HiMedia M040-500G Среда для анализа ниацина

Сухая питательная среда HiMedia M040-500G для анализа ниацина, предназначенная для микробиологического определения содержания ниацина (никотиновой кислоты) или ниацинамида. В качестве тест-организма используется штамм Lactobacillus plantarum ATCC 8014.

Принцип измерения

Среда M040 относится к категории сред для анализа витаминов. Она разработана по формуле Снелла и Райта с модификациями Креля, Стронга, Эльвехьяма и Бартона-Райта; состав соответствует рекомендациям AOAC и Фармакопеи США (USP).

Среда не содержит никотиновой кислоты, но включает все остальные питательные вещества и витамины, необходимые для культивирования L. plantarum ATCC 8014. Добавление ниацина в заданных возрастающих концентрациях вызывает соответствующий рост микроорганизма, который измеряется турбидиметрически или титриметрически (ацидиметрически).

Методика проведения анализа

Подготовка и инокуляция

1. Подготовьте сток-культуры L. plantarum ATCC 8014 на агаре для лактобацилл AOAC (M366).
2. Получите культуру для анализа, инокулировав агар AOAC (M366) и инкубируя при 35–37 °C в течение 24–48 ч.
3. Перенесите культуры в бульон для лактобацилл AOAC (M367) для подготовки инокулята.
4. После инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч центрифугируйте клетки и трижды промойте их 0,85 % раствором NaCl.
5. Подготовьте соответствующий разбавленный раствор клеток и инокулируйте им пробирки со средой M040, содержащие возрастающие концентрации ниацина.

Построение стандартной кривой

Стандартная кривая строится с использованием стандартного образца ниацина USP с уровнями 0,0; 0,025; 0,05; 0,075; 0,1; 0,125; 0,15; 0,2 и 0,25 мкг ниацина на одну пробирку (10 мл). Данная кривая используется для экстраполяции неизвестной концентрации ниацина в исследуемом образце.

Режимы анализа

• Турбидиметрический анализ: измерение проводится после 16–18 ч инкубации при 35–37 °C.
• Ацидиметрический анализ: наилучшие результаты достигаются после 72 ч инкубации при 35–37 °C.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 7,51 г порошка в 100 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте для полного растворения компонентов. Тщательно перемешайте для равномерного распределения небольшого количества осадка.
3. Для проведения анализа разлейте по 5 мл среды в каждую пробирку (содержащую стандарт или исследуемое вещество) и доведите общий объем до 10 мл дистиллированной водой.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 10 минут.
5. Охладите немедленно.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Физико-химические и эксплуатационные параметры

• Значение pH (при 25 °C): 6,8 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 6,60–7,00
• Внешний вид: гомогенный свободнотекучий порошок от почти белого до желтого цвета
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный прозрачный раствор (допустим небольшой осадок)
• Вес: 500 г
• Происхождение компонентов: животное
• Форма выпуска: порошок
• Тип упаковки: стеклянная бутылка

Область применения и ограничения

Среда используется для анализа чистых изолятов. Для полной идентификации микроорганизмов требуется проведение дополнительных биохимических тестов.

Важные требования:

• Используйте только чистую стеклянную посуду, очищенную без применения моющих средств.
• Даже минимальное загрязнение посторонними веществами может привести к ошибочным результатам.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения (сухая и готовая среда): +2…+8 °C.
• Хранить в плотно закрытой таре в сухом проветриваемом помещении, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.
• Из-за гигроскопичности продукта неправильное хранение может привести к образованию комков.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты подлежат безопасному удалению путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.