HiMedia M1083-100G Вторичное обогащение Фрейзера

Порошковая питательная среда HiMedia M1083-100G Вторичное обогащение Фрейзера предназначена для выделения, культивирования и обогащения Listeria monocytogenes из пищевых продуктов и объектов окружающей среды. Среда готовится из расчёта 57,85 г на 990 мл очищенной или дистиллированной воды и применяется с добавлением селективной добавки Fraser Enrichment Supplement FD065 или Fraser Selective Supplement FD125.

Назначение

Среда рекомендована для выделения, культивирования и обогащения Listeria monocytogenes из образцов пищевых продуктов и объектов окружающей среды.

Состав

Состав, г/л:

• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.
• HM-пептон B является эквивалентом мясного экстракта.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 57,85 г среды в 990 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагревайте до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона добавки Fraser Enrichment Supplement FD065 или одного флакона Fraser Selective Supplement FD125.
6. Тщательно перемешайте и разлейте приготовленную среду в необходимом объёме.

Принцип действия и интерпретация

Вторичный бульон Фрейзера представляет собой модификацию вторичного обогащающего бульона UVM Министерства сельского хозяйства США — Службы инспекции и безопасности пищевых продуктов (USDA-FSIS). Состав основан на рецептуре Fraser и Sperber и предназначен для создания условий, оптимальных для роста Listeria.

Протеозный пептон, триптон, дрожжевой экстракт и HM-пептон B повышают питательность среды, обеспечивая микроорганизмы необходимыми углеродистыми и азотистыми соединениями. Фосфаты поддерживают буферную ёмкость среды.

Все виды Listeria проявляют активность β-глюкозидазы, что выявляется почернением среды. Виды Listeria гидролизуют эскулин — замещённый глюкозид — с образованием глюкозы и эскулетина. Эскулетин соединяется с ионами железа из цитрата аммония и железа, в результате чего образуется чёрно-коричневый комплекс 6,7-дигидроксикумарина. Цитрат аммония и железа также способствует росту L. monocytogenes.

Высокая устойчивость Listeria к хлориду натрия используется для подавления роста энтерококков. Хлорид лития также подавляет энтерококки, которые способны гидролизовать эскулин. Рост сопутствующей микрофлоры в значительной степени подавляется добавлением налидиксовой кислоты и гидрохлорида акрифлавина, содержащихся в добавках FD065 или FD125.

Типы образцов

• Пищевые продукты.
• Образцы окружающей среды.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов используйте соответствующие методы обращения с пробами в соответствии с установленными методиками.

Для образцов окружающей среды используйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с действующими методическими рекомендациями.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

Для окончательной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические и серологические исследования.

Ожидаемые характеристики

Эффективность среды ожидается при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный раствор жёлтого цвета с небольшим количеством осадка.
• После добавления FD065 или FD125: в пробирках образуется прозрачный раствор флуоресцентно-жёлтого цвета с небольшим количеством осадка.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 5,78 % м/об при 25 °C:

• pH: 7,2 ± 0,2

Диапазон pH

• pH: 7,00–7,40

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления добавки Fraser Enrichment Supplement FD065 или Fraser Selective Supplement FD125 и инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

• Наименование: Вторичное обогащение Фрейзера
• Производитель: HiMedia
• Артикул: M1083-100G
• Назначение изделия: питательная среда
• Физическая форма: порошок
• Масса: 100 г
• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: HDPE (полиэтилен высокой плотности)
• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C

Хранение и срок годности

Храните сухой продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости. Приготовленную среду храните при температуре 2–8 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к образованию комков. Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте ёмкость.

Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания. При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и