Среда Клиглера HiMedia M078-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная питательная среда Клиглера HiMedia M078-500G (уп/500 г) производства HiMedia. Применяется для идентификации грамотрицательных энтеробактерий из клинических и неклинических образцов на основании способности ферментировать глюкозу, лактозу и продуцировать сероводород.

Принцип измерения и интерпретация

Среда Клиглера (Kligler Iron Agar) представляет собой комбинацию среды с ацетатом свинца и двухсахарного агара Рассела. Она используется для дифференциации возбудителей брюшного тифа, дизентерии и родственных бацилл.

В качестве индикатора pH используется феноловый красный. Дифференциация происходит по следующим признакам:

• Ферментация глюкозы (декстрозы): приводит к образованию кислоты, что меняет цвет индикатора с красного на жёлтый. Из-за малого количества глюкозы продукция кислоты ограничена, что вызывает реокисление индикатора на поверхности среды (скос остаётся красным), в то время как в анаэробной среде столбика сохраняется кислая реакция (жёлтый столбик).
• Ферментация лактозы: сопровождается образованием большого количества кислоты, что предотвращает реокисление; в результате вся среда (и скос, и столбик) становится жёлтой.
• Продукция сероводорода (H₂S): сочетание сульфата железа (II) и тиосульфата натрия позволяет обнаружить H₂S, что проявляется в виде чёрного окрашивания всего столбика или образования чёрного кольца у верхней части столбика.
• Газообразование: фиксируется в виде отдельных пузырьков, растрескивания или смещения агара в столбике.

Организмы, не ферментирующие ни глюкозу, ни лактозу, сохраняют исходный цвет среды.

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 7,4 ± 0,2.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 57,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Тщательно перемешайте и разлейте по пробиркам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
5. Охладите пробирки в наклонном положении для формирования скоса с глубиной столбика около 25,4 мм (1 дюйм).

Примечание: Избегайте перегрева, так как это может привести к выпадению осадка. Не используйте пробирки или бутыли с винтовыми крышками. Наилучшие результаты достигаются на свежеприготовленной среде.

Процедура и ограничения

• Тип образцов: изолированные микроорганизмы из клинических проб, проб пищевых продуктов, молочной продукции и воды.
• Посев: для инокуляции следует использовать прямую проволочную петлю.
• Чистота культуры: необходимо использовать чистые изоляты для предотвращения ошибочных результатов.
• Время считывания: результаты фиксируются через 18–24 часа инкубации.
• Дополнительно: для полной идентификации необходимо проведение других биохимических и серологических тестов.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

Технические характеристики

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре +10…+30 °C в плотно закрытом контейнере. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть для предотвращения комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре +2…+8 °C.
• Утилизация: использованные или непригодные материалы подлежат стерилизации в автоклаве или сжиганию в соответствии с лабораторными протоколами работы с инфекционными материалами.

Меры предосторожности

Продукт предназначен исключительно для профессионального использования в целях диагностики in vitro. При работе с образцами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности, использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.