5Х минимальная среда HiMedia M1253-500G (уп/500 гр)

Химически определённая питательная среда 5Х минимальная среда HiMedia M1253-500G (уп/500 гр) с конечным pH 6,8 ± 0,2. Среда предназначена для культивирования рекомбинантных штаммов Escherichia coli; рабочий минимальный раствор готовят с добавлением стерильного раствора глюкозы и сульфата магния.

Назначение

5Х минимальная среда предназначена для культивирования рекомбинантных штаммов Escherichia coli и применяется в исследованиях генетической рекомбинации.

Среда приготовлена на основе рецептуры Davis et al. Хлорид аммония служит источником азота, глюкоза — источником углерода и энергии, а два фосфата буферируют среду и препятствуют изменению pH при утилизации углеводов. Ионы кальция и магния участвуют в различных ферментативных реакциях, включая репликацию ДНК. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных эксплуатационных параметров.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 56,4 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте раствор для полного растворения среды.
3. Разлейте раствор порциями по 200 мл.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Для приготовления минимальной среды добавьте 200 мл стерильного 5-кратного раствора минимальных солей к 750 мл стерильной дистиллированной воды.
6. Асептически добавьте 20 мл профильтрованного стерилизованного 20 % раствора глюкозы.
7. Добавьте 2 мл стерильного 0,1 М раствора сульфата магния (MgSO₄).
8. При необходимости добавьте 0,1 мл стерильного 1,0 М раствора хлорида кальция или аминокислоты в требуемом количестве.
9. Тщательно перемешайте.
10. Доведите конечный объём до 1000 мл.

Контроль качества

Внешний вид

Белый или кремовый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Бесцветный прозрачный раствор без осадка.

Реакция

Реакция водного раствора концентрацией 5,64 % м/о при 25 °C: pH 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики M1253 определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

Хранить при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой ёмкости.

Приготовленную среду хранить при температуре 2–8 °C.

Использовать до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.