Готовая жидкая питательная среда HiMedia LQ080C-5X100ML Среда Cooked M (5×100 мл) предназначена для культивирования аэробных и анаэробных микроорганизмов, включая патогенные клостридии. Среда применяется для поддержания запасных культур и определения протеолитической активности анаэробов; хранение — при температуре 2–8 °C.

Назначение

Среда предназначена для:

• культивирования аэробных и анаэробных микроорганизмов;
• культивирования патогенных клостридий;
• поддержания запасных культур;
• культивирования и поддержания культур клостридий;
• определения протеолитической активности анаэробов.

Состав

Состав на 1 л:

• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.
• Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик.

• Эквивалент мясного сердца, сухие вещества.

Инструкция по применению

1. Промаркируйте флакон с готовой к применению средой LQ080C.
2. Отвинтите крышку.
3. Внесите исследуемый образец.
4. Инкубируйте при заданных температуре и времени.

Принцип действия и интерпретация

Clostridium — крупный род грамположительных спорообразующих анаэробов. Представители рода обычно присутствуют в почве; некоторые виды вызывают заболевания человека и животных, другие связаны с порчей пищевых продуктов.

Клостридии могут обладать сахаролитическими свойствами, разлагая сахара с образованием масляной и уксусной кислот, а также спиртов. В среде Робертсона мясо приобретает красноватый цвет, происходит образование газа. Другие протеолитические виды расщепляют аминокислоты.

Мезофильные спорообразующие анаэробы имеют большое значение при порче слабокислых продуктов, расфасованных в герметичные ёмкости. Это связано с высокой термоустойчивостью таких микроорганизмов, способностью расти в отсутствие кислорода и диапазоном роста, охватывающим температуру обычного хранения консервированных и других переработанных продуктов, включая охлаждённое хранение солёного мяса.

Среда Cooked M первоначально разработана Робертсоном для культивирования некоторых анаэробов, выделенных из ран. Современная рецептура представляет собой модификацию, также называемую измельчённой средой M, которая поддерживает рост многих строгих анаэробов — спорообразующих и неспорообразующих.

Среда способна инициировать рост бактерий из очень малого количества посевного материала и сохранять жизнеспособность культур в течение длительного периода. Смешанные бактериальные культуры сохраняются в среде Cooked M без вытеснения медленно растущих микроорганизмов. Продукты роста не приводят к быстрому уничтожению внесённых микроорганизмов, поэтому среда применяется для хранения аэробных и анаэробных культур.

Рост в среде определяется по помутнению или образованию пузырьков газа некоторыми микроорганизмами. Почернение и разрушение частиц мяса указывают на протеолиз. Аэробные микроорганизмы растут в верхней части среды, тогда как более выраженные анаэробы растут на большей глубине.

Методика выделения клостридий из пищевых продуктов

1. Приготовьте 10 %-ную суспензию пищевого продукта в разбавителе — пептонной воде LQ089 — с использованием гомогенизатора.
2. Приготовьте ряд разведений.
3. Выполните посев исходной суспензии и разведений на основу среды Виллиса и Хоббса, а также на основу агара с триптозой, сульфитом и циклосерином (T.C.S.), M837.
4. Поместите диск с метронидазолом на посевной материал.
5. Инкубируйте посевы в анаэробных условиях при 37 °C в течение ночи.
6. Для подсчёта клостридий залейте чашки с разведениями агаром для чашечного подсчёта Clostridium perfringens MP579.
7. Инкубируйте дублированные чашки в аэробных и анаэробных условиях, чтобы различить клостридии и другие микроорганизмы.
8. Внесите часть суспензии в две пробирки со средой Cooked M.
9. Одну пробирку прогрейте в течение 10 мин при 80 °C.
10. Инкубируйте обе пробирки в условиях, указанных выше.
11. Рост клостридий определяйте по помутнению среды или образованию пузырьков газа.
12. Среду можно дополнительно исследовать на наличие Clostridium.

Типы исследуемых образцов

• Клинические образцы:
  • фекалии;
  • отделяемое или экссудат из раны;
  • мазки с кожи и тканей вокруг раны.
• Пищевые продукты и молочные образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с исследуемым материалом согласно утверждённым руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Изделие предназначено для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с утверждёнными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

• Разные микроорганизмы предъявляют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковые характеристики роста на данной среде.
• Каждая серия среды проверена на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа. Для любого конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, пользователю рекомендуется провести валидацию среды с учётом индивидуальных требований.
• Для подтверждения результата необходимо выполнить дальнейшее выделение культуры и биохимические тесты.

Рабочие характеристики

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных температурных условиях.

Контроль качества

Внешний вид

Стерильная прозрачная среда Cooked M во флаконах из стекла.

Цвет

Супернатант янтарного цвета над нерастворимыми гранулами.

Количество среды

100 мл среды во флаконе.

pH

7,00–7,40.

Проверка стерильности

Соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

• Температура хранения: 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики продукта обеспечиваются при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов с помощью автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методами.