Питательный желатин HiMedia M060-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда Питательный желатин HiMedia M060-500G (уп/500 гр) для определения протеолитических свойств микроорганизмов. Применяется для проведения теста на разжижение желатина в клинических и неклинических образцах, а также для микробиологического подсчета бактерий в воде.

Принцип измерения

Питательный желатин разработан в соответствии с формуляцией, используемой для анализа воды, сточных вод и других материалов санитарного значения. Пептон и HM-пептон B служат источниками азота, углерода, длинноцепочечных аминокислот и других питательных веществ, необходимых для роста нетребовательных организмов. Желатин выступает в качестве субстрата для определения способности микроорганизма вырабатывать желатиназу — протеолитический фермент, вызывающий разжижение желатина.

Методика проведения анализа

1. Подготовка и посев: Чистую культуру 18–24-часового возраста, выращенную на трёхсахарном железном агаре (TSI) (M021) или железо-агаре Клиглера (M078), инокулируют методом «укола» с помощью инокуляционной иглы строго по центру среды на глубину примерно 1,3 см (1/2 дюйма) от дна пробирки.
2. Инкубация: Пробирки, включая неинокулированный контроль, инкубируют при температуре 35 ± 2 °C в течение 24–48 часов. Для некоторых видов может потребоваться более длительная инкубация.
3. Интерпретация результатов:
   • Желатин остается твердым при температуре 20 °C и ниже, и становится жидким при 35 °C и выше.
   • Поскольку разжижение происходит примерно при 28 °C, перед интерпретацией результатов пробирки выдерживают в холодильнике около 2 часов.
   • Разжижение начинается с поверхностного слоя, поэтому пробирки нельзя встряхивать.
   • Контроль проводится с каждой серией тестов, так как желирующие свойства желатина варьируются.
4. Подсчет бактерий в воде: Инкубация проводится при температуре 20–22 °C на срок до 30 дней.

Приготовление и стерилизация

1. Суспендируйте 128,0 г порошка в 1000 мл теплой (50 °C) очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте по пробиркам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C и давлении ≈0,1 МПа (15 фунтов) в течение 15 минут.
5. Охладите пробирки в вертикальном положении.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 6,8 ± 0,2
• Внешний вид: однородный, свободно текучий, слегка грубый порошок от кремового до желтого цвета
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель (в виде столбика в пробирке)
• Свойства гелеобразования: полутвердый гель, сопоставимый с 12,0% раствором желатина

Дополнительные параметры:

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C от 1 до 7 суток (для Cl. perfringens — в анаэробных условиях). Перед тестом на желатиназу охладить ниже 20 °C.

Область применения и ограничения

Типы образцов: изолированные микроорганизмы из клинических проб, пробы воды.

Ограничения:

• Не рекомендуется для определения разжижения желатина требовательными видами и облигатными анаэробами.
• Если пробирки инкубировались при температуре выше 20 °C, их необходимо охладить ниже 20 °C перед проведением анализа.
• Запрещено встряхивать пробирки после инкубации, так как это может привести к ложноотрицательным результатам.
• Концентрация желатина не должна превышать 12 %, так как это может подавить рост микроорганизмов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Утилизация: загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Только для профессионального использования в целях диагностики in vitro.
• Использовать средства индивидуальной защиты: защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической лабораторной практики при работе с клиническими образцами и культурами.