HiMedia M065S-100G Среда дезоксихолат-цитратный агар

Питательная микробиологическая среда HiMedia M065S-100G «Среда дезоксихолат-цитратный агар» для выделения видов Shigella из пищевых продуктов; масса упаковки — 100 г. Среда применяется для селективного посева обогащённых культур, подавляет грамположительные бактерии и большинство кишечной микрофлоры, а также дифференцирует лактозосбраживающие и нелактозосбраживающие микроорганизмы по окраске колоний.

Назначение и область применения

Дезоксихолат-цитратный агар рекомендуется для выделения видов Shigella из пищевых образцов в соответствии с IS 5887 (часть 7):1999. Среду используют для посева материала, полученного после обогащения в селенитовой F-среде или тетратионатном бульоне.

Среда предназначена для микробиологического контроля пищевых продуктов, включая выявление бактерий, вызывающих пищевые отравления.

Состав

Расход сухой среды составляет 55,45 г на 1000 мл дистиллированной воды.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

Дезоксихолат натрия подавляет рост грамположительных бактерий. Цитрат, содержащийся в среде, ингибирует большинство представителей кишечной микрофлоры.

Лактозосбраживающие колиформы образуют розовые колонии, тогда как нелактозосбраживающие микроорганизмы формируют бесцветные колонии. Нейтральный красный используется как индикатор pH и обеспечивает дифференциацию энтеробактерий: при сбраживании лактозы образуются красные или розовые колонии, а при отсутствии сбраживания лактозы — бесцветные.

Микроорганизмы, способные восстанавливать цитрат аммония железа до сульфида железа, образуют почернение в центральной части колонии; такая реакция указывает на образование H₂S.

Мясной экстракт и протеозопептон служат источниками углерода и азота, лактоза — сбраживаемым углеводом.

Подготовка среды

1. Суспендируйте 55,45 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Не стерилизуйте в автоклаве.
4. Избегайте чрезмерного нагревания, поскольку он ухудшает свойства среды.
5. Перед инкубацией высушите поверхность приготовленной среды.

Пробоподготовка и методика анализа

Пищевые продукты, подвергавшиеся сухой тепловой обработке, включая высушивание, обезвоживание или превращение в порошок, предварительно обогащают в неингибирующей среде, например в питательном бульоне.

Сырые пищевые продукты и готовые продукты, предположительно сильно загрязнённые после обработки, не требуют предварительного обогащения.

1. Отберите одну порцию образца массой приблизительно 25 г и смешайте её примерно с 200 мл селенитовой F-среды в стерильной чаше блендера в течение 2 мин либо разотрите образец со стерильным песком в стерильной ступке.
2. Отдельно отберите вторую порцию образца массой приблизительно 5 г и смешайте её примерно с 200 мл тетратионатного бульона в стерильной чаше блендера в течение 2 мин либо разотрите образец со стерильным песком в стерильной ступке.
3. Инкубируйте обогащённые среды при 37 °C в течение 24 ч.
4. Образцы сырого мяса инкубируйте при 43 °C вместо 37 °C.
5. После инкубации выполните посев на дезоксихолатный агар M065S.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до розовато-бежевого цвета.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с 2,045 % агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель красновато-оранжевого цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция

Реакция 5,55 % масс./об. водного раствора при 25 °C: pH 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH

7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяли после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M065S-100G
• Назначение изделия: питательная микробиологическая среда
• Форма выпуска: порошок
• Масса: 100 г
• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности)
• Расход среды: 55,45 г/л
• Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,10–7,50
• Указанный температурный диапазон: 10–30 °C

Хранение и срок годности

• Сухую среду хранить в плотно закрытой ёмкости при температуре ниже 30 °C.
• Приготовленную среду хранить при 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Нормативная основа методики

Методика основана на IS 5887 (часть 7):1999 — методах выявления бактерий, вызывающих пищевые отравления.