HiMedia LQ080C-5X100ML Среда Cooked M (5×100 мл)

Питательная среда HiMedia LQ080C-5X100ML Cooked M (5×100 мл) предназначена для культивирования аэробных и анаэробных микроорганизмов, в частности патогенных видов Clostridia. Среда используется для выделения бактерий из клинических и пищевых образцов, а также для поддержания стоковых культур.

Область применения

Среда рекомендуется для:

• культивирования строгих анаэробов (как спорообразующих, так и неспорообразующих);
• выделения и идентификации Clostridium perfringens из пищевых продуктов (рекомендовано FDA);
• определения протеолитической активности анаэробов;
• длительного хранения аэробных и анаэробных организмов благодаря способности поддерживать жизнеспособность культур без вытеснения медленно растущих видов.

Типы исследуемых образцов

• Клинические образцы: фекалии, экссудат/выделения из ран, мазки с кожи и тканей вокруг раны.
• Образцы пищевых продуктов и молочной продукции.

Принцип измерения и интерпретация

Среда Cooked M (модификация среды Робертсона или Chopped M Medium) обеспечивает рост бактерий даже при очень малых посевных дозах.

Механизм работы и признаки роста:

• Питательная основа: Пептон HMH B обеспечивает необходимые азотистые и углеродные соединения, длинноцепочечные аминокислоты и другие нутриенты.
• Восстанавливающий эффект: Денатурированные белки содержат доступные сульфгидрильные группы, создающие восстановительную среду, необходимую для анаэробов.
• Стимуляция роста: Добавление декстрозы способствует быстрому и обильному росту анаэробных бактерий, что ускоряет идентификацию.
• Интерпретация результатов:
  • Рост характеризуется помутнением среды или образованием пузырьков газа.
  • Почернение и распад частиц мяса свидетельствуют о протеолизе.
  • Аэробы растут в верхней части среды, в то время как анаэробные виды развиваются в более глубоких слоях.

Методика проведения анализа

1. Подготовка: Маркируйте флакон с готовой средой LQ080C.
2. Инокуляция: Открутите крышку и внесите образец.
3. Инкубация: Инкубируйте при заданной температуре и в течение указанного времени.

Особенности выделения Clostridium из пищевых продуктов:

1. Подготовьте 10 % суспензию продукта в разбавителе — пептонной воде LQ089 с помощью гомогенизатора (stomacher).
2. Выполните разведения.
3. Высейте суспензии и разведения на среды: Willis and Hobbs Medium Base (M1375) или Tryptose Sulphite Cycloserine (T.C.S.) Agar Base (M837).
4. Поместите на инокулят диск с метронидазолом.
5. Инкубируйте в анаэробных условиях при 37 °C в течение ночи.
6. Для подсчета клостридий перенесите культуры с чашек с разведениями на агар Перфингенса (Perfringens Agar Plate, MP579).
7. Инкубируйте дубликаты чашек аэробно и анаэробно для дифференциации клостридий от других организмов.
8. Добавьте часть суспензии в две пробирки со средой Cooked M. Одну пробирку прогрейте 10 мин при 80 °C, затем инкубируйте как указано выше. Рост клостридий визуализируется как помутнение или газовые пузырьки.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,2 ± 0,2
• Эквивалент: Beef heart, solids (сердечный мясной настой, твердый)

Контроль качества

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 часов.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: 2–8 °C.
• Срок годности: Указан на этикетке.
• Требования к безопасности: Только для профессионального использования (In Vitro). Использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).
• Утилизация: Загрязненные материалы и остатки среды должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией или подвергнуты инсинерации.

Ограничения применения

• Различные организмы могут иметь разные требования к росту и демонстрировать вариативные паттерны развития на данной среде.
• Рекомендуется проводить валидацию среды для конкретных микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа (COA), исходя из уникальных требований пользователя.
• Для окончательного подтверждения необходимо проведение дополнительных изоляционных и биохимических тестов.