HiMedia LQ085-50X5ML Триптофановый раствор (50×5 мл)

Готовая питательная микробиологическая среда HiMedia LQ085-50X5ML Триптофановый раствор (50×5 мл) представляет собой стерильный прозрачный раствор жёлтого цвета во флаконах по 5 мл. Применяется для выявления образования индола, включая подтверждение предполагаемых колоний Escherichia coli O157:H7; хранить при 2–8 °C.

Назначение и область применения

Триптофановый раствор используют для постановки индольной реакции при идентификации микроорганизмов. Среда предназначена, в частности, для выявления продукции индола у Escherichia coli O157:H7 — признака, используемого при дифференциации колиформных бактерий.

Для выделения предполагаемых штаммов E. coli O157:H7 образец предварительно обогащают в модифицированной основе соево-желчного бульона (M12861), затем выделяют микроорганизмы на основе агара МакКонки с сорбитолом (M2981). Колонии бледного цвета, полученные после инкубации, рассматривают как предположительно относящиеся к E. coli O157:H7 и подвергают индольной пробе с использованием триптофановой среды (M1339).

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Методика применения

1. Промаркируйте флакон с готовым к использованию триптофановым раствором LQ085.
2. Внесите исследуемый образец.
3. Инкубируйте при заданных температуре и времени.

Принцип действия и интерпретация

Энтерогеморрагическая Escherichia coli (EHEC) представляет собой определённую группу E. coli, продуцирующих шигаподобный, или веротоксин. Инфекции, вызываемые EHEC, могут передаваться через воду и пищевые продукты. Наиболее часто заражение происходит при употреблении недостаточно термически обработанного мясного фарша (1, 2, 3).

Известно более 50 серотипов EHEC. Прототипом EHEC является E. coli O157:H7. Инфекция, вызванная E. coli O157:H7, может протекать бессимптомно, сопровождаться лёгкой диареей либо диарейным заболеванием с переходом от диареи без примеси крови к кровянистой диарее и абдоминальным спазмам. Такой комплекс симптомов называют геморрагическим колитом; для него характерны небольшое количество лейкоцитов в кале и отсутствие значительной лихорадки (1, 2, 4).

Триптофановая среда приготовлена по формуле, одобренной комитетом ISO; формула представляет собой модификацию исходной формулы APHA, в которой среда не содержала триптофан (5, 6). Среда предназначена для выявления образования индола у Escherichia coli O157:H7, что является важным признаком при дифференциации колиформных бактерий.

Ферментативный гидролизат казеина обеспечивает источники углерода и азота, необходимые для роста микроорганизмов. Триптофан — аминокислота, служащая субстратом для исследования индольной реакции. Некоторые микроорганизмы расщепляют триптофан с помощью фермента триптофаназы; в результате гидролитической реакции образуется индол (7).

Образовавшийся индол выявляют с помощью реактива Ковача или реактива Эрлиха (8). Индол соединяется с альдегидом, содержащимся в соответствующем реактиве, с образованием красного окрашивания в спиртовом слое. Спиртовой слой извлекает и концентрирует красный окрашенный комплекс.

Схема выделения и подтверждения E. coli O157:H7

1. Обогатите исследуемый образец в модифицированной основе соево-желчного бульона (M12861) инкубацией при 42 °C в течение 18–24 ч.
2. Выделите E. coli O157:H7 на основе агара МакКонки с сорбитолом (M2981).
3. Инкубируйте посевы при 35–37 °C в течение 18–24 ч.
4. Колонии бледного цвета расценивайте как предположительные колонии E. coli O157:H7.
5. Проведите индольную пробу для предположительных колоний с использованием триптофановой среды (M1339).

Контроль качества

Внешний вид

Стерильный прозрачный триптофановый раствор во флаконах.

Цвет

Среда жёлтого цвета.

Количество среды

5 мл среды во флаконе.

Реакция среды

pH: 7,30–7,70.

Испытание на стерильность

Соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Технические характеристики

• Тип продукта: готовая питательная среда
• Форма выпуска: раствор во флаконах
• Объём флакона: 5 мл
• Цвет среды: жёлтый
• Внешний вид: прозрачная среда
• Стерильность: стерильная
• Конечный pH при 25 °C: 7,5 ± 0,2
• Диапазон реакции среды при контроле качества: pH 7,30–7,70
• Назначение: выявление продукции индола
• Код продукта: LQ085
• Фасовка: 50 флаконов по 5 мл

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения: 2–8 °C
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.