Среда Клиглера HiMedia M078-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная питательная среда Среда Клиглера HiMedia M078-500G (уп/500 гр) предназначена для выявления ферментации глюкозы и лактозы, а также продукции H₂S. Среда применяется для дифференциальной идентификации грамотрицательных кишечных бактерий в клинических и не клинических образцах по характеру кислотно-щелочной реакции, газообразованию и почернению среды.

Назначение

Среда Клиглера HiMedia M078 предназначена для дифференциальной идентификации грамотрицательных кишечных бацилл из клинических и не клинических образцов на основании ферментации глюкозы (декстрозы), лактозы и образования сероводорода.

Среду применяют для изучения грамотрицательных бактерий кишечного происхождения, включая возбудителей брюшного тифа, дизентерии и родственных инфекций. Среда дифференцирует бактерии, ферментирующие лактозу, от неферментирующих лактозу, а также позволяет выявлять газообразование и образование H₂S.

Идентификация продукта

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заданных характеристик среды.

HM Peptone B эквивалентен мясному экстракту.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 57,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Тщательно перемешайте и распределите среду по пробиркам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите пробирки в наклонном положении, чтобы сформировать скошенную часть с цилиндрическим столбиком высотой около 1″.

Наилучшие реакции получают на свежеприготовленной среде. Не используйте пробирки или флаконы с завинчивающимися крышками.

Не допускайте перегрева: перегрев может привести к образованию осадка в среде.

Принцип измерения и интерпретация

Среда Клиглера с железом представляет собой комбинацию свинцово-ацетатной среды, описанной Клиглером, и агара Рассела с двумя сахарами. Среду используют как дифференциальную для брюшнотифозных, дизентерийных и родственных бацилл.

Феноловый красный заменяет ранее применявшийся индикатор Андраде и служит индикатором pH. Феноловый красный изменяет окраску в ответ на образование кислоты при ферментации сахаров:

• ферментация декстрозы приводит к образованию кислоты и изменению окраски индикатора с красной на жёлтую;
• декстрозы в среде содержится мало, поэтому образование кислоты ограничено;
• в аэробной скошенной части среды происходит повторное окисление индикатора, вследствие чего окраска скошенной части возвращается к красной;
• при ферментации лактозы образуется большое количество кислоты, препятствующее повторному окислению индикатора, поэтому вся среда становится жёлтой;
• неферментирующие лактозу бактерии, например Salmonella и Shigella, первоначально вызывают пожелтение скошенной части за счёт ферментации небольшого количества декстрозы;
• после исчерпания декстрозы в аэробной скошенной части реакция становится щелочной, и скошенная часть приобретает красную окраску вследствие окисления образовавшихся кислот;
• в анаэробной среде столбика повторного изменения реакции не происходит, поэтому столбик остаётся кислым и жёлтым;
• бактерии, ферментирующие лактозу, образуют жёлтые скошенную часть и столбик, поскольку ферментация лактозы сопровождается образованием большого количества кислот, поддерживающих кислый pH в аэробных условиях;
• исходная окраска среды в пробирке указывает на отсутствие ферментации как декстрозы, так и лактозы.

В состав среды, помимо пептона, HM Peptone B и дрожжевого экстракта, входят лактоза и глюкоза (декстроза), что обеспечивает дифференциацию видов кишечных бацилл.

Сочетание сульфата железа и тиосульфата натрия позволяет выявлять образование сероводорода. Образование H₂S определяется по чёрной окраске, возникающей по всему столбику либо в виде кольца около верхней части столбика.

Газообразование, или аэрогенная реакция, выявляют по отдельным пузырькам, расщеплению или смещению агара, а также по образованию трещин в столбике среды.

Среда позволяет дифференцировать Salmonella Typhi от других представителей рода Salmonella, а также Salmonella Paratyphi A от Salmonella Schottmuelleri и Salmonella Enteritidis.

Пробоподготовка и внесение посевного материала

Для идентификации на среду Клиглера с железом вносят чистые культуры предполагаемых микроорганизмов, выделенные на плотных средах, включая:

• агар МакКонки (M081);
• висмут-сульфитный агар (M027);
• дезоксихолат-цитратный агар (M065);
• агар SS (M108).

Типы исследуемых образцов:

• изолированные микроорганизмы из клинических образцов;
• изолированные микроорганизмы из пищевых образцов;
• изолированные микроорганизмы из молочных образцов;
• изолированные микроорганизмы из образцов воды.

Сбор и обращение с образцами

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам и местным нормативным требованиям.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно утверждённым руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры безопасности

Среда предназначена для диагностики in vitro и профессионального использования.

Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой. При работе с образцами и культурами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При работе с образцами и культурами соблюдайте надлежащие правила микробиологической лабораторной практики. При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно утверждённым руководствам. Для выбора мер безопасности можно использовать паспорта безопасности соответствующих веществ.

Ограничения применения

1. Результаты следует оценивать через 18–24 ч, чтобы избежать ошибочной интерпретации.
2. Для инокуляции следует использовать прямую проволочную петлю.
3. Для предотвращения ошибочных результатов необходимо использовать чистые изоляты.
4. Для полной идентификации необходимо дополнительно выполнить другие биохимические и серологические тесты.

Технические характеристики

• Производ