HiMedia LQ104I-25X10ML Среда Раппапорта-Вассилиадиса для обогащения сальмонелл (25×10 мл)

Питательная микробиологическая среда HiMedia LQ104I-25X10ML Среда Раппапорта-Вассилиадиса для обогащения сальмонелл (25×10 мл) — готовый к применению селективный бульон с объёмом 10 мл во флаконе и pH 5,00–5,40. Среда предназначена для селективного обогащения видов Salmonella в фармацевтических и клинических образцах; применение ограничено профессиональными лабораториями и требует соблюдения правил работы с инфекционным материалом.

Назначение

Среда предназначена для селективного обогащения видов Salmonella из фармацевтических образцов и клинических проб — фекальных разведений — в соответствии с гармонизированными методиками USP, EP, BP и JP; состав также соответствует Индийской фармакопее (IP).

Среда допускает прямое обогащение образцов с низкой посевной дозой без предварительного обогащения. Обогащённую культуру бульона для обогащения сальмонелл по Раппапорту—Вассилиадису LQ104C можно далее пересевать для выделения на ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар XLD (MH031/MPH031/M031).

Состав

Формула на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Принцип селективного обогащения

Бульон для обогащения сальмонелл по Раппапорту—Вассилиадису разработан на основе пересмотренной рецептуры Van Schothorst и соавторов и предназначен для селективного обогащения бактерий рода Salmonella из фармацевтических продуктов. Среда представляет собой модификацию бульона для обогащения по Раппапорту—Вассилиадису, описанного Van Schothorst и Renauld. Рецептура подготовлена в соответствии с гармонизированной методологией USP/EP/BP/JP/IP.

Селективность среды основана на физиологических особенностях Salmonella:

• виды Salmonella обычно сохраняют жизнеспособность при несколько повышенном осмотическом давлении;
• виды Salmonella способны расти при несколько пониженном pH;
• устойчивость Salmonella к малахитовому зелёному выше, чем у многих других бактерий;
• хлорид магния повышает осмотическое давление среды;
• природные сахара соевого пептона обеспечивают необходимые питательные вещества и поддерживают рост Salmonella;
• фосфатная буферная система поддерживает постоянное значение pH;
• хлорид натрия сохраняет осмотический баланс;
• малахитовый зелёный подавляет рост многих грамположительных бактерий и одновременно обеспечивает селективное обогащение Salmonella;
• относительно низкая концентрация питательных веществ дополнительно способствует селективному обогащению Salmonella.

Среда может применяться для выделения Salmonella из человеческих фекалий без предварительного этапа обогащения. Производитель указывает применение среды для выявления Salmonella в образцах молока в сравнении с тетратионатным бульоном, селенитным обогащающим бульоном и тетратионатно-бриллиантово-зелёным бульоном.

Методика проведения анализа

1. Промаркируйте флакон LQ104I, готовый к применению.
2. Внесите исследуемый образец во флакон.
3. Инкубируйте флакон при установленной методикой температуре в течение установленного методикой времени.
4. Для дальнейшего выделения выполните пересев обогащённой культуры на агар XLD (MH031/MPH031/M031).

Точная температура и продолжительность инкубации определяются применяемой методикой и требованиями к конкретному образцу. Для контроля культуральных характеристик используются режимы 30–35 °C в течение 18–24 ч, если не указано иное.

Тип образцов

• Фармацевтические образцы.
• Клинические образцы: фекальные разведения.

Отбор и обращение с образцами

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным лабораторным руководствам и методикам.

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам и методикам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Среда предназначена для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Отдельные микроорганизмы различаются по требованиям к росту и могут демонстрировать различные характерные картины роста на среде.
2. Каждая серия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). При необходимости применения среды для микроорганизма, не указанного в COA, пользователю рекомендуется самостоятельно валидировать среду с учётом конкретных требований.

Эксплуатационные характеристики

Ожидаемые характеристики среды обеспечиваются при соблюдении инструкции на этикетке, использовании в пределах срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид и физико-химические характеристики

• Внешний вид: стерильный прозрачный бульон для обогащения сальмонелл по Раппапорту—Вассилиадису, соответствующий IP, во флаконах.
• Цвет: раствор голубовато-зелёного цвета.
• Объём среды: 10 мл во флаконе.
• pH: 5,00–5,40.
• Метод стерилизации: автоклавирование при 115 °C по валидированному циклу.

Проверка стерильности

Уровень обеспечения стерильности среды валидирован с использованием спор Bacillus subtilis. Споровые полоски, подвергнутые воздействию при 115 °C, и необработанные полоски отдельно инокулировали в 100 мл соево-казеиновой переваренной среды и инкубировали при 35 °C в течение 7 суток.

• Обработанные споровые полоски: роста не наблюдалось.
• Необработанные споровые полоски: наблюдался обильный рост.
• Проверка стерильности: критерии выпуска выполнены.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение 18–24 ч. Выделение проводят с использованием агара XLD (MH031/MPH031/M031).

Ростовые свойства

Отчётливо видимый рост микроорганизма, сопоставимый с ростом, ранее полученным на протестированной и утверждённой серии среды, должен наблюдаться при заданной температуре не позднее минимального указанного периода инкубации при посевной дозе ≤100 КОЕ. Условия испытания: 30–35 °C, ≤18 ч.

Ингибирующие свойства

Рост тестируемого микроорганизма не должен наблюдаться при заданной температуре в течение периода, не меньшего максимального указанного времени, при посевной дозе ≥100 КОЕ. Условия испытания: не менее 100 КОЕ, 30–35 °C, ≥24 ч.

Дополнительные микробиологические испытания