Среда для изучения антимикробной активности флюконазола HiMedia M1209-500G (уп/500 гр)

Питательная культуральная среда для изучения антимикробной активности флюконазола HiMedia M1209-500G (уп/500 гр) — химически определённая порошковая среда в двойной упаковке. Среда предназначена для определения чувствительности видов Candida к флюконазолу методом определения минимальной ингибирующей концентрации (МИК) и предназначена только для профессионального применения in vitro.

Назначение

Среда HiMedia M1209-500G рекомендована для определения чувствительности видов Candida к флюконазолу. Применяется при исследовании клинических образцов: соскобов кожи, соскобов с нёба, образцов крови и соскобов с инфицированного участка тела.

Принцип измерения и интерпретация результатов

Для стандартизации исследований чувствительности грибов к противогрибковым препаратам в качестве стандартного референсного метода Институт клинических и лабораторных стандартов (CLSI) рекомендовал макроразведение в бульоне для дрожжей.

Среда для изучения антимикробной активности флюконазола представляет собой химически определённую среду, специально разработанную для исследования флюконазола in vitro с использованием видов Candida. Значения ингибирующей концентрации, полученные с применением этой среды, хорошо коррелируют с клиническим исходом.

Среда содержит декстрозу, аминокислоты, соли и витамины, поддерживающие рост Candida и других грибов.

Состав

Состав указан в граммах на литр.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия рабочим параметрам.

Приготовление среды

Части A и B стерилизуют отдельно.

Приготовление части A

1. Суспендируйте 2,0 г части A в 100 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 0,1 мл фосфатного буферного раствора для корректировки pH до 7,5.
3. Нагрейте до кипения, чтобы частицы агара полностью растворились.
4. Стерилизуйте в автоклаве при 115 °C в течение 10 мин.

Приготовление части B

1. Суспендируйте 29,31 г части B в 900 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Тщательно перемешайте.
3. Добавьте 2 г бикарбоната натрия.
4. После перемешивания доведите общий объём дистиллированной водой до 1 л.
5. Стерилизуйте фильтрованием.
6. Приготовленную часть B можно хранить при 4 °C в течение 2 недель.

Приготовление полной среды

Полную среду готовят асептически, смешивая равные объёмы расплавленной части A, предварительно охлаждённой до 50 °C, и части B. После смешивания среду тщательно перемешивают и разливают.

Подготовка образцов и проведение анализа

Размер посевной дозы зависит от вида грибов.

Виды Candida

Виды Candida выращивают в сабуро-декстрозном бульоне M033 при 37 °C в течение 16–18 ч, после чего разводят физиологическим раствором до следующих концентраций:

• Candida albicans — 10⁵/мл;
• Candida tropicalis — 10⁵/мл;
• Candida krusei — 10⁵/мл;
• Candida guillermondii — 10⁶/мл;
• Candida parapsilosis — 10⁶/мл;
• Candida pseudotropicalis — 10⁶/мл.

Полученными разведёнными культурами выполняют поверхностный посев. Чашки инкубируют при 28 °C в течение 48 ч для определения значения МИК флюконазола.

Контрольные чашки проверяют, чтобы убедиться в достаточном росте всех изолятов, после чего определяют минимальную ингибирующую концентрацию (МИК).

Дерматофиты

Дерматофиты выращивают на сабуро-декстрозном агаре M063 при 28 °C в течение 5–10 суток.

1. Мицелиальный рост гомогенизируют в 2 мл физиологического раствора концентрацией 0,85 % с использованием стеклянных шариков.
2. Плотность суспензии регулируют физиологическим раствором концентрацией 0,85 % до получения светопропускания 65 %.
3. Выполняют посев на чашки.
4. Инкубируют чашки при 28 °C приблизительно 5–6 суток.
5. Проверяют контрольные чашки на достаточность роста изолятов.
6. Определяют минимальную ингибирующую концентрацию (МИК).

Контроль качества

Внешний вид компонентов

• Часть A: однородный крупнозернистый порошок от кремового до светло-жёлтого цвета.
• Часть B: однородный сыпучий порошок от белого до светло-жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Приготовленная среда представляет собой раствор светло-жёлтого цвета с опалесценцией; возможно наличие мелкого осадка.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 28–30 °C в течение 48 ч.

Технические характеристики

• Назначение изделия: среда.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705.
• Комплект: двойная упаковка, части A и B.
• Условия хранения сухой среды: 2–8 °C.
• Условия