Среда для изучения антимикробной активности флюконазола HiMedia M1209-100G (уп/100 гр)

Микробиологическая питательная среда для изучения антимикробной активности флюконазола HiMedia M1209-100G (уп/100 гр) имеет химически определённый состав. Среда предназначена для определения чувствительности видов Candida к флюконазолу методом оценки минимальной ингибирующей концентрации (МИК) in vitro.

Назначение

Среда предназначена для тестирования чувствительности видов Candida к флюконазолу и определения минимальной ингибирующей концентрации препарата. Применяется при исследовании клинических образцов кожи, соскобов с нёба, крови и материала с инфицированного участка тела.

Состав

Среда состоит из двух компонентов, которые стерилизуют раздельно.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик среды.

Принцип метода

Стандартизация исследований чувствительности грибов к противогрибковым препаратам выполняется с применением стандартного метода макроразведений в бульоне, рекомендованного CLSI для дрожжей.

Среда для тестирования флюконазола представляет собой химически определённую среду, разработанную для определения чувствительности видов Candida к флюконазолу in vitro. Значения ингибирующей концентрации, полученные с использованием среды, коррелируют с клиническим исходом.

Декстроза, аминокислоты, соли и витамины в составе среды обеспечивают рост Candida и других грибов.

Приготовление среды

Части A и B стерилизуют раздельно.

Приготовление части A

1. Суспендируйте 2,0 г части A в 100 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 0,1 мл фосфатного буфера для доведения pH до 7,5.
3. Нагрейте до кипения, чтобы полностью растворить частицы агара.
4. Стерилизуйте автоклавированием при 115 °C в течение 10 мин.

Приготовление части B

1. Суспендируйте 29,31 г части B в 900 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Тщательно перемешайте.
3. Добавьте 2 г гидрокарбоната натрия.
4. После перемешивания доведите общий объём дистиллированной водой до 1 л.
5. Стерилизуйте фильтрованием.
6. Приготовленный раствор части B можно хранить при 4 °C в течение 2 недель.

Приготовление полной среды

Полную среду готовят асептически, добавляя равный объём расплавленной части A, предварительно охлаждённой до 50 °C, к части B. Смесь тщательно перемешивают и разливают.

Пробоподготовка и проведение исследования

Размер инокулюма зависит от вида грибов.

Виды Candida

1. Выращивайте виды Candida в бульоне Сабуро с декстрозой (M033) при 37 °C в течение 16–18 ч.
2. Разведите культуры физиологическим раствором до следующих концентраций:
   • Candida albicans — 10⁵/мл;
   • Candida tropicalis — 10⁵/мл;
   • Candida krusei — 10⁵/мл;
   • Candida guillermondii — 10⁶/мл;
   • Candida parapsilosis — 10⁶/мл;
   • Candida pseudotropicalis — 10⁶/мл.
3. Выполните поверхностный посев указанных разведённых культур.
4. Инкубируйте посевы при 28 °C в течение 48 ч.
5. Определите значение МИК флюконазола.

Дерматофиты

1. Выращивайте дерматофиты на агаре Сабуро с декстрозой (M063) при 28 °C в течение 5–10 суток.
2. Гомогенизируйте мицелиальный рост в 2 мл физиологического раствора концентрацией 0,85 % с использованием стеклянных шариков.
3. Отрегулируйте плотность суспензии физиологическим раствором концентрацией 0,85 % до светопропускания 65 %.
4. Выполните посев на чашки.
5. Инкубируйте посевы приблизительно 5–6 суток при 28 °C.
6. Проверьте контрольные чашки, чтобы убедиться в достаточном росте всех изолятов.
7. Определите минимальную ингибирующую концентрацию (МИК).

Контроль качества

Внешний вид

• Часть A: однородный крупнозернистый порошок кремового или светло-жёлтого цвета.
• Часть B: однородный сыпучий порошок от белого до светло-жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Раствор светло-жёлтого цвета, опалесцирующий; допускается наличие мелкого осадка.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 28–30 °C в течение 48 ч.

Технические характеристики

• Назначение изделия: среда.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705.
• Фасовка: 100 г.
• Форма поставки: двойная упаковка, части A и B.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой и приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок применения: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде в плотно закрытом флаконе.
• Плотное закрытие флакона необходимо для предотвращения комкования из-за гигроскопичности продукта.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Ограничения применения

• Для инокуляции чашек необходимо использовать стандартные методы.
• Разведения должны выполняться точно во избежание ошибочных результатов.
• Рабочие характеристики среды гарантируются при приготовлении в соответствии с инструкцией на этикетке, хранении при рекомендованной температуре и использовании до истечения срока годности.

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.