HiMedia M070S-500G Среда MR-VP

Питательная микробиологическая среда HiMedia M070S-500G Среда MR-VP предназначена для постановки тестов метилового красного (MR) и Фогеса—Проскауэра (VP), состав стандартизован для работы с группой коли-аэрогенов. Среда применяется для дифференциации микроорганизмов по продуктам ферментации декстрозы, а для тестирования Vibrio parahaemolyticus по VP требуется добавление 2–3 % хлорида натрия.

Назначение

Среда MR-VP (глюкозофосфатный бульон) применяется для изучения тестов метилового красного и Фогеса—Проскауэра при дифференциации микроорганизмов группы коли-аэрогенов.

Модифицированная формула M070S рекомендована для выявления Escherichia coli, Vibrio parahaemolyticus и Bacillus cereus, вызывающих пищевые отравления. Формула также рекомендована Бюро индийских стандартов (BIS) и комитетом ISO для выявления группы коли-аэрогенов.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Методика приготовления

1. Взвесьте 15 г сухой среды и суспендируйте в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Разлейте среду по пробиркам по 3 мл или в требуемом объёме.
3. Простерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм² (≈0,103 МПа; ≈1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 15 мин.

Принцип и интерпретация результатов

Кларк и Лабс установили, что добавление метилового красного к культурам Escherichia coli вызывает красное окрашивание вследствие высокой кислотности, образующейся при ферментации декстрозы.

Фогес и Проскауэр описали появление красного окрашивания после добавления гидроксида калия к культурам микроорганизмов, выращенным на специальных питательных средах. Бульон MR-VP позволяет выполнять оба теста на одной и той же среде в разных пробирках.

Красное окрашивание при добавлении гидроксида калия обусловлено способностью микроорганизмов образовывать из декстрозы нейтральный продукт ацетоин (ацетилметилкарбинол). В присутствии кислорода и щёлочи ацетоин окисляется с образованием диацетила, который реагирует с креатином с образованием красного окрашивания.

Для тестирования Vibrio parahaemolyticus по VP в среду необходимо добавить 2–3 % хлорида натрия.

Методики тестов MR и VP

Тест метилового красного

Тест MR выполняют после инкубации культуры при 30 °C в течение не более 5 суток.

Тест Фогеса—Проскауэра

Культуры для теста VP инкубируют при 30 °C в течение 24–48 ч.

Тест Веркмана

1. К 50 мл культуры добавьте 2 капли 2%-ного раствора хлорида железа.
2. Добавьте 5 мл 10%-ного гидроксида натрия.
3. Встряхните пробирку для тщательного перемешивания.
4. Устойчивая медная окраска, развивающаяся через несколько минут, указывает на положительную реакцию.

Тест О’Мира

1. Добавьте 25 мг твёрдого креатина к 5 мл культуры.
2. Добавьте 5 мл концентрированного 40%-ного гидроксида натрия.
3. Тщательно встряхните пробирку.
4. Развитие красного окрашивания через несколько минут указывает на положительную реакцию.

Левин, Эпштейн и Воун модифицировали методику О’Мира, растворив креатин в концентрированном растворе гидроксида калия.

Метод Барритта

Воун, Митчелл и Левин рекомендовали метод Барритта:

1. К 5 мл культуры добавьте 1 мл 40%-ного гидроксида калия.
2. Добавьте 3 мл 5%-ного раствора α-нафтола в абсолютном этаноле.
3. Положительный результат определяется по появлению эозиново-розового окрашивания в течение 2–5 мин.

Контроль качества

Внешний вид сухой среды: однородный сыпучий порошок кремового цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор светло-жёлтого цвета без осадка.

Реакция: реакция 1,5%-ного водного раствора при 25 °C.

pH: 7,40–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 30 °C в течение 48 ч.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: среда
• Тип продукта: стандартный
• Физическая форма: порошок
• Происхождение: животное
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Масса: 500 г
• Температура хранения: ниже 30 °C
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Температура эксплуатации по данным каталога: 10–30 °C
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке
• Условия хранения: хранить в плотно закрытых контейнерах

Стандарты и методические основы

Формула M070S упоминается в связи со следующими документами:

• BIS IS 5887, часть I, 1976, подтверждён в 1986 г.;
• BIS IS 5887, часть III, 1976;
• BIS IS 5887, часть IV, 1976;
• BIS IS 5887, часть V, 1976, подтверждён в 1986 г.;
• проект ISO/DIS 6597, 1993.

Зарубежные документы приведены как источники методик и требований к рецептуре среды.

Отличие от стандартного MR-VP-бульона

Среда M070S представляет собой слегка модифицированную формулу MR-VP-бульона, рекомендованную для выявления Escherichia coli, Vibrio parahaemolyticus и Bacillus cereus в задачах контроля микроорганизмов, связанных с пищевыми отравлениями.

Упаковка

Тип упаковки: контейнер из полиэтилена высокой плотности (HDPE).

Масса продукта: 500 г.