Жидкая цистин-селенитовая среда HiMedia M025-500G (уп/500 гр)

Жидкая питательная среда HiMedia M025-500G (уп/500 гр) производства HiMedia для селективного обогащения при выявлении видов Salmonella. Среда применяется для анализа клинических, пищевых и молочных образцов, при этом подготовленный бульон нельзя стерилизовать в автоклаве и не следует инкубировать более 24 ч.

Назначение и область применения

Жидкая цистин-селенитовая среда используется как селективная среда обогащения для культивирования видов Salmonella.

Среда предназначена для:

• выявления Salmonella в клинических образцах, включая фекалии;
• исследования пищевых и молочных образцов;
• выявления Salmonella при небольшом количестве микроорганизмов в образце;
• анализа образцов после повреждения клеток в результате обработки пищевых продуктов низкими температурами, нагревом, сушкой, облучением, консервантами или дезинфицирующими средствами;
• эпидемиологических исследований для повышения выявляемости небольшого количества микроорганизмов у бессимптомных пациентов и пациентов в период выздоровления.

Формула среды обеспечивает пролиферацию Salmonella и подавляет рост конкурирующих микроорганизмов, не относящихся к Salmonella. Для восстановления Salmonella из пищевых образцов применяют предварительное обогащение, селективное обогащение и последующий высев на селективные плотные среды.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Селективное ингибирующее действие селенита впервые продемонстрировал Klett. Guth использовал селенит для выделения Salmonella Typhi. Leifson исследовал селенит и разработал среду на его основе. Жидкая цистин-селенитовая среда представляет собой модификацию формулы Leifson с добавлением цистина.

Состав среды соответствует рекомендациям AOAC для выявления Salmonella в пищевых продуктах, особенно в яичных продуктах; среда также рекомендована APHA и USP как фактическая основа методики применения.

Функции компонентов:

• триптон обеспечивает азотистые питательные вещества;
• лактоза является сбраживаемым углеводом и поддерживает pH среды при восстановлении селенита в процессе роста бактерий и образовании щёлочи;
• повышение pH снижает токсичность селенита и может привести к избыточному росту других бактерий;
• кислота, образующаяся при сбраживании лактозы, поддерживает нейтральный pH;
• фосфат стабилизирует pH и одновременно снижает токсичность селенита;
• L-цистин действует как восстановитель и улучшает восстановление Salmonella.

Обогащённый бульон пересевают на плотную среду. Бульон нельзя инкубировать дольше 24 ч, поскольку ингибирующее действие селенита снижается через 6–12 ч инкубации.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 4,0 г части B в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 19,01 г части A.
3. Тщательно перемешайте.
4. Нагрейте до полного растворения среды.
5. Распределите среду по стерильным пробиркам.
6. Стерилизуйте на кипящей водяной бане или в потоке свободного пара в течение 10 мин.
7. Не стерилизуйте среду в автоклаве: чрезмерный нагрев ухудшает её свойства.
8. Утилизируйте приготовленную среду, если произошло значительное восстановление селенита. Признаком служит красный осадок на дне пробирки или флакона.

Вместо части B после кипячения в среду можно добавить:

• диски биселенита натрия DD056 — 1 диск на 10 мл среды;
• бад биселенита натрия DB001 — 1 бад на 100 мл среды.

Методика анализа

1. Внесите пищевой образец в рекомендованный бульон предварительного обогащения.
2. Перенесите 1 мл полученной смеси в 10 мл жидкой цистин-селенитовой среды.
3. Параллельно перенесите 1 мл смеси в 10 мл тетратионатного бульона M032.
4. Инкубируйте посевы.
5. Выполните последующий пересев на одну или несколько селективных плотных сред:
   • агар сульфита висмута M027;
   • ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар M031;
   • агар Хектоэна для энтеробактерий M467;
   • агар МакКонки M081.

Типы образцов

• Клинические образцы: фекалии.
• Пищевые образцы.
• Молочные образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

• Часть A: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Часть B: однородный сыпучий порошок от белого до кремового цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Светло-жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий раствор полной среды.

Реакция среды

Реакция среды при концентрации 1,9 % масс./об. части A и 0,4 % масс./об. части B, измеренная при 25 °C:

• pH: 7,0 ± 0,2.

Диапазон pH

• pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч с последующим пересевом на ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар M031.

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 24 ч с последующим пересевом на триптиказо-соевый агар M290.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

• Наименование: жидкая цистин-селенитовая среда HiMedia M025-500G, Fluid Selenite Cystine Broth, Selenite Cystine Broth, Twin Pack.
• Формат: двойная упаковка.
• Масса упаковки: 500 г.
• Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2.
• Рабочий диапазон pH: 6,80–7,20.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03706.
• Назначение изделия: питательная среда.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Сухой продукт храните в плотно закрытой ёмкости в сухом проветриваемом помещении.
• После вскрытия плотно закрывайте флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности продукта.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Защищайте продукт от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте ёмкость.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Эффективность среды обеспечивается при использовании в течение установленного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Ограничения применения

• Некоторые микроорганизмы могут расти слабо из-за различий в потребностях в питательных веществах.
• Для полной идентификации необходимо дополнительно провести серологические и биохимические тесты.
• Приготовленную среду нельзя стерилизовать в автоклаве.
• Чрез