HiMedia LQ085-25X5ML Триптофановый раствор (25×5 мл)

Готовая к применению питательная среда HiMedia LQ085-25X5ML Триптофановый раствор (25×5 мл) — стерильный прозрачный раствор жёлтого цвета с конечным pH 7,5 ± 0,2 при 25 °C. Среду применяют для выявления продукции индола, включая дифференциацию предположительных колоний Escherichia coli O157:H7; объём среды во флаконе составляет 5 мл.

Назначение

Триптофановый раствор используют для постановки индольной пробы при выявлении энтерогеморрагической Escherichia coli (EHEC), в том числе E. coli O157:H7. Продукция индола является ключевым признаком дифференциации кишечных палочек и других колиформных микроорганизмов.

Состав

Формула среды скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Энтерогеморрагическая Escherichia coli (EHEC) представляет собой определённую группу E. coli, продуцирующих шига-подобный, или веротоксин. Инфицирование EHEC происходит через воду или пищевые продукты. Наиболее часто заражение связано с употреблением недостаточно термически обработанного мясного фарша.

Известно более 50 серотипов EHEC. E. coli O157:H7 является прототипом EHEC и может вызывать бессимптомную инфекцию, лёгкую диарею или диарейное заболевание с не кровянистой, переходящей в кровянистую диареей и спазмами в животе. Совокупность таких проявлений известна как геморрагический колит; для заболевания характерны небольшое количество лейкоцитов в кале и отсутствие выраженной лихорадки.

Триптофановый раствор приготовлен по формуле, одобренной комитетом ISO. Формула представляет собой модификацию исходной формулы APHA, в которой среда не содержала триптофан. Среда предназначена для выявления продукции индола Escherichia coli O157:H7 — ключевого признака при дифференциации колиформных микроорганизмов.

Ферментативный гидролизат казеина обеспечивает микроорганизмы источниками углерода и азота, необходимыми для роста. Триптофан является аминокислотой и служит субстратом для исследования индольной реакции. Некоторые микроорганизмы расщепляют триптофан с помощью фермента триптофаназы; в результате гидролитической реакции образуется индол.

Образовавшийся индол выявляют с помощью реагента Ковача или реагента Эрлиха. Индол взаимодействует с альдегидом, содержащимся в соответствующем реагенте, с образованием красного окрашивания в спиртовом слое. Спиртовой слой экстрагирует и концентрирует красный окрашенный комплекс.

Методика проведения анализа

1. Исследуемую пробу обогащают в основе модифицированного соево-желчного бульона Modified Soyabean Bile Broth Base (M12861) при инкубации при 42 °C в течение 18–24 ч.
2. E. coli O157:H7 выделяют на основе агара МакКонки с сорбитолом MacConkey Sorbitol Agar Base (M2981).
3. После инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч колонии бледного цвета регистрируют как предположительные E. coli O157:H7.
4. Предположительные колонии исследуют на продукцию индола с использованием триптофановой среды Tryptophan Medium (M1339), представленной раствором LQ085.

Указания по применению

1. Промаркируйте флакон с готовым к применению триптофановым раствором LQ085.
2. Внесите исследуемую пробу.
3. Инкубируйте при установленной температуре в течение установленного времени.
4. Выполните оценку продукции индола с применением реагента Ковача или реагента Эрлиха.

Контроль качества

Внешний вид

Стерильный прозрачный триптофановый раствор во флаконах.

Цвет

Среда жёлтого цвета.

Количество среды

5 мл среды во флаконе.

Реакция

7,30–7,70.

Испытание на стерильность

Соответствует критериям выпуска.

Культуральная реакция

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Технические характеристики

• Тип продукта: готовый к применению триптофановый раствор
• Назначение изделия: среда
• Объём среды во флаконе: 5 мл
• Фасовка: 25 флаконов по 5 мл
• Цвет: жёлтый
• Внешний вид: стерильный прозрачный раствор
• Реакция: 7,30–7,70
• Конечный pH при 25 °C: 7,5 ± 0,2
• Стерильность: соответствует критериям выпуска

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения по данным производителя: 2–8 °C
• Срок хранения: использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке
• Дополнительное указание при получении в данных каталога: хранить при 15–25 °C