HiMedia M032F-500G Жидкая тетратионатная среда без йода

Сухая питательная среда HiMedia M032F Жидкая тетратионатная среда без йода и бриллиантового зеленого весом 500 г. Рекомендуется для селективного обогащения и выделения бактерий рода Salmonella из пищевых продуктов и других материалов санитарного значения в соответствии с методиками FDA BAM.

Принцип измерения

Среда предназначена для выделения видов Salmonella, обладающих ферментом тетратионатредуктазой, которые способны расти в данной среде.

• Биопептон служит источником углерода, азота, витаминов и минералов.
• Желчные соли селективно подавляют рост грамположительных микроорганизмов.
• Тиосульфат натрия в сочетании с тетратионатом подавляет рост сопутствующих колиформных бактерий.
• Карбонат кальция нейтрализует кислые продукты разложения тетратионата.
• Бриллиантовый зеленый (добавляется отдельно) усиливает селективность, ингибируя сопутствующую микрофлору.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Растворите 35,12 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения. НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ.
3. Охладите раствор до температуры ниже 45 °C.
4. Добавьте свежеприготовленные растворы: 20 мл раствора йода (6 г йода и 5 г йодида калия в 20 мл дистиллированной воды) и 10 мл 0,1% раствора бриллиантового зеленого.
5. Тщательно перемешайте и разлейте по 10 мл в стерильные пробирки (размером 20 × 150 мм или 16 × 150 мм).
6. Готовый раствор следует использовать в день приготовления. Базовый стерилизованный бульон (без йода и красителя) может храниться некоторое время.
7. Важно: не нагревать среду после добавления йода и раствора красителя. Использовать среду сразу после добавления йода.

Примечание: из-за содержания карбоната кальция приготовленная среда представляет собой опалесцирующий раствор с белым осадком.

Процедура анализа

В зависимости от типа пищевого образца (гуаровая камедь, молоко, яйца, томаты, мякоть манго и др.), 25 г пробы предварительно обрабатывают в подходящих разбавителях, таких как лактозный бульон (M1003), буферный пептонный бульон (M614) или универсальный бульон для предварительного обогащения (M1372F), в соотношении образец : бульон 1:9.

1. При высокой микробной нагрузке: 0,1 мл смеси образца смешивают с 10 мл тетратионатного бульона (M032F) и инкубируют при 43 °C ± 0,2.
2. При низкой микробной нагрузке: инкубируют при 35 °C ± 0,2 в течение 24 ± 2 ч.
3. После инкубации 10 мкл среды высевают на твердые селективные среды: агар с висмутом и сульфитом (M027), ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар (M031F) или агар Гектоэна (M467F).
4. Проверяют наличие типичных колоний Salmonella с последующей биохимической идентификацией и подтверждением.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Дополнительные параметры

Контроль качества

• Внешний вид: белый или кремовый гомогенный свободнотекучий порошок.
• Цвет и прозрачность готовой среды (с йодом и бриллиантовым зеленым): светло-зеленый опалесцирующий раствор с обильным белым осадком, который оседает при отстаивании.
• pH: 8,20–8,60.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при посеве на XLD-агар (M031F) после обогащения в тетратионатной среде и инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов (с добавлением бриллиантового зеленого и раствора йода).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: в плотно закрытом контейнере при температуре ниже 30 °C.
• Хранение приготовленной среды: при температуре 2–8 °C.
• Использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.