HiMedia M070F-500G Модифицированная среда Фогес-Проскауэра

Модифицированная среда Фогес-Проскауэра HiMedia M070F-500G предназначена для проведения теста Фогеса-Проскауэра с целью дифференциации Bacillus cereus. Среда используется для анализа проб пищевых продуктов в соответствии с методикой FDA BAM 1998; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

Среда используется для определения способности микроорганизмов вырабатывать нейтральный ацетилметилкарбинол (ацетоин). В процессе метаболизма углеводов через 18–24 часа инкубации образуются кислые побочные продукты. MR-отрицательные организмы далее метаболизируют эти продукты путем декарбоксилирования с образованием ацетоина, что снижает кислотность среды и повышает pH до нейтрального значения (6,0 и выше). В присутствии атмосферного кислорода и щелочи ацетоин и 2,3-бутандиол окисляются до диацетила, который при взаимодействии с креатином дает красный цвет.

Протеозопептон и декстроза обеспечивают необходимые питательные вещества для роста, а хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.

Методика проведения анализа

1. Посев: В 5 мл среды внесите культуру с помощью петли диаметром 3 мм.
2. Инкубация: Инкубируйте пробирки в течение 48 ± 2 ч при температуре 35 °C.
3. Проведение теста:
   • Перенесите пипеткой 1 мл культуры в пробирку размером 16 × 125 мм.
   • Добавьте 0,6 мл 5 % раствора альфа-нафтола (RM1392) и 0,2 мл 40 % раствора гидроксида калия (RM1015).
   • Перемешайте содержимое и добавьте несколько кристаллов креатина.
4. Оценка результата: Выдержите пробирку в течение 1 ч при комнатной температуре. Положительная реакция характеризуется развитием розового или фиолетового окрашивания.

Приготовление и стерилизация

1. Растворите 17 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте раствор до полного растворения компонентов.
3. Разлейте среду в пробирки по 10 мл.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 10 минут.
5. Охладите до 45–50 °C перед использованием.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 6,5 ± 0,2
• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый прозрачный раствор без осадка
• Диапазон pH: 6,30–6,70

Дополнительные параметры:

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35 °C в течение 46–50 часов.

Область применения и ограничения

Среда применяется для анализа пищевых проб. Сбор и обработка образцов должны проводиться в соответствии с установленными руководствами.

Ограничения:

• Тесты MR (метиловый красный) и VP (Фогеса-Проскауэра) не должны использоваться как единственный метод дифференциации.
• В редких случаях известные ацетоин-положительные организмы не дают положительной VP-реакции. Для устранения этой проблемы культуру с реагентами VP следует осторожно нагреть.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты подлежат безопасному удалению путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.