Среда для изучения антимикробной активности флюконазола HiMedia M1209-100G (уп/100 гр)

Среда для изучения антимикробной активности флюконазола HiMedia M1209-100G (уп/100 гр) представляет собой химически определенную питательную среду производства HiMedia. Применяется для определения чувствительности видов Candida к флюконазолу in vitro; состав оптимизирован для обеспечения корреляции результатов с клиническими данными.

Принцип измерения

Среда M1209 разработана специально для тестирования чувствительности видов Candida к флюконазолу. Она содержит декстрозу, широкий набор аминокислот, солей и витаминов, необходимых для роста Candida и других грибов. Использование данной среды позволяет определить минимальную подавляющую концентрацию (МПК) препарата, что соответствует рекомендациям CLSI по стандартизации методов анализа чувствительности дрожжей.

Состав

Состав, г/л:

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

Части A и B стерилизуются раздельно:

1. Приготовление части A: 2,0 г порошка части A суспендируют в 100 мл очищенной или дистиллированной воды. Добавляют 0,1 мл фосфатного буфера для доведения pH до 7,5. Нагревают до кипения для полного растворения частиц агара, затем стерилизуют в автоклаве при 115 °C в течение 10 минут.
2. Приготовление части B: 29,31 г порошка части B суспендируют в 900 мл очищенной или дистиллированной воды. Тщательно перемешивают, добавляют 2 г бикарбоната натрия, после перемешивания доводят общий объем до 1 литра дистиллированной водой. Стерилизуют методом фильтрации. Готовая часть B может храниться при температуре +4 °C в течение двух недель.
3. Смешивание: Полная среда готовится путем асептического добавления равных объемов расплавленной части A (предварительно охлажденной до +50 °C) и части B. Тщательно перемешивают и разливают по чашкам.

Подготовка образцов и инокуляция

Типы образцов: клинические пробы (соскобы кожи, слизистой рта, образцы крови или соскобы с инфицированного участка тела).

Процедура для видов Candida:

1. Культуры видов Candida выращивают в бульоне Сабуро с декстрозой (M033) при +37 °C в течение 16–18 часов.
2. Раствором физиологического раствора готовят следующие разведения:
   • Candida albicans: 10⁵ КОЕ/мл
   • Candida tropicalis: 10⁵ КОЕ/мл
   • Candida krusei: 10⁵ КОЕ/мл
   • Candida guillermondii: 10⁶ КОЕ/мл
   • Candida parapsilosis: 10⁶ КОЕ/мл
   • Candida pseudotropicalis: 10⁶ КОЕ/мл
3. Выполняют поверхностный посев разведенных культур и инкубируют при +28 °C в течение 48 часов для определения значения МПК флюконазола.

Процедура для дерматофитов:

1. Выращивают на агаре Сабуро с декстрозой (M063) при +28 °C в течение 5–10 дней.
2. Мицелиальный рост гомогенизируют в 2 мл 0,85 % раствора NaCl с использованием стеклянных шариков.
3. Плотность суспензии корректируют 0,85 % раствором NaCl до достижения 65 % светопропускания.
4. Инокулируют чашки и инкубируют около 5–6 дней при +28 °C.

Для определения МПК необходимо проверить контрольные чашки, чтобы убедиться в адекватном росте всех изолятов.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид (сухая среда):
  • Часть A: однородный грубый порошок от кремового до светло-желтого цвета.
  • Часть B: однородный свободнотекучий порошок от белого до светло-желтого цвета.
• Цвет и прозрачность (готовая среда): светло-желтый опалесцирующий раствор, возможен мелкий осадок.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при +28…+30 °C в течение 48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение: сухую и приготовленную среды хранить при температуре +2…+8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен. После вскрытия флакон следует плотно закрывать для предотвращения образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.
• Утилизация: использованные или непригодные препараты подлежат безопасному удалению путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с лабораторными правилами работы с инфекционными материалами.

Ограничения и меры предосторожности

• Использовать только для диагностики in vitro и только профессионалами.
• При работе использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Для предотвращения ошибочных результатов необходимо строго соблюдать стандартные методы инокуляции и точность разведений.

Комплект поставки

• Среда для изучения антимикробной активности флюконазола (двойная упаковка), 100 г.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705.