HiMedia M1079B-100G Бисселенит натрия

Компонент питательной среды HiMedia M1079B-100G Бисселенит натрия — химически определённый порошок для приготовления 0,4 % раствора. Бисселенит натрия применяется для селективного обогащения видов Salmonella из клинических и неклинических образцов, при этом приготовленную среду нельзя автоклавировать.

Назначение

Бисселенит натрия предназначен для селективного обогащения видов Salmonella из клинических и неклинических образцов.

Компонент добавляют к основам:

• цистин-селенитного бульона без биселенита натрия M1079;
• селенитного бульона без биселенита натрия M970.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Приготовление раствора и среды

1. Приготовьте раствор биселенита натрия концентрацией 0,4 % масс./об.: суспендируйте 4 г вещества в 1000 мл дистиллированной воды и обеспечьте полное растворение.
2. Для приготовления полной среды добавьте к приготовленному 0,4%-ному раствору M1079B:
   • 19 г основы M970; или
   • 19,01 г основы M1079.
3. Тщательно перемешайте.
4. Подогрейте смесь до полного растворения среды.
5. Распределите среду по стерильным пробиркам.
6. Стерилизуйте на кипящей водяной бане или в потоке свободно текущего пара в течение 10 мин.
7. Не подвергайте среду автоклавированию. Чрезмерный нагрев ухудшает свойства среды.
8. Утилизируйте приготовленную среду, если произошло значительное восстановление селенита, на что указывает красный осадок на дне пробирки или флакона.

Принцип действия и интерпретация

Селенит-цистиновые бульоны представляют собой селективные среды обогащения, применяемые для выявления Salmonella в различных образцах пищевых продуктов, молочных продуктов и патологического материала.

Добавление биселенита натрия (гидроселенита натрия) к основе цистин-селенитного бульона без селенита M1079 / M790 способствует селективному обогащению видов Salmonella.

Селективное ингибирующее действие селенита впервые продемонстрировал Klett; Guth использовал селенит для выделения Salmonella Typhi. Leifson подробно исследовал селенит и разработал состав среды. Селенит-цистиновая среда является модификацией состава Leifson с добавлением цистина. Модификации исходного состава селенитных бульонов и аналогичных сред рекомендованы AOAC, APHA, USP и другими профильными документами.

Основа селенитного бульона M1079 / M970 содержит:

• азотистые вещества в виде ферментативного гидролизата казеина, поддерживающие рост микроорганизмов;
• лактозу как ферментируемый углевод.

В полной среде с селенитом селенит восстанавливается в процессе роста бактерий, при этом образуется щёлочь. Повышение pH снижает токсичность селенита и приводит к чрезмерному росту других бактерий. Кислота, образующаяся при ферментации лактозы, способствует поддержанию нейтрального pH. Фосфат натрия стабилизирует pH и также снижает токсичность селенита. L-цистин улучшает выделение Salmonella.

Обогащённый бульон можно пересевать на дифференциальные плотные среды:

• бисмут-сульфитный агар M027;
• бриллиантовый зелёный агар M016;
• агар XLD M031;
• агар МакКонки M081.

Не инкубируйте бульон дольше 24 ч: ингибирующее действие селенита снижается после 6–12 ч инкубации.

Тип образца

Для требований к типу образца следует руководствоваться инструкциями для M1079 и M970.

Сбор и обработка образцов

Для сбора и обработки образцов следует руководствоваться инструкциями для M1079 и M970.

Бисселенит натрия добавляют к цистин-селенитному бульону без биселенита M1079 и селенитному бульону без биселенита M970 при использовании этих продуктов в качестве основы.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Белый или кремовый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

0,4%-ный раствор M1079B представляет собой бесцветный прозрачный раствор без осадка.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч. Бисселенит натрия добавляют к цистин-селенитному бульону M1079 без биселенита, после чего выполняют пересев на агар МакКонки M081.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости. Приготовленную среду храните при температуре 2–8 °C.

Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия:

• храните продукт в сухом виде;
• плотно закрывайте флакон;
• защищайте продукт от образования комков из-за его гигроскопичности.

Неправильное хранение может привести к образованию комков. Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте ёмкость. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и при соблюдении рекомендованных условий хранения.

Ограничения применения

Из-за различий в питательных потребностях отдельные штаммы могут демонстрировать слабый рост.

Ожидаемые рабочие характеристики

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Требования безопасности

Продукт предназначен для диагностики in vitro и предназначен только для профессионального применения.

При работе с продуктом и образцами:

• прочитайте этикетку перед открытием контейнера;
• используйте защитные перчатки;
• используйте защитную одежду;
• используйте средства защиты глаз;
• используйте средства защиты лица;
• соблюдайте надлежащие правила работы микробиологической лаборатории при обращении с образцами и культурами;
• соблюдайте стандартные меры предосторожности при работе с клиническими образцами;
• руководствуйтесь требованиями безопасности, указанными в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов продукта автоклавированием и/или сжиганием.

Соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры утилизации инфекционных материалов. Материалы, контактировавшие с клиническим образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Сравнительное техническое отличие

M1079B-100G не является готовой питательной средой: продукт представляет собой однокомпонентную добавку биселенита натрия, которую необходимо вводить в основы M1079 или M970 с последующей стерилизацией кипящей водяной баней либо потоком свободно текущего пара, но не автоклавированием.