Агаровая среда O (агар Бэрд-Паркера) HiMedia M043B-100G (100 г)

Агаровая среда O (агар Бэрд-Паркера) HiMedia M043B-100G (100 г) — сухая селективная среда для выделения коагулазоположительных стафилококков. Среду применяют для их выявления и количественного учёта в пищевых и фармацевтических образцах, однако на ней могут расти и другие бактерии.

Область применения

Среда предназначена для выделения и количественного учёта коагулазоположительных стафилококков из пищевых и других материалов, включая фармацевтические образцы. В Британской фармакопее среда обозначена как агаровая среда O; она рекомендована для контроля стерильности материалов на наличие Staphylococcus aureus.

Стафилококки могут присутствовать в пищевых, молочных, фармацевтических и косметических продуктах. Среда разработана Бэрд-Паркером на основе теллурит-глициновой формулы Зебовица и позднее была принята AOAC и Британской фармакопеей. В техническом описании среда характеризуется как менее ингибирующая для Staphylococcus aureus, чем другие среды, и одновременно более селективная.

Состав

Формула скорректирована и стандартизована для соответствия параметрам эффективности. Tryptone ## — триптон; HM Peptone B# — эквивалент панкреатического переваривания казеина, обозначенного как эквивалент мясного экстракта.

Принцип действия и интерпретация результатов

Пептон HM B, дрожжевой экстракт и триптон обеспечивают среду азотсодержащими и углеродсодержащими соединениями, аминокислотами с длинной цепью, минеральными веществами, витаминами и другими компонентами, необходимыми для роста. Пируват натрия защищает повреждённые клетки и способствует их восстановлению. Хлорид лития и теллурит калия подавляют рост большинства сопутствующих микроорганизмов, кроме Staphylococcus aureus. Глицин и пируват способствуют росту стафилококков.

После добавления эмульсии яичного желтка среда становится жёлтой и непрозрачной. Глицин нейтрализует альдегиды, а яичный желток — присутствующие в образце фенольные соединения. Протеолитические бактерии образуют вокруг колоний прозрачную зону — лецитиназную реакцию. Сочетание прозрачной зоны с серо-чёрными колониями является диагностическим признаком коагулазоположительных стафилококков. При дальнейшем инкубировании вокруг колоний может появиться непрозрачная зона, связанная с липолитической активностью.

Идентичность выделенного на агаре Бэрд-Паркера Staphylococcus aureus необходимо подтвердить реакцией на коагулазу и тестом на дезоксирибонуклеазу. Отсутствие роста Staphylococcus aureus на среде используют для подтверждения стерильности продукта.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 63,0 г порошка в 950 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения, чтобы полностью растворить среду.
3. Стерилизуйте в автоклаве при 121 °C в течение 15 мин и давлении 15 psi (≈0,10 МПа).
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте 50 мл концентрированной эмульсии яичного желтка (FD045) и 10 мл стерильного 1%-ного раствора теллурита калия (FD052).
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Образцы и обращение с ними

Типы образцов: пищевые и фармацевтические.

При сборе и обработке пищевых и фармацевтических образцов соблюдайте соответствующие методики и руководства. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид: однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем на основе 2,0%-ного агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: базовая среда образует жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель. После добавления эмульсий яичного желтка и теллурита в чашках Петри образуется жёлтый непрозрачный гель.

Реакция после стерилизации: pH 6,8±0,2 для водного раствора с концентрацией 6,3 % масс./об.

Диапазон pH: 6,60–7,00.

Ростовые характеристики оценивают в соответствии с Британской фармакопеей после инкубирования при 35–37 °C в течение 18–72 ч. Показатель восстановления принят за 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом агаре.