1 % водным раствором гексадецилтриметиламмоний бромида). Вокруг колоний-продуцентов появляется прозрачная зона (где субстрат расщеплен и осаждение не происходит), в то время как вокруг непроизводящих колоний остается матовый гель, содержащий нерасщепленный пектат.

Для изучения активности ферментов в жидких образцах (например, фильтратах культур) может применяться метод «лунок» (well plate или cup plate technique): в агаровом геле с помощью просекателя делают отверстия, куда вносятся исследуемые образцы.

Методика приготовления и использования

1. Суспендируйте 24,96 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Поместите раствор на магнитную мешалку без нагрева. При перемешивании убедитесь, что каждая частица увлажнена.
3. После равномерного увлажнения всех частиц включите нагрев и доведите смесь почти до кипения при постоянном перемешивании.
4. В горячем состоянии проверьте pH и, при необходимости, скорректируйте его с помощью 1М NaOH (добавлять по каплям, чтобы не допустить избыточного защелачивания).
5. Доведите раствор до кипения для полного растворения компонентов среды.
6. Закройте колбу алюминиевой фольгой (вместо хлопковой пробки).
7. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 25 минут.
8. Избегайте пенообразования. Разлейте среду по чашкам Петри как можно скорее, пока она горячая (при температуре около 50 °C), так как среда быстро затвердевает и не подлежит повторному плавлению.
9. Выполните посев методом штриха или точечно.

Примечание: Перед использованием поверхность агара должна быть полностью сухой.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 7,2 $\pm$ 0,2
• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета
• Желирование: полутвердое, сопоставимо с 0,4 % агаровым гелем
• Цвет и прозрачность готовой среды: голубовато-серый, прозрачный или слегка опалесцирующий гель

Спецификации

Контроль качества

Культуральные характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 72 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: в плотно закрытом контейнере при температуре ниже 30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Дополнительная информация

• Сертификат: ФСЗ 2009/03705
• Назначение: Питательная среда для микробиологического анализа.