HiMedia M070S-500G Среда MR-VP

Сухая питательная среда HiMedia M070S-500G Среда MR-VP (глюкозо-фосфатный бульон) для дифференциации микроорганизмов группы коли-аэрогенов. Применяется для проведения тестов на метиловый красный (MR) и Фогеса-Проскауэра (VP); вес упаковки 500 г.

Область применения

Среда рекомендуется для изучения тестов метилового красного (MR) и Фогеса-Проскауэра (VP) с целью дифференциации бактерий группы коли-аэрогенов. Модифицированный состав (M070S) также используется для обнаружения E. coli, Vibrio parahaemolyticus и Bacillus cereus, вызывающих пищевые отравления. Для тестирования V. parahaemolyticus на VP-реакцию в среду необходимо добавить 2–3 % хлорида натрия (NaCl).

Принцип измерения и интерпретация

Принцип работы основан на способности микроорганизмов ферментировать декстрозу (глюкозу) с образованием различных конечных продуктов.

• Тест метилового красного (MR): основан на определении высокой кислотности, возникающей при ферментации декстрозы. Добавление индикатора метилового красного к культуре Escherichia coli вызывает появление красного окрашивания.
• Тест Фогеса-Проскауэра (VP): определяет способность организмов вырабатывать нейтральный продукт — ацетоин (ацетилметилкарбинол). В присутствии кислорода и щелочи ацетоин окисляется до диацетила, который при взаимодействии с креатином дает красное окрашивание.

Данная рецептура рекомендована стандартами ISO и Бюро индийских стандартов (BIS).

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Растворите 15 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Распределите по пробиркам по 3 мл (или иным необходимым объемом).
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C и давлении $\approx$0,1 МПа (15 psi) в течение 15 минут.

Процедуры тестирования

• Тест MR: проводится после инкубации при 30 °C в течение максимум 5 суток.
• Тест VP: инкубация культур при 30 °C в течение 24–48 часов.

Альтернативные методы определения (VP)

• Тест Веркмана: к 50 мл культуры добавить 2 капли 2 % раствора хлорида железа (III) и 5 мл 10 % гидроксида натрия. Положительная реакция — появление устойчивого медного окрашивания через несколько минут.
• Тест О'Миры: к 5 мл культуры добавить 25 мг твердого креатина, затем 5 мл концентрированного (40 %) гидроксида натрия. Положительная реакция — развитие красного цвета через несколько минут после перемешивания.
• Метод Левина, Эпштейна и Воуна: модификация метода О'Миры, где креатин растворяется в концентрированном растворе гидроксида калия.
• Метод Барритта: к 5 мл культуры добавить 1 мл 40 % гидроксида калия и 3 мл 5 % $\alpha$-нафтола в абсолютном этаноле. Положительный результат — появление эозиново-розового цвета в течение 2–5 минут.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 30 °C в течение 48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытых контейнерах.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.