HiMedia LQ080V-50X5ML Среда Cooked M (50×5 мл)

Готовая жидкая питательная микробиологическая среда HiMedia LQ080V-50X5ML Среда Cooked M (50×5 мл) производства HiMedia для культивирования аэробных и анаэробных микроорганизмов, включая патогенные клостридии. Среда применяется для поддержания стоковых культур и поставляется во флаконах по 5 мл с хранением при 2–8 °C.

Назначение

Среда рекомендована для культивирования аэробов и анаэробов, особенно патогенных клостридий, а также для поддержания стоковых культур.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия рабочим характеристикам.

Пептон HMH B эквивалентен сухим веществам говяжьего сердца.

Методика применения

1. Промаркируйте готовый к применению флакон LQ080V.
2. Отвинтите крышку и внесите исследуемую пробу.
3. Инкубируйте при заданных температуре и времени.

Принцип действия и интерпретация

Clostridium — крупный род грамположительных спорообразующих анаэробов. Представители рода обычно присутствуют в почве; некоторые виды вызывают заболевания человека и животных, другие связаны с порчей пищевых продуктов.

Клостридии могут быть сахаролитическими микроорганизмами: разлагают сахара с образованием масляной и уксусной кислот, а также спиртов. В среде Робертсона мясо приобретает красноватую окраску и образуется газ. Другие протеолитические виды расщепляют аминокислоты.

Мезофильные спорообразующие анаэробы имеют большое значение при порче пищевых продуктов с низкой кислотностью, упакованных в герметичные контейнеры, поскольку обладают высокой термоустойчивостью, способны расти в отсутствие кислорода и имеют диапазон роста, охватывающий температуру обычного хранения консервированных и других обработанных пищевых продуктов, включая охлаждаемое хранение мясных продуктов.

Среда Cooked M первоначально разработана Робертсоном для культивирования некоторых анаэробов, выделенных из ран. Современная рецептура представляет собой модификацию, также называемую средой M с измельчённым мясом; она поддерживает рост многих строгих спорообразующих и неспорообразующих анаэробов.

Среда обладает следующими функциональными свойствами:

• инициирует рост бактерий из очень малых посевных доз;
• поддерживает жизнеспособность культур в течение длительного периода;
• обеспечивает выживание смешанных бактериальных культур без вытеснения медленно растущих микроорганизмов;
• не приводит к быстрому разрушению инокулированных микроорганизмов продуктами роста;
• применяется для хранения аэробных и анаэробных микроорганизмов;
• используется для культивирования и поддержания клостридий;
• применяется для определения протеолитической активности анаэробов.

HMH-пептон B обеспечивает среду азотистыми и углеродсодержащими соединениями, аминокислотами с длинной цепью и другими питательными веществами. Сульфгидрильные группы, придающие среде восстановительные свойства, более доступны в денатурированном белке, поэтому используется соответствующая белковая основа. Добавление декстрозы обеспечивает быстрый и интенсивный рост анаэробных бактерий за короткое время и способствует более быстрой идентификации клинически и санитарно значимых анаэробов.

Рост в среде проявляется помутнением или образованием пузырьков газа у некоторых микроорганизмов. Почернение и разрушение частиц мяса указывают на протеолиз. Аэробы растут в верхней части среды, тогда как более выраженные анаэробы — на большей глубине среды.

Методика выделения клостридий из пищевых продуктов

1. Приготовьте 10 %-ную суспензию пищевого продукта в разбавителе «Пептонная вода» LQ089 с использованием гомогенизатора типа стомачера.
2. Приготовьте последовательные разведения.
3. Выполните посев исходной суспензии и разведений на основу среды Уиллиса и Хоббса M1375 и на основу агара с триптозой, сульфитом и циклосерином (T.C.S.) M837.
4. Поместите диск с метронидазолом на инокулированную поверхность.
5. Инкубируйте посевы в анаэробных условиях при 37 °C в течение ночи.
6. Для количественного определения клостридий залейте чашки с разведениями средой «Агар для перфрингенс» MP579.
7. Инкубируйте дубликаты чашек в аэробных и анаэробных условиях, чтобы отличить клостридии от других микроорганизмов.
8. Внесите часть суспензии в две пробирки со средой Cooked M.
9. Одну пробирку прогрейте в течение 10 мин при 80 °C.
10. Инкубируйте обе пробирки в описанных выше условиях.
11. Рост клостридий определяйте по помутнению среды или образованию пузырьков газа.
12. Среду можно дополнительно исследовать на наличие Clostridium.

Типы образцов

• Клинические образцы: фекалии, отделяемое или экссудат из раны, мазки с кожи и тканей вокруг раны.
• Пищевые и молочные образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с пробами согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Изделие предназначено для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера изучите маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• При необходимости обращайтесь к требованиям безопасности, приведённым в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

• Отдельные микроорганизмы различаются по требованиям к условиям роста и могут демонстрировать на среде различные варианты роста.
• Каждая серия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA).
• Для конкретных микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа, рекомендуется валидировать среду с учётом специфических требований пользователя.
• Для подтверждения результата необходимо выполнить дальнейшее выделение культуры и биохимические тесты.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованном температурном диапазоне.

Контроль качества

• Внешний вид: стерильная прозрачная среда Cooked M в стеклянных флаконах.
• Цвет: над нерастворимыми гранулами находится надосадочная жидкость янтарного цвета.
• Количество среды: 5 мл во флаконе.
• pH: 7,00–7,40.
• Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

• Температура хранения: 2–8 °C.
• Срок применения: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики изделия сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов путём автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.