Готовая жидкая питательная среда HiMedia LQ080-50X10ML Среда Cooked M (50×10 мл) для культивирования аэробных и анаэробных микроорганизмов, включая патогенные клостридии, с объёмом 10 мл. Среда применяется для поддержания посевных культур и определения протеолитической активности анаэробов; хранение и транспортировка — при 2–8 °C.

Назначение

Среда Cooked M предназначена для:

• культивирования аэробных и анаэробных микроорганизмов;
• культивирования патогенных клостридий;
• поддержания маточных и посевных культур;
• хранения аэробных и анаэробных микроорганизмов;
• культивирования и поддержания культур рода Clostridium;
• определения протеолитической активности анаэробов;
• количественного определения и идентификации Clostridium perfringens в пищевых продуктах;
• работы с клиническими, пищевыми и молочными образцами.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам эффективности.

Эквивалент мясного сердца, сухой остаток.

Принцип действия и интерпретация

Clostridium — крупный род грамположительных спорообразующих анаэробов. Представители рода обычно присутствуют в почве; некоторые виды вызывают заболевания человека и животных, другие связаны с порчей пищевых продуктов.

Клостридии могут быть сахаролитическими микроорганизмами: разлагают сахара с образованием масляной и уксусной кислот, а также спиртов. В мясной части среды Робертсона происходит покраснение и образуется газ. Другие протеолитические виды разрушают аминокислоты.

Мезофильные спорообразующие анаэробы имеют особое значение при порче пищевых продуктов с низкой кислотностью, упакованных в герметичные контейнеры. Это связано с высокой термоустойчивостью таких микроорганизмов, способностью расти в отсутствие кислорода и диапазоном роста, охватывающим температуру обычного хранения консервированных и других переработанных продуктов, включая охлаждённое хранение мясных продуктов.

Среда Cooked M первоначально разработана Robertson для культивирования некоторых анаэробов, выделенных из ран. Современная рецептура представляет собой модификацию, также называемую средой Chopped M, и поддерживает рост многих строгих анаэробов, образующих и не образующих споры.

Среда:

• обеспечивает начало роста бактерий даже при очень малой посевной дозе;
• сохраняет жизнеспособность культур в течение длительного периода;
• позволяет смешанным бактериальным культурам сохраняться без вытеснения медленно растущих микроорганизмов;
• не приводит к быстрому разрушению инокулированных микроорганизмов продуктами роста;
• подходит для хранения аэробных и анаэробных микроорганизмов.

HMH-пептон B обеспечивает среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью и другими питательными веществами. Сульфгидрильные группы, придающие среде восстановительные свойства, становятся более доступными в денатурированном белке. Добавление декстрозы обеспечивает быстрый и интенсивный рост анаэробных бактерий за короткое время и ускоряет идентификацию значимых анаэробов.

Рост в среде проявляется помутнением или образованием пузырьков газа у некоторых микроорганизмов. Почернение и разрушение частиц мяса указывают на протеолиз. Аэробы растут в верхней части среды, тогда как более строгие анаэробы развиваются глубже в среде.

Методика культивирования клостридий из пищевых продуктов

1. С использованием гомогенизатора подготовьте 10%-ную суспензию пищевого продукта в разбавителе — пептонной воде LQ089.
2. Приготовьте разведения исходной суспензии.
3. Выполните посев исходной суспензии и разведений на основу среды Виллиса и Хоббса M1375 и на основу триптозо-сульфит-циклосеринового агара (T.C.S.) M837.
4. Поместите диск метронидазола на инокулят.
5. Инкубируйте посевы анаэробно при 37 °C в течение ночи.
6. Для подсчёта клостридий залейте чашки с разведениями агаром для чашечного подсчёта Clostridium perfringens MP579.
7. Инкубируйте дублированные чашки аэробно и анаэробно для различения клостридий и других микроорганизмов.
8. Внесите часть суспензии в две пробирки со средой Cooked M.
9. Одну пробирку прогрейте в течение 10 мин при 80 °C и инкубируйте в тех же условиях, что и вторую пробирку.
10. Рост клостридий определяйте по помутнению среды или образованию пузырьков газа.
11. При необходимости дополнительно исследуйте среду на наличие Clostridium.

Методика применения

1. Промаркируйте готовый к применению флакон LQ080.
2. Отвинтите крышку.
3. Инокулируйте образец.
4. Инкубируйте при заданных температуре и времени.

Типы образцов

• Клинические образцы:
  • фекалии;
  • отделяемое или экссудат из раны;
  • мазки с кожи и тканей вокруг раны.
• Пищевые и молочные образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Изделие предназначено для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковую картину роста на среде.
2. Каждая серия среды проверена на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). При работе с конкретным микроорганизмом, не указанным в COA, пользователю рекомендуется валидировать среду с учётом специфических требований метода.
3. Для подтверждения необходимо выполнить дальнейшее выделение культуры и биохимические исследования.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованном температурном диапазоне.

Контроль качества

Внешний вид

Стерильная прозрачная среда Cooked M в стеклянных флаконах.

Цвет

Супернатант янтарного цвета над нерастворимыми гранулами.

Объём среды

10 мл среды во флаконе.

pH

7,00–7,40.

Контроль стерильности

Соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения: 2–8 °C.
• Срок применения: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики изделия обеспечиваются при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов среды посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методами.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: питательная среда
• Форма выпуска: готовая к применению жидкая среда
• Объём: 10 мл
• Материал флакона: стекло
• Конечный pH состава при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• Контрольный диапазон pH: 7,00–7,40
• Состояние среды: стерильная, прозрачная
• Цвет супернатанта: янтарный
• Нерастворимый компонент: гранулы
• Температура хранения: 2–8 °C
• Культивируемые микроорганизмы: аэробы, анаэробы, спорообразующие и неспорообразующие строгие анаэробы, клостридии
• Условия контроля культуральных характеристик: 35–37 °C, 40–48 ч
• Условия культивирования клостридий из пищевых продуктов: анаэробная инкубация при 37 °C в течение ночи
• Дополнительная термическая обработка при исследовании пищевых образцов: 80 °C, 10 мин

Сравнительный технический контекст

В отличие от стандартных тв