Готовая питательная среда HiMedia LQ080-25X10ML Среда Cooked M (25×10 мл) предназначена для культивирования аэробных и анаэробных микроорганизмов, включая патогенные клостридии. Среда применяется для поддержания исходных культур и хранения аэробных и анаэробных микроорганизмов; хранение осуществляется при 2–8 °C.

Назначение

Среда Cooked M рекомендована для культивирования аэробных и анаэробных микроорганизмов, особенно патогенных клостридий, а также для поддержания исходных культур.

Тип образцов:

• клинические образцы: фекалии, отделяемое и экссудат из ран, мазки кожи и тканей вокруг раны;
• пищевые и молочные образцы.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Эквивалент сухих веществ говяжьего сердца.

Инструкция по применению

1. Промаркируйте готовый к применению флакон LQ080.
2. Отвинтите крышку и внесите исследуемый образец.
3. Инкубируйте при заданных температуре и продолжительности.

Принцип действия и интерпретация результатов

Clostridium — крупный род грамположительных спорообразующих анаэробов. Клостридии обычно присутствуют в почве; некоторые виды вызывают заболевания человека и животных, другие связаны с порчей пищевых продуктов.

Клостридии могут быть сахаролитическими микроорганизмами, разлагающими сахара с образованием масляной и уксусной кислот, а также спиртов. В среде Робертсона мясо приобретает красноватую окраску, при этом образуется газ. Другие протеолитические виды разрушают аминокислоты.

Мезофильные спорообразующие анаэробы имеют первостепенное значение при порче пищевых продуктов с низкой кислотностью, упакованных в герметичные контейнеры. Это связано с высокой термоустойчивостью таких микроорганизмов, способностью расти в отсутствие кислорода и диапазоном роста, охватывающим температуру обычного хранения консервированных и других обработанных пищевых продуктов, включая охлаждённое хранение мясных продуктов.

Среда Cooked M первоначально разработана Robertson (1) для культивирования некоторых анаэробов, выделенных из ран. Современная формула является модификацией, также называемой средой Chopped M (2), и поддерживает рост многих строгих анаэробов — как спорообразующих, так и неспорообразующих.

Среда способна инициировать рост бактерий из очень малых посевных доз и сохранять жизнеспособность культур в течение длительного периода. Смешанные бактериальные культуры выживают в среде Cooked M, не вытесняя медленно растущие организмы. Продукты роста не вызывают быстрого разрушения инокулированных микроорганизмов, поэтому среда подходит для хранения аэробных и анаэробных организмов.

Среда используется для культивирования и поддержания клостридий, а также для определения протеолитической активности анаэробов (2, 3). Среда рекомендована для количественного определения и идентификации Clostridium perfringens в пищевых продуктах.

Пептон HMH B содержит азотистые и углеродистые соединения, аминокислоты с длинной цепью и другие питательные вещества. Сульфгидрильные группы, обеспечивающие восстановительный эффект, более доступны в денатурированном белке, поэтому в составе используется такой пептон. Добавление декстрозы обеспечивает быстрый и обильный рост анаэробных бактерий за короткое время и ускоряет идентификацию значимых анаэробов.

Рост в среде проявляется помутнением или образованием пузырьков газа у некоторых микроорганизмов. Почернение и распад частиц мяса указывают на протеолиз. Аэробы растут в верхней части среды, тогда как более анаэробные виды развиваются на большей глубине.

Выделение клостридий из пищевых продуктов

1. С помощью гомогенизатора приготовьте 10%-ную суспензию пищевого продукта в разбавителе — пептонной воде LQ089.
2. Приготовьте последовательные разведения.
3. Засейте исходную суспензию и разведения на основу агара Willis и Hobbs (M1375) и основу триптозо-сульфит-циклосеринового агара (T.C.S.) (M837).
4. Поместите диск метронидазола на посев.
5. Инкубируйте посевы анаэробно при 37 °C в течение ночи.
6. Для подсчёта клостридий используйте чашки с агаром для Perfringens (MP579), засеянные разведениями методом заливки.
7. Инкубируйте дублирующие чашки в аэробных и анаэробных условиях, чтобы различить клостридии и другие микроорганизмы.
8. Внесите часть суспензии в две пробирки со средой Cooked M.
9. Одну пробирку прогрейте в течение 10 мин при 80 °C и инкубируйте в тех же условиях, что указаны выше.
10. Рост Clostridia определяйте по помутнению среды или образованию пузырьков газа.
11. Среду можно дополнительно исследовать на наличие Clostridium (5).

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно установленным руководствам (6, 7).

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам (8, 9).

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Среда предназначена для диагностики вне организма.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила микробиологической безопасности при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• При необходимости обращайтесь к индивидуальным паспортам безопасности.
• Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием.
• При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры.
• Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками (8, 9).

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: питательная среда
• Форма выпуска: готовая к применению среда во флаконах
• Объём среды во флаконе: 10 мл
• Количество во флаконе-коробке: 25 × 10 мл
• Материал флакона: стекло
• Внешний вид: стерильная прозрачная среда Cooked M в стеклянных флаконах
• Цвет: среда янтарного цвета; над нерастворимыми гранулами образуется надосадочная жидкость
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40
• Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска
• Температура хранения: 2–8 °C
• Срок годности: использовать до даты окончания срока годности, указанной на маркировке

Контроль качества

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.

| Организм | Рост в