Среда для испытания пантотената AOAC HiMedia M1281-100G (уп/100 гр)

Питательная среда для испытания пантотената AOAC HiMedia M1281-100G (уп/100 гр) — порошкообразная среда для микробиологического анализа. Среда предназначена для определения пантотеновой кислоты или солей пантотената с использованием Lactobacillus plantarum ATCC 8014; приготовленную среду хранят при температуре ниже 8 °C и используют свежеприготовленной.

Назначение

Среда рекомендована AOAC для микробиологического испытания пантотеновой кислоты или солей пантотената с использованием Lactobacillus plantarum ATCC 8014 в качестве тест-организма.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 7,3 г среды в 100 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Тщательно перемешайте для равномерного распределения небольшого количества осадка.
4. Разлейте по 5 мл в каждую пробирку для анализа, добавляя стандарт или исследуемую пробу в возрастающих количествах.
5. Доведите объём содержимого каждой пробирки до 10 мл дистиллированной водой.
6. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 10 мин и давлении 15 фунтов, что соответствует приблизительно 0,10 МПа.
7. Немедленно охладите среду.

Обычно удовлетворительные результаты получают при следующих уровнях пантотеновой кислоты: 0,0; 0,005; 0,01; 0,015; 0,02 и 0,025 мкг на пробирку для анализа объёмом 10 мл.

Принцип измерения и интерпретация

Среда представляет собой сухую обезвоженную питательную основу, не содержащую пантотеновую кислоту или пантотенат, но включающую остальные питательные вещества и витамины, необходимые для культивирования Lactobacillus plantarum ATCC 8014 в соответствии с методикой AOAC.

Для построения стандартной кривой в среду добавляют пантотенат в определённых возрастающих концентрациях. Увеличение концентрации пантотената вызывает соответствующее увеличение роста культуры, которое измеряют турбидиметрическим методом.

Стандартную кривую строят на миллиметровой бумаге следующим образом: откладывают оптическую плотность как функцию концентрации пантотената и проводят кривую, наилучшим образом соответствующую полученным точкам. Концентрацию пантотената определяют по стандартной кривой.

Культуральная характеристика

Микробиологическое испытание пантотената проводят с использованием Lactobacillus plantarum ATCC 8014 после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Рост

Наблюдается хороший рост. Постепенное увеличение роста при повышении концентрации стандартного пантотената — 0,0; 0,005; 0,01; 0,015; 0,02 и 0,025 мкг на пробирку для анализа — регистрируется как эквивалентное увеличение оптической плотности при длине волны 620 нм.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до светло-жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор светло-жёлтого цвета, который может содержать небольшое количество осадка.

Реакция среды

Реакция 7,3 % масс./об. водного раствора при 25 °C:

• pH: 6,7 ± 0,2

Диапазон pH

• Диапазон pH: 6,50–6,90

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения: при температуре ниже 8 °C
• Требование к использованию: использовать свежеприготовленную среду
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке

Технические характеристики

• Назначение изделия: питательная среда
• Производитель: HiMedia
• Артикул: M1281-100G
• Физическая форма: порошок
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: стеклянный флакон
• Масса упаковки: 100 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705

Техническая документация и методическая основа

Методика основана на микробиологическом определении пантотената по приросту культуры Lactobacillus plantarum ATCC 8014 и последующем турбидиметрическом измерении оптической плотности при 620 нм.