HiMedia M1282-100G Полужидкая среда Раппапорта-Вассилиадиса

Полужидкая среда Раппапорта-Вассилиадиса HiMedia M1282-100G для обнаружения подвижных видов Salmonella в пищевых, фекальных и экологических образцах. Применяется в качестве селективного метода обогащения; позволяет выявить большее количество положительных проб по сравнению с рутинными процедурами обогащения.

Принцип измерения

Среда модифицирована согласно методике DeSmedt et al. Принцип работы основан на способности видов Salmonella мигрировать в селективной среде, конкурируя с другими подвижными организмами, что приводит к образованию матовых ореолов роста.

• Триптоза и триптон: обеспечивают азот- и углеродсодержащие вещества, а также основные питательные компоненты.
• Фосфаты: обеспечивают буферную емкость среды.
• Оксалат малахитового зеленого и новобиоцин: ингибируют рост многих грамположительных бактерий.

Среда не подходит для обнаружения неподвижных штаммов Salmonella.

Методика проведения анализа

1. Приготовление среды:
   • Суспендируйте 31,66 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
   • Нагрейте до кипения при постоянном перемешивании до полного растворения.
   • ВНИМАНИЕ: НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ.
   • Охладите до 45–50 °C.
   • Асептически добавьте содержимое 1 флакона селективной добавки № 20 (FD290) или 4 флаконов селективной добавки № 5 (FD096).
   • Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.
   • Высушите среду на воздухе при комнатной температуре не менее одного часа.
2. Посев:
   • Нанесите 3 капли (0,1 мл) культуры после предварительного обогащения (возрастом 16–20 часов) отдельными точками на поверхность высушенной среды.
3. Инкубация:
   • Инкубируйте чашки в вертикальном положении при 42 °C до 24 часов.
4. Интерпретация:
   • Подвижные бактерии образуют ореол или зону роста, исходящую из точки инокуляции.
   • Виды Salmonella образуют колонии соломенного цвета.
   • Для подтверждения чистоты культуры и проведения биохимических/серологических тестов субкультивирование проводят с внешнего края ореола.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 5,2 ± 0,2
• Диапазон pH: 5,00–5,40

Дополнительные параметры

Область применения

• Клинические образцы: фекалии.
• Пищевые образцы: мясо и мясопродукты.
• Экологические образцы: пробы окружающей среды.

Для повышения эффективности выделения Salmonella из фекалий рекомендуется использовать среду в комбинации с прямым посевом и обогащением в бульоне селенита F (M052A) с последующим субкультивированием на агаре XLD (M031) или маннит-лизин-агаре (M1071).

Культуральные характеристики

Результаты после инкубации при 42–43 °C в течение 18–24 часов с добавлением селективной добавки № 20 (FD290) или № 5 (FD096).

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-желтого до светло-голубого цвета.
• Желирование: полужидкий гель, сопоставим с гелем 0,27 % агара.
• Цвет и прозрачность: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий полужидкий гель зеленовато-голубого цвета, возможен небольшой осадок.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть для предотвращения образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Ограничения:
  • Некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост из-за вариативности потребностей в питательных веществах.
  • Чашки должны инкубироваться строго в вертикальном и устойчивом положении из-за низкого содержания агара.
  • Необходимо использовать только предварительно высушенные на воздухе чашки, иначе возможны ошибочные результаты.

Меры предосторожности и утилизация

• Использование только в лабораторных условиях (In Vitro) профессиональным персоналом.
• При работе использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица.
• Все загрязненные материалы перед утилизацией должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации в соответствии с установленными лабораторными правилами работы с инфекционными материалами.