HiMedia M009-100G Жидкая тиогликолевая среда

Сухая питательная среда HiMedia M009-100G Жидкая тиогликолевая среда с нормой приготовления 29,75 г/л. Среда предназначена для контроля стерильности биологических препаратов и культивирования аэробов, анаэробов и микроаэрофилов из фармацевтических и клинических образцов, включая только прозрачные жидкости и водорастворимые материалы.

Назначение и область применения

Жидкая тиогликолевая среда рекомендована для:

• испытаний на стерильность биологических препаратов;
• культивирования анаэробов, аэробов и микроаэрофилов;
• исследования фармацевтических и клинических образцов;
• определения фенольного коэффициента и спороцидного действия дезинфицирующих средств;
• контроля стерильности хранящейся крови в банках крови.

Типы образцов

• Фармацевтические образцы для испытаний на стерильность.
• Клинические образцы: гной, материал из ран.

Среда предназначена для исследования прозрачных жидкостей и водорастворимых материалов.

Состав

Для приготовления 1 л среды требуется 29,75 г сухой смеси.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам эффективности.

Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация

Жидкая тиогликолевая среда разработана Brewer для ускоренного культивирования аэробов и анаэробов, включая микроаэрофилы. Для этого в состав добавлены восстановитель и небольшое количество агара.

Декстроза, триптон, дрожжевой экстракт и L-цистин обеспечивают факторы роста, необходимые для размножения бактерий. L-цистин и тиогликолят натрия позволяют клостридиям расти в среде даже в аэробных условиях. Небольшое количество агара поддерживает рост как аэробов, так и анаэробов, в том числе при отсутствии тиогликолята натрия.

Тиогликолят натрия действует как восстановитель и нейтрализует токсическое воздействие ртутьорганических консервантов и пероксидов, образующихся в среде. Это способствует созданию анаэробных условий и позволяет исследовать материалы, содержащие тяжёлые металлы.

Увеличение содержания кислорода определяется по изменению окраски окислительно-восстановительного индикатора — резазурина: цвет изменяется на красный. Небольшое количество агара помогает поддерживать низкий окислительно-восстановительный потенциал и стабилизировать среду.

Британская фармакопея (BP), Европейская фармакопея (EP), Фармакопея США (USP) и официальные методы AOAC рекомендуют тиогликолевую среду для испытаний на стерильность антибиотиков, биологических препаратов и пищевых продуктов, а также для определения фенольного коэффициента и спороцидного действия дезинфицирующих средств.

Приготовление среды

1. Приготовьте суспензию из 29,75 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/кв. дюйм, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите приготовленную среду до 25 °C.
5. Храните среду в прохладном тёмном месте, предпочтительно при температуре ниже 25 °C.

Восстановление окраски среды

Если более чем верхняя треть среды приобрела розово-фиолетовую окраску, среду допускается однократно восстановить нагреванием на водяной бане или в свободно текущем пару до исчезновения розово-фиолетовой окраски.

Отбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным руководствам.

Для фармацевтических образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно требованиям BP, EP и USP.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Среда предназначена для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед вскрытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид сухой среды: однородный свободно сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Приготовленная среда представляет собой раствор светло-соломенного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий. При отстаивании верхние 10 % или менее среды могут иметь розово-фиолетовую окраску.

Реакция и pH

• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 2,97 % масс./об. при 25 °C.
• pH: 7,1 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,90–7,30.

Испытание стимулирования роста

Испытание стимулирования роста выполняют в соответствии с требованиями USP, EP, BP и IP.

Ростостимулирующие свойства

При внесении посевной дозы не более 100 КОЕ и инкубации при 30–35 °C должно наблюдаться отчётливо видимое культивирование микроорганизмов, сопоставимое с результатом, ранее полученным для проверенной и одобренной партии среды, за период не более минимального времени, установленного для соответствующего микроорганизма.

Для аэробов и анаэробов инкубация проводится не более 3 суток.

Испытание на стерильность, стимулирование роста и валидация

Среду испытывают с подходящими штаммами микроорганизмов при посевной дозе не более 100 КОЕ:

• для бактерий — при 20–25 °C в течение не более 3 суток;
• для грибов — при 20–25 °C в течение не более 5 суток.

Культуральные характеристики при 30–35 °C