Среда Бриант и Бурки для выделения клостридий HiMedia M1385-500G (уп/500 гр)

Элективная питательная среда Среда Бриант и Бурки для выделения клостридий HiMedia M1385-500G (уп/500 гр) предназначена для выявления и количественного определения спор лактатсбраживающих Clostridium в молоке и молочных продуктах; конечный pH составляет 5,9 ± 0,2. Среда применяется для определения спор газообразующих клостридий методом наиболее вероятного числа (МВЧ) и требует создания анаэробных условий культивирования.

Назначение и область применения

Среда рекомендована для выявления и количественного определения спор лактатсбраживающих Clostridium в молоке и молочных продуктах. Газообразующие клостридии вызывают вспучивание сыров в молочной промышленности; образующийся при росте микроорганизмов газ приводит к дефекту, известному как маслянокислое вспучивание, и ухудшает вкус продукта.

Основной вид, связанный с маслянокислым вспучиванием, — Clostridium tyrobutyrium. В нормальных условиях применения среда также допускает рост других микроорганизмов, не имеющих прямого отношения к порче сыра, включая Clostridium sporogenes и Clostridium butyricum.

• Тип питательной среды: элективный
• Назначение изделия: питательная среда
• Тип образца: молочные образцы
• Происхождение: животное
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности. Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

Принцип измерения и интерпретация

Среда Бриант и Бурки используется для количественного определения спор газообразующих клостридий, вызывающих вспучивание сыров в молочной промышленности. Споры клостридий устойчивы к нагреванию и поэтому могут загрязнять рассолы для сыров.

Рекомендуемая методика определения Clostridium — количественный подсчёт спор методом наиболее вероятного числа (МВЧ).

Резазурин является окислительно-восстановительным индикатором и контролирует содержание кислорода:

• в аэробных условиях цвет среды изменяется на розовый;
• в анаэробных условиях среда становится бесцветной;
• розовый цвет указывает на присутствие кислорода в среде;
• после кипячения розовый цвет изменяется на бесцветный.

Питательный состав базовой среды, в частности триптон, дрожжевой экстракт, пептон HM B и L-цистеин гидрохлорид, способствует быстрому росту видов Clostridium. Ацетат натрия стимулирует прорастание спор и повышает селективность среды. В анаэробных условиях лактат натрия сбраживается Clostridium tyrobutyricum. Рост клостридий сопровождается образованием газа, который вызывает вспучивание сыра и приводит к появлению постороннего вкуса.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 33,0 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 5 г лактата натрия.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Тщательно перемешайте.
4. Разлейте приготовленную среду по пробиркам или колбам в соответствии с требуемой процедурой.
5. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (ориентировочно ≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.

Подготовка образцов и проведение анализа

1. Предварительно деконтаминируйте исследуемый образец нагреванием при 75 °C в течение 10 мин. Такая обработка уничтожает вегетативные формы микроорганизмов, сохраняя споры.
2. Пробирки с питательной средой прокипятите для восстановления анаэробных условий.
3. Охладите пробирки до 25–30 °C.
4. Внесите исследуемый образец в подготовленные пробирки.
5. Налейте поверх среды слой стерильного парафина толщиной 2 см.
6. Инкубируйте пробирки при 37 °C до 7 суток.
7. Осматривайте пробирки каждые 48 ч.
8. Поднятие парафиновой пробки указывает на образование газа.
9. Пробирки считают положительными при явном газообразовании.
10. Для расчёта количества Clostridia используют индекс наиболее вероятного числа (МВЧ).
11. После завершения работы контаминированные материалы стерилизуйте автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный свободносыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

При нагревании — прозрачный раствор светло-янтарного цвета; после охлаждения среда становится розово-красной.

Реакция среды

Реакция 3,3 % масс./об. водного раствора при 25 °C:

• pH: 5,9 ± 0,2

Диапазон pH

5,70–6,10.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют в анаэробных условиях после инкубации при 35–37 °C в течение 6 суток.

Технические характеристики

Ограничения применения

1. Для роста Clostridia необходимо обеспечить надлежащие анаэробные условия.
2. Некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост из-за различий в пищевых потребностях.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 15–25 °C
• Условия хранения: в плотно закрытой ёмкости, в сухом проветриваемом помещении
• Защита при хранении: от экстремальных температур и источников воспламенения
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке

После вскрытия контейнер необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии. Среда гигроскопична; попадание влаги может привести к образованию комков. Неправильное хранение также может вызвать комкование. После каждого использования контейнер следует плотно закрывать. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Меры предосторожности

Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой. При работе используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Правила безопасности могут быть приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания. При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке и в пределах срока годности, при хранении в рекомендованном температурном диапазоне.