HiMedia M1282-100G Полужидкая среда Раппапорта-Вассилиадиса

Микробиологическая полужидкая среда HiMedia M1282-100G Полужидкая среда Раппапорта-Вассилиадиса с конечным pH 5,2 ± 0,2. Среда предназначена для выявления подвижных видов Salmonella в пищевых продуктах, фекалиях и образцах окружающей среды и не подходит для обнаружения неподвижных штаммов Salmonella.

Назначение

Среда используется для выявления подвижных видов Salmonella в следующих образцах:

• клинические образцы: фекалии;
• пищевые образцы: мясо и мясные продукты;
• образцы окружающей среды.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Конечный pH при 25 °C: 5,2 ± 0,2.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 31,66 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагревайте при частом перемешивании до кипения, пока среда полностью не растворится.
3. Не автоклавируйте среду.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки NO 20 (FD290) или четырёх флаконов селективной добавки NO 5 (FD096).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.
8. Высушивайте чашки с разлитой средой на воздухе при комнатной температуре не менее 1 ч.

Принцип действия и интерпретация

Полужидкая модифицированная среда Раппапорта—Вассилиадиса приготовлена по рецептуре, описанной DeSmedt и соавторами. Метод основан на способности видов Salmonella мигрировать в селективной среде и конкурировать с другими подвижными микроорганизмами, в результате чего от места посева формируется непрозрачный ореол роста.

Триптоза и триптон обеспечивают азотистые и углеродистые вещества, а также другие необходимые для роста питательные компоненты. Фосфат обеспечивает высокую буферную ёмкость среды. Оксалат малахитового зелёного и новобиоцин подавляют рост многих грамположительных бактерий.

Для выделения видов Salmonella из фекалий среду можно использовать в сочетании с прямым посевом и обогащением в селенитном бульоне F (M052A). Последующий пересев на агар XLD (M031) или маннитол-лизин-агар (M1071) обеспечивает более высокий выход выделения культур.

Посейте 3 капли (0,1 мл) предобогащённой культуры возрастом 16–20 ч на отдельные участки поверхности высушенной среды. Инкубируйте чашки в вертикальном неподвижном положении при 42 °C до 24 ч. Подвижные бактерии образуют ореол или зону роста, распространяющуюся от места инокуляции. Колонии видов Salmonella имеют соломенную окраску. Для подтверждения чистоты культуры и последующего проведения биохимических и серологических тестов можно выполнять пересев с внешнего края ореола роста.

В отличие от жидких обогатительных процедур, среда выявляет подвижность микроорганизмов непосредственно по радиальному распространению зоны роста на полужидкой поверхности.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте подходящие методы обращения с материалом в соответствии с установленными руководствами.

Для пищевых образцов применяйте подходящие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Из-за различий в пищевых потребностях некоторые штаммы могут плохо расти на этой среде.
2. Чашки следует инкубировать в вертикальном неподвижном положении, поскольку среда содержит небольшое количество агара.
3. Необходимо использовать высушенную на воздухе среду; в противном случае возможны ошибочные результаты.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или светло-синий однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Полужидкая среда, сопоставимая с 0,27%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий полужидкий гель зеленовато-синего цвета; возможно наличие небольшого осадка.

Реакция

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 3,16 % при 25 °C: pH 5,2 ± 0,2.

Диапазон pH

5,00–5,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 42–43 °C в течение 18–24 ч с добавлением селективной добавки NO 20 (FD290) или NO 5 (FD096).

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

• Наименование: полужидкая модифицированная среда Раппапорта—Вассилиадиса
• Назначение изделия: среда
• Физическая форма: порошок
• Масса: 100 г
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Температура хранения закрытого продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Конечный pH при 25 °C: 5,2 ± 0,2
• Диапазон pH: 5,00–5,40
• Содержание агара: 0,27 % в приготовленном геле

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Хранение и срок годности

Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытой упаковке. Приготовленную среду храните при температуре 2–8 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию. Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте упаковку. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение заявленного срока годности.

Меры безопасности

Продукт предназначен для диагностики in vitro и только для профессионального применения. Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.

При работе с продуктом и образцами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами. При обращении с клиническими образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Руководства по безопасности приведены в