Среда Кэпера для Aeromonas HiMedia M1169-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда Кэпера для Aeromonas HiMedia M1169-500G (уп/500 гр) — сухая порошкообразная среда для микробиологического анализа пищевых образцов. Среда применяется для количественного определения и идентификации Aeromonas hydrophila с оценкой ферментации маннита и инозитола, декарбоксилирования и дезаминирования орнитина, подвижности, образования индола и H₂S.

Назначение

Среда рекомендована для подсчёта и идентификации Aeromonas hydrophila в пищевых образцах в соответствии с методическими рекомендациями APHA. Тип образца: пищевые продукты.

Среда Кэпера представляет собой однопробирочную среду для быстрой предварительной идентификации A. hydrophila. На основании биохимических реакций Aeromonas дифференцируют по ферментации маннита, отсутствию ферментации инозитола, отсутствию орнитиндекарбоксилазы и отсутствию образования сероводорода из тиосульфата.

Состав

Состав на 1 л среды:

• Конечный pH при 25 °C: 6,7 ± 0,2
• Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

Aeromonas hydrophila, также относящаяся к подвижным аэромонадам, является факультативным анаэробом, для которого характерны рост при 37 °C и подвижность. Выявление видов Aeromonas в пищевых продуктах и образцах окружающей среды обычно не вызывает затруднений, однако проблемы могут возникать при необходимости количественного выделения микроорганизма или при наличии большого количества других микроорганизмов.

Среда Кэпера позволяет выявлять следующие реакции:

• ферментацию маннита;
• ферментацию инозитола;
• декарбоксилирование орнитина;
• дезаминирование орнитина;
• подвижность;
• образование индола;
• образование H₂S.

Пищевые образцы следует обрабатывать как можно скорее после поступления в лабораторию. Подвижные аэромонады чувствительны к значениям pH ниже 5,5, поэтому кислые пищевые продукты необходимо обрабатывать вскоре после доставки в лабораторию.

Триптон, протеозный пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают микроорганизмы необходимыми азотистыми соединениями и витаминами группы B. Тиосульфат натрия и цитрат аммония железа служат индикаторами образования H₂S. Инозитол и маннит являются сбраживаемыми углеводами, а L-орнитингидрохлорид — аминокислотой. Бромкрезоловый пурпурный используется как индикатор pH: при кислых значениях pH он жёлтый, при нейтральных и щелочных — пурпурный.

В пробирках со средой Кэпера, инокулированных A. hydrophila, столбик среды обычно становится жёлтым вследствие образования кислоты, а в верхней части среды формируется щелочная зона. Небольшое количество агара обеспечивает возможность определения подвижности микроорганизмов.

Для подтверждения выделенных изолятов A. hydrophila инокулируют в среду Кэпера. Через 18–24 ч Aeromonas демонстрирует подвижность, отрицательную реакцию на H₂S и положительную реакцию на индол. Для определения индола добавляют в пробирку 2 капли реактива Ковача R008; положительная реакция проявляется красным окрашиванием.

Приготовление среды и методика применения

1. Суспендируйте 37,92 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте среду по пробиркам по 5 мл.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм² (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 12 мин.
5. Для подтверждения выделенных изолятов инокулируйте A. hydrophila в приготовленную среду.
6. Инкубируйте 18–24 ч, после чего оцените подвижность, образование H₂S и реакцию на индол.
7. Для реакции на индол добавьте 2 капли реактива Ковача R008 и оцените появление красного окрашивания.

Технические характеристики

• Наименование: среда Кэпера для Aeromonas
• Артикул: M1169-500G
• Производитель: HiMedia
• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение изделия: питательная среда
• Форма выпуска: порошок
• Тип упаковки: HDPE (полиэтилен высокой плотности)
• Происхождение компонентов: животное
• Конечный pH при 25 °C: 6,7 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,50–6,90
• Концентрация для приготовления: 3,79 % масс./об.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Гелеобразование: полужидкая среда, сопоставимая с 0,3%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в пробирках в виде столбиков формируется гель пурпурного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.
• Реакция: реакция водного раствора концентрацией 3,79 % масс./об. при 25 °C; pH 6,7 ± 0,2.
• Контрольный диапазон pH: 6,50–6,90.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Пробоотбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно установленным руководствам. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Из-за различий в питательных потребностях некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост.
2. Для полной идентификации требуются дополнительные серологические и биохимические исследования.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытая ёмкость.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–30 °C.
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывать ёмкость.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Требования безопасности

Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку. При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами. При работе с образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания. Материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными процедурами обращения с инфекционными материалами.

Сравнительный технический контекст

В отличие от универсальных базовых питательных сред, среда Кэпера содержит субстраты и индикаторные компоненты для одновременной оценки ферментации маннита и инозитола, реакций орнитина, образования H₂S, подвижности и последующей реакции на индол в одной пробирке.