Среда для изучения антимикробной активности флюконазола HiMedia M1209-500G (уп/500 гр)

Среда для изучения антимикробной активности флюконазола HiMedia M1209-500G (уп/500 гр) производства HiMedia представляет собой химически определенную среду для тестирования чувствительности видов Candida. Применяется для определения минимальной подавляющей концентрации (МПК) флюконазола in vitro; имеет сертификат ФСЗ 2009/03705.

Принцип измерения

Среда разработана специально для проведения тестов на чувствительность видов Candida к флюконазолу. Состав включает декстрозу, широкий спектр аминокислот, солей и витаминов, необходимых для поддержания роста Candida и других грибов. Значения ингибирующей концентрации, полученные с использованием данной среды, хорошо коррелируют с клиническими исходами.

Состав

Состав, г/л:

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

Части A и B стерилизуются раздельно:

Часть A:

1. Суспендируйте 2,0 г Части A в 100 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 0,1 мл фосфатного буфера для доведения pH до 7,5.
3. Нагрейте до кипения для полного растворения частиц агара.
4. Стерилизуйте в автоклаве при 115 °C в течение 10 минут.

Часть B:

1. Суспендируйте 29,31 г Части B в 900 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Тщательно перемешайте, добавьте 2 г бикарбоната натрия.
3. После перемешивания доведите общий объем до 1 литра дистиллированной водой.
4. Стерилизуйте методом фильтрации. Готовый раствор Части B может храниться при температуре 2–8 °C в течение двух недель.

Смешивание: Полная среда готовится путем асептического добавления равных объемов расплавленной Части A (предварительно охлажденной до 50 °C) и Части B. Тщательно перемешайте и разлейте по емкостям.

Подготовка образцов и посев

Типы образцов: Клинические образцы (соскобы кожи, слизистой оболочки неба, образцы крови или соскобы с инфицированных участков тела).

Подготовка инокулята:

1. Виды Candida выращивают в бульоне Сабуро с декстрозой (M033) при 37 °C в течение 16–18 часов, затем разводят нормальным физиологическим раствором до следующих концентраций:
   • Candida albicans: 10⁵ КОЕ/мл
   • Candida tropicalis: 10⁵ КОЕ/мл
   • Candida krusei: 10⁵ КОЕ/мл
   • Candida guillermondii: 10⁶ КОЕ/мл
   • Candida parapsilosis: 10⁶ КОЕ/мл
   • Candida pseudotropicalis: 10⁶ КОЕ/мл
2. Произведите поверхностный посев разведенных культур и инкубируйте при 28 °C в течение 48 часов для определения значения МПК флюконазола.

Работа с дерматофитами:

1. Выращивают на агаре Сабуро с декстрозой (M063) при 28 °C в течение 5–10 дней.
2. Мицелиальный рост гомогенизируют в 2 мл 0,85 % физиологического раствора с помощью стеклянных шариков.
3. Плотность суспензии корректируют 0,85 % раствором до достижения 65 % светопропускания.
4. Произведите посев на чашки и инкубируйте около 5–6 дней при 28 °C.

Для подтверждения адекватного роста всех изолятов и определения МПК необходимо контролировать контрольные чашки.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид:
  • Часть A: однородный грубый порошок от кремового до светло-желтого цвета.
  • Часть B: однородный свободнотекучий порошок от белого до светло-желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый раствор, опалесцирующий, возможен мелкий осадок.
• Культуральная реакция (после инкубации при 28–30 °C в течение 48 часов):

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение: сухую и приготовленную среду хранить при температуре 2–8 °C.
• Требования к хранению: после вскрытия плотно закрывать бутылку для предотвращения комкования из-за гигроскопичности продукта. Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.
• Ограничения: необходимо строго соблюдать стандартные методы посева и точность разведений для избежания ошибочных результатов.

Меры предосторожности и утилизация

• Только для диагностики in vitro и профессионального использования.
• При работе использовать защитные перчатки, спецодежду и средства защиты глаз/лица.
• Соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности при работе с клиническими образцами.
• Утилизация: обеспечить безопасную утилизацию путем автоклавирования и/или сжигания. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть деконтаминированы в соответствии с лабораторными техниками.