Модифицированная среда Дункана и Стронга HiMedia M1237-500G (уп/500 гр)

Диагностическая дифференциальная среда Модифицированная среда Дункана и Стронга HiMedia M1237-500G (уп/500 гр) предназначена для выделения и дифференциации Clostridium perfringens из пищевых продуктов. Идентификация микроорганизма осуществляется на основе способности бактерий ферментировать раффинозу; сертификат ФСЗ 2009/03705.

Принцип измерения

Среда разработана согласно методике Дункана и Стронга и рекомендована APHA для разделения C. perfringens и других видов клостридий. В основе метода лежит ферментация раффинозы: C. perfringens вырабатывает кислоту в течение 72 часов, в то время как культурно схожие виды, такие как Clostridium baratii, Clostridium celatum и Clostridium sardiniense, этого не делают.

Компоненты среды:

• Протеозо-пептон и дрожжевой экстракт: источники азотистых соединений и питательных веществ.
• Тиогликолят натрия: способствует созданию анаэробных условий, необходимых для роста клостридий.
• Гидрофосфат натрия: буферный агент.
• Раффиноза: дифференцирующий углевод.

Методика проведения анализа

Подготовка и стерилизация

1. Растворить 34 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды, тщательно перемешать.
2. При необходимости нагреть до полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Разлить в стерильные пробирки.
5. Проверить pH в одной-двух пробирках.

Процедура выделения и подтверждения

1. Инокулировать около 2 г образца пищевого продукта в 15–20 мл бульона из измельчённой печени (Chopped Liver Broth, M606).
2. Инкубировать при 35–37 °C в течение 20–24 часов.
3. Пробирки с признаками помутнения пересеять на агар для перфрингена (Perfringens Agar Base, M837) с добавлением эмульсии желтка яйца (FD045) для получения предполагаемых колоний C. perfringens.
4. Подтвердить результаты, инокулировав предполагаемые колонии в следующие среды:
   • Буферизованная среда для определения подвижности и восстановления нитратов (Motility Nitrate Medium, Buffered, M630);
   • Лактозно-желатиновая среда (Lactose Gelatin Medium, M628);
   • Модифицированная среда Дункана и Стронга (Modified Duncan Strong Medium, M1237).

Интерпретация результатов

Для определения образования кислоты перенести 1 мл культуры в пробирку или на планшет и добавить 2 капли 0,04 % раствора бромтимолового синего. Появление жёлтого окрашивания свидетельствует о продукции кислоты.

Технические характеристики

Свойства готового продукта

• Внешний вид порошка: однородный свободно текущий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность среды: жёлтый прозрачный раствор без осадка.
• Реакция (pH 3,4 % водного раствора при 25 °C): 7,8 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 7,60–8,00.
• Конечный pH (при 25 °C): 7,8 $\pm$ 0,2.

Состав

Состав, г/л:

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 48–72 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре ниже 30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.