HiMedia M070F-500G Модифицированная среда Фогес-Проскауэра

Питательная микробиологическая среда HiMedia M070F-500G Модифицированная среда Фогес-Проскауэра производства HiMedia с конечным pH 6,5 ± 0,2. Предназначена для постановки теста Фогеса—Проскауэра при дифференциации Bacillus cereus в пищевых образцах; инкубация культуры проводится 48 ± 2 ч при 35 °C.

Назначение

Модифицированная среда Фогеса—Проскауэра предназначена для проведения теста Фогеса—Проскауэра при дифференциации Bacillus cereus в соответствии с FDA BAM, 1998.

Тип образца: пищевые образцы.

Состав

Состав среды:

Конечный pH при 25 °C: 6,5 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров проведения анализа.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 17 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки по 10 мл.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 10 мин. Указанное производителем давление составляет 15 фунтов на кв. дюйм, что соответствует приблизительно 0,103 МПа.
5. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.

Принцип анализа

Модифицированная среда Фогеса—Проскауэра применяется для постановки теста Фогеса—Проскауэра при дифференциации Bacillus cereus. Тесты на метиловый красный и Фогеса—Проскауэра относятся к биохимическим методам идентификации видов бактерий. Первоначально эти тесты были изучены Фогесом и Проскауэром, а позднее Кларком и Лабсом для дифференциации представителей группы кишечной палочки и аэрогенов.

Оба теста основаны на выявлении определённых продуктов распада углеводов в процессе метаболизма. В бульоне MR-VP после инкубации в течение 18–24 ч ферментация приводит к образованию кислых метаболитов. Организмы, отрицательные по тесту на метиловый красный, дополнительно метаболизируют первичные продукты ферментации путём декарбоксилирования с образованием нейтрального ацетилметилкарбинола (ацетоина). Это снижает кислотность среды и повышает pH до нейтрального значения — pH 6,0 или выше.

В присутствии атмосферного кислорода и щёлочи нейтральные конечные продукты — ацетоин и 2,3-бутандиол — окисляются до диацетила. Диацетил реагирует с креатином с образованием красного окрашивания.

Протеозопептон и декстроза обеспечивают среду необходимыми компонентами для роста микроорганизмов, а хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.

Методика проведения теста Фогеса—Проскауэра

1. Инокулируйте 5 мл среды петлёй с культурой, объём которой соответствует петле диаметром 3 мм.
2. Инкубируйте пробирки в течение 48 ± 2 ч при 35 °C.
3. Для определения образования ацетилметилкарбинола перенесите пипеткой 1 мл культуры в пробирку размером 16 × 125 мм.
4. Добавьте 0,6 мл 5%-ного раствора альфа-нафтола (RM1392).
5. Добавьте 0,2 мл 40%-ного гидроксида калия (RM1015).
6. Встряхните пробирку.
7. Добавьте несколько кристаллов креатина.
8. Выдержите пробирку 1 ч при комнатной температуре.
9. Оцените результат. Тест считают положительным при появлении розового или фиолетового окрашивания.

Технические характеристики

• Масса: 500 г
• Диапазон температуры хранения сухой среды: 10–30 °C
• Конечный pH при 25 °C: 6,5 ± 0,2
• pH 1,7%-ного водного раствора при 25 °C: 6,30–6,70

Контроль качества

Внешний вид: однородный, сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор светло-жёлтого цвета без осадка.

Реакция: реакция 1,7%-ного водного раствора при 25 °C; pH 6,5 ± 0,2.

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35 °C в течение 46–50 ч.

Сбор и обработка образцов

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения метода

1. Тесты на метиловый красный и Фогеса—Проскауэра не следует использовать как единственный способ дифференциации микроорганизмов.
2. Известный микроорганизм, положительный по ацетоину, иногда не даёт положительной реакции в тесте Фогеса—Проскауэра. Для устранения такой возможности культуру, содержащую реагенты для теста Фогеса—Проскауэра, следует осторожно нагреть.

Условия эксплуатации, хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Контейнер: плотно закрытый.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухое, проветриваемое, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Меры предосторожности

Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.

При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики при работе с образцами и культурами. При обращении с образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.