HiMedia LQ080V-25X5ML Среда Cooked M (25×5 мл)

Готовая питательная среда HiMedia LQ080V-25X5ML Среда Cooked M (25×5 мл) — стерильная среда объёмом 5 мл для культивирования аэробных и анаэробных микроорганизмов. Среда предназначена прежде всего для выращивания патогенных клостридий, поддержания запасных культур и определения протеолитической активности анаэробов.

Назначение

Среда рекомендована для культивирования аэробных и анаэробных микроорганизмов, особенно патогенных клостридий, а также для поддержания запасных культур.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия установленным рабочим параметрам.

Пептон HMH B эквивалентен сухим веществам говяжьего сердца.

Методика применения

1. Промаркируйте готовый к использованию флакон LQ080V.
2. Отвинтите крышку.
3. Внесите исследуемую пробу.
4. Инкубируйте при заданных температуре и времени.

Принцип действия и интерпретация

Clostridium — крупный род грамположительных спорообразующих анаэробов. Клостридии обычно присутствуют в почве; некоторые виды вызывают заболевания человека и животных, другие связаны с порчей пищевых продуктов.

Клостридии могут быть сахаролитическими: они разлагают сахара с образованием масляной и уксусной кислот, а также спиртов. В среде Робертсона мясо приобретает красноватую окраску, при этом образуется газ. Другие протеолитические виды используют аминокислоты.

Мезофильные спорообразующие анаэробы имеют первостепенное значение при порче продуктов с низкой кислотностью, упакованных в герметичные контейнеры. Это связано с высокой термостойкостью таких микроорганизмов, способностью расти в отсутствие кислорода и диапазоном роста, охватывающим температуры обычного хранения консервированных и других переработанных продуктов, включая охлаждённое хранение мясных продуктов.

Среда Cooked M первоначально разработана Робертсоном для культивирования некоторых анаэробов, выделенных из ран. Представленная формула является модификацией, также называемой измельчённой средой M; формула поддерживает рост многих строгих анаэробов, образующих и не образующих споры.

Среда способна инициировать рост бактерий из очень малых посевных доз и сохранять жизнеспособность культур в течение длительного времени. Смешанные культуры бактерий сохраняются в среде Cooked M без вытеснения медленно растущих микроорганизмов. Продукты роста не вызывают быстрого разрушения внесённых микроорганизмов, поэтому среда подходит для хранения аэробных и анаэробных культур.

Среду применяют для культивирования и поддержания клостридий, а также для определения протеолитической активности анаэробов.

Пептон HMH B содержит азотистые и углеродистые соединения, аминокислоты с длинной цепью и другие питательные вещества. Сульфгидрильные группы, обеспечивающие восстановительные свойства, становятся более доступными в денатурированном белке, поэтому используется такая форма питательной основы. Добавление декстрозы обеспечивает быстрый и интенсивный рост анаэробных бактерий за короткое время и ускоряет идентификацию значимых анаэробов.

Рост в среде проявляется помутнением или образованием пузырьков газа у некоторых микроорганизмов. Почернение и разрушение частиц мяса указывают на протеолиз. Аэробные микроорганизмы растут в верхней части среды, тогда как более строгие анаэробы развиваются глубже.

Методика выделения клостридий из пищевых продуктов

1. С помощью гомогенизатора подготовьте 10%-ную суспензию пищевого продукта в разбавителе — пептонной воде LQ089.
2. Приготовьте разведения.
3. Выполните посев исходной суспензии и её разведений на основу среды Willis and Hobbs и основу агара триптозо-сульфит-циклосеринового (T.C.S.) агара M1375.
4. Поместите диск с метронидазолом на посев.
5. Инкубируйте посевы анаэробно при 37 °C в течение ночи.
6. Для подсчёта клостридий залейте чашки с разведениями агаром для чашечного подсчёта Clostridium perfringens MP579.
7. Инкубируйте дублирующие чашки аэробно и анаэробно, чтобы различить клостридии и другие микроорганизмы.
8. Внесите часть суспензии в две пробирки со средой Cooked M.
9. Одну пробирку прогрейте в течение 10 мин при 80 °C.
10. Инкубируйте обе пробирки в указанных выше условиях.
11. Рост клостридий определяйте по помутнению среды или образованию пузырьков газа.
12. Среду можно дополнительно исследовать на наличие представителей рода Clostridium.

Типы исследуемых образцов

• Клинические образцы: фекалии, отделяемое или экссудат из ран, мазки с кожи и тканей вокруг раны.
• Пищевые и молочные образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы сбора и подготовки проб в соответствии с установленными руководствами.

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с пробами в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Изделие предназначено для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

• Разные микроорганизмы имеют неодинаковые требования к условиям роста и могут демонстрировать различающиеся характеристики роста на среде.
• Каждая серия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). Для любого конкретного микроорганизма, не указанного в COA, пользователю рекомендуется валидировать среду с учётом специфических требований применения.
• Для подтверждения результата необходимо выполнить дальнейшее выделение культуры и биохимические тесты.

Эксплуатационные характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных условиях.

Контроль качества

Внешний вид

Стерильная прозрачная среда Cooked M во флаконах из стекла.

Цвет

Среда имеет янтарную окраску; над нерастворимыми гранулами находится окрашенный супернатант.

Объём среды

5 мл среды во флаконе.

pH

7,00–7,40.

Контроль стерильности

Соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

• Температура хранения: 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов путём автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.