5Х минимальная среда HiMedia M1253-500G (уп/500 гр)

Сухая питательная среда 5Х минимальная среда HiMedia M1253-500G (уп/500 гр) для культивирования рекомбинантных штаммов Escherichia coli. Применяется в исследованиях по генетической рекомбинации; состав среды химически определен.

Принцип работы

Среда подготовлена на основе рецептуры Дэвиса и др. (Davis et al). Хлорид аммония выступает в качестве источника азота, а глюкоза служит источником углерода и энергии. Два фосфата обеспечивают буферизацию среды, предотвращая резкие изменения pH при утилизации углеводов. Ионы кальция и магния необходимы для ряда ферментативных реакций, включая репликацию ДНК, а хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.

Состав

Состав, г/л:

Методика приготовления

Приготовление 5X концентрата

1. Растворите 56,4 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости прогрейте раствор до полного растворения компонентов.
3. Разлейте раствор порциями по 200 мл.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа) в течение 15 минут.

Приготовление рабочей минимальной среды

1. Смешайте 200 мл стерильного 5X концентрата с 750 мл стерильной дистиллированной воды.
2. В асептических условиях добавьте 20 мл стерильного (фильтрованного) 20 % раствора глюкозы и 2 мл стерильного 0,1 М раствора сульфата магния (MgSO₄).
3. При необходимости добавьте 0,1 мл стерильного 1,0 М раствора хлорида кальция или необходимые аминокислоты.
4. Тщательно перемешайте и доведите конечный объем до 1000 мл.

Контроль качества

• Внешний вид: белый или кремовый однородный свободно текущий порошок.
• Цвет и прозрачность готовой среды: бесцветный прозрачный раствор без осадка.
• Реакция: pH 6,8 ± 0,2 для 5,64 % (масса/объем) водного раствора при 25 °C.
• Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Технические характеристики

• Происхождение: химически определенная
• Тип продукта: стандартная
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)
• Сертификат: ФСЗ 2009/03708

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре ниже 30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.