Cреда для сепарации лимфоцитов HiSep LSM 1077 HiMedia LS001-100ML (100 мл)

Среда для сепарации лимфоцитов HiSep LSM 1077 HiMedia LS001-100ML (100 мл) — изоосмотическая среда низкой вязкости плотностью 1,0770 ± 0,0010 г/мл. Среда предназначена для выделения мононуклеарных клеток и лимфоцитов из дефибринированной человеческой крови, обработанной ЭДТА или гепарином, методом центрифугирования в течение 30 мин.

Назначение

HiSep LSM 1077 применяется для выделения мононуклеарных клеток человека — лимфоцитов и моноцитов — из дефибринированной человеческой крови. Среда также позволяет отделять тромбоциты от эритроцитов и гранулоцитов по плотности клеток при центрифугировании.

Среда сертифицирована для применения в диагностике in vitro (IVD).

Принцип сепарации

Метод основан на адаптированной методике выделения мононуклеарных клеток человека центрифугированием по Бёюму. Дефибринированную кровь наслаивают на раствор диатризоата натрия и полисукрозы, после чего центрифугируют на низких скоростях в течение 30 мин.

Дифференциальная миграция клеток при центрифугировании приводит к формированию нескольких клеточных слоёв:

• мононуклеарные клетки — лимфоциты и моноциты — вместе с тромбоцитами концентрируются в зоне раздела плазмы и среды LSM, поскольку их плотность отличается от плотности других клеточных компонентов;
• эритроциты и гранулоциты мигрируют через градиент плотности на дно пробирки и формируют осадок, содержащий преимущественно эти клетки.

Методика выделения клеток

1. Используют дефибринированную человеческую кровь, обработанную ЭДТА или гепарином.
2. Образец крови наслаивают на раствор диатризоата натрия и полисукрозы.
3. Проводят центрифугирование на низких скоростях в течение 30 мин.
4. После центрифугирования отбирают полосу клеток в зоне раздела плазмы и среды LSM, содержащую мононуклеарные клетки — лимфоциты и моноциты — и тромбоциты.
5. Осадок на дне пробирки, содержащий преимущественно эритроциты и гранулоциты, отделяют от фракции мононуклеарных клеток.

Состав и физико-химические свойства

Среда содержит полисукрозу и дигидрат диатризоевой кислоты. Состав адаптирован для формирования градиента плотности, обеспечивающего разделение клеточных компонентов крови при центрифугировании.

• Осмолярность: изоосмотическая
• Вязкость: низкая
• Плотность: 1,0770 ± 0,0010 г/мл
• Основные компоненты: полисукроза, дигидрат диатризоевой кислоты
• Объём: 100 мл

Технические характеристики

• Наименование: HiSep LSM 1077
• Артикул: LS001-100ML
• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: среда для сепарации лимфоцитов и мононуклеарных клеток
• Исходный материал: дефибринированная человеческая кровь
• Допустимая обработка крови: ЭДТА или гепарин
• Метод выделения: центрифугирование в градиенте плотности
• Продолжительность центрифугирования: 30 мин
• Режим центрифугирования: низкие скорости
• Плотность среды: 1,0770 ± 0,0010 г/мл
• Осмолярность: изоосмотическая
• Вязкость: низкая
• Применение: диагностика in vitro (IVD)

Отличие от методов без градиента плотности

В отличие от простого осаждения клеток, HiSep LSM 1077 обеспечивает дифференциальное разделение компонентов крови по плотности: мононуклеарные клетки и тромбоциты концентрируются на границе плазмы и среды, а эритроциты и гранулоциты оседают на дно пробирки.