HiMedia LQ080V-25X5ML Среда Cooked M (25×5 мл)

Питательная среда HiMedia LQ080V-25X5ML Cooked M (25×5 мл) для культивирования аэробных и анаэробных микроорганизмов. Рекомендуется для выделения патогенных клостридий (Clostridia), а также для поддержания стоковых культур.

Область применения

Среда используется для культивирования и поддержания жизнеспособности строгих анаэробов, в том числе спорообразующих, и определения протеолитической активности анаэробов. Применяется для анализа следующих типов образцов:

• клинические материалы: фекалии, экссудат/выделения из ран, мазки с кожи и тканей вокруг раны;
• пищевые и молочные продукты.

Среда рекомендована FDA для подсчета и идентификации Clostridium perfringens в пищевых продуктах.

Принцип работы и интерпретация

Среда Cooked M (модификация среды Робертсона) обеспечивает рост многих спорообразующих и неспорообразующих строгих анаэробов. Она способна инициировать рост бактерий даже при очень малых посевных дозах и поддерживать жизнеспособность культур в течение длительного периода. В данной среде смешанные культуры бактерий выживают без вытеснения медленнорастущих организмов.

Механизм действия

• Питательные вещества: пептон HMH B обеспечивает азот- и углеродсодержащие соединения, длинноцепочечные аминокислоты и другие нутриенты.
• Восстанавливающий эффект: сульфгидрильные группы, обеспечивающие восстановительный эффект, более доступны в денатурированном белке.
• Стимуляция роста: добавление декстрозы способствует быстрому и обильному росту анаэробных бактерий, что ускоряет идентификацию важных анаэробов.

Интерпретация результатов

• Рост: характеризуется помутнением среды или образованием пузырьков газа.
• Протеолиз: почернение и распад частиц мяса указывают на протеолитическую активность.
• Локализация: аэробы растут в верхней части среды, в то время как анаэробные виды развиваются в более глубоких слоях.

Методика проведения анализа

Подготовка и посев

1. Промаркируйте готовую к использованию бутылку LQ080V.
2. Открутите крышку и внесите образец (инокулят).
3. Инкубируйте при заданной температуре и в течение указанного времени.

Изоляция Clostridium из пищевых продуктов

1. Подготовьте 10 % суспензию продукта в разбавителе — пептонной воде LQ089 с помощью гомогенизатора (stomacher).
2. Выполните серию разведений.
3. Высейте суспензии и разведения на среды:
   • Базовая среда Уиллиса и Хоббса (Willis and Hobbs Medium Base M1375);
   • Базовый агар Tryptose Sulphite Cycloserine (T.C.S. M837).
4. Поместите диск с метронидазолом на инокулят.
5. Инкубируйте в анаэробных условиях при 37 °C в течение ночи.
6. Для подсчета клостридий перенесите разведения на агар Перфрингенса (Perfringens Agar Plate MP579). Инкубируйте дубликаты пластин в аэробных и анаэробных условиях для дифференциации клостридий от других организмов.
7. Добавьте часть суспензии в две пробирки со средой Cooked M. Одну пробирку прогрейте 10 мин при 80 °C, затем инкубируйте как указано выше. Рост клостридий визуализируется по помутнению или пузырькам газа.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности. Эквивалентно Beef heart (твердые формы).

Контроль качества

• Внешний вид: стерильная прозрачная среда Cooked M в стеклянных бутылках.
• Цвет: янтарный супернатант над нерастворимыми гранулами.
• Объем среды: 5 мл в бутылке.
• pH: 7,00–7,40.
• Стерильность: проходит критерии контроля при выпуске.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 часов.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.
• Утилизация: загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с лабораторными протоколами работы с инфекционными материалами.

Ограничения и предупреждения

• Индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов развития на среде.
• Рекомендуется проводить валидацию среды для конкретных микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа (COA).
• Для окончательного подтверждения необходимо проведение дальнейшей изоляции и биохимических тестов.
• Только для профессионального использования в диагностике in vitro. При работе использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).