Забуференная пептонная вода с NaCl HiMedia M1275-500G (уп/500 гр)

Базовая питательная среда Забуференная пептонная вода с NaCl HiMedia M1275-500G (уп/500 гр) содержит пептон, фосфаты и хлорид натрия. Среда применяется как разбавитель и для предварительного обогащения проб при микробиологических исследованиях; низкое содержание питательных веществ не предназначено для выращивания микроорганизмов.

Назначение и область применения

Среда рекомендована в качестве разбавителя при проведении испытаний на микробиологические пределы различных образцов.

В соответствии с рекомендациями Индийской фармакопеи забуференная пептонная вода с NaCl используется как разбавитель при количественных посевах клинического и другого материала.

Основной тип образцов:

• пищевые продукты;
• молочные продукты.

Среда также применяется для предварительного обогащения пищевых образцов, включая сухие корма для птицы, перед выделением Salmonella на селективных средах.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных показателей эффективности.

• Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2
• Массовая концентрация водного раствора для определения реакции: 1,60 % м/о

Приготовление среды

1. Взвесьте 16,09 г сухой среды и суспендируйте в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. При необходимости добавьте 0,1–1 % м/о полисорбата 20 или полисорбата 80. Выбор эмульгирующего агента зависит от типа разбавляемого пищевого продукта и содержания жира в исследуемом образце.
4. Разлейте приготовленную среду в пробирки или колбы в требуемом объёме.
5. Стерилизуйте автоклавированием при 121 °C в течение 15 мин; избыточное давление составляет 15 фунтов/дюйм², что соответствует примерно 0,10 МПа.

Принцип действия и интерпретация

Забуференная пептонная вода представляет собой среду предварительного обогащения, предназначенную для восстановления сублетально повреждённых клеток Salmonella перед переносом на селективную среду.

Среда не содержит ингибиторов, обладает высокой буферной ёмкостью и создаёт условия для ресусцитации клеток, повреждённых в результате процессов консервирования пищевых продуктов. Сублетальное повреждение Salmonella может возникать под воздействием нагревания, высушивания, высокого осмотического давления, консервантов или изменений pH.

В период предварительного обогащения среда способствует восстановлению повреждённых клеток, которые могут быть чувствительны к низкому pH. Это особенно важно для овощных образцов с низкой буферной ёмкостью.

Пептон служит источником углерода, азота, витаминов и минеральных веществ. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс, а фосфаты буферируют среду и предотвращают повреждение бактерий вследствие изменения pH. Питательный бульон обеспечивает высокую степень ресусцитации сублетально повреждённых бактерий и поддерживает интенсивный рост восстановившихся клеток.

Для выделения Salmonella из мяса, искусственно контаминированного сублетально повреждёнными микроорганизмами, предварительное обогащение в забуференной пептонной воде с NaCl при 37 °C в течение 18 ч перед селективным обогащением в тетратионатном желчно-зелёном бульоне (M1255) показало лучшие результаты по сравнению с прямым селективным методом.

Лактозный бульон часто применяют как среду предварительного обогащения, однако он может снижать эффективность восстановления Salmonella. Забуференная пептонная вода с NaCl отличается от лактозного бульона отсутствием лактозного компонента и применением фосфатной буферной системы для поддержания pH в период восстановления клеток.

Методика предварительного обогащения и выделения

1. Внесите 10 г образца в 50 мл приготовленной забуференной пептонной воды с NaCl.
2. Инкубируйте среду при 35–37 °C в течение 18 ч.
3. Перенесите 10 мл полученной культуры в 100 мл тетратионатного бульона (M032).
4. Инкубируйте при 43 °C в течение 24–48 ч.
5. Выполните пересев на селективные чашечные среды.
6. Исследуйте чашки на наличие характерных колоний Salmonella.

Требования к образцам и обращению

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно установленным методическим руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед вскрытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные соответствующими руководствами.
• Требования безопасности приведены в индивидуальных паспортах безопасности.

Ограничения применения

Среда содержит небольшое количество питательных веществ и поэтому не рекомендуется для выращивания микроорганизмов.

Контроль качества

Внешний вид сухой среды

Белый или кремовый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Бесцветный или бледно-жёлтый прозрачный раствор без осадка.

Реакция среды

Реакция водного раствора с концентрацией 1,60 % м/о при 25 °C:

• pH: 7,0 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,80–7,20

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после восстановления на соево-казеиновом переваренном агаре при инкубации 30–35 °C в течение 18–24 ч для бактерий и на декстрозном агаре Сабуро при 30–35 °C в течение 24–48 ч.