HiMedia LQ080-25X10ML Среда Cooked M (25×10 мл)

Питательная среда HiMedia LQ080-25X10ML Cooked M (25×10 мл) предназначена для культивирования аэробных и анаэробных микроорганизмов, в частности патогенных видов Clostridia. Среда используется для поддержания стоковых культур и определения протеолитической активности анаэробов.

Принцип измерения и интерпретация

Среда Cooked M (модификация среды Робертсона) разработана для выращивания строгих анаэробов, как спорообразующих, так и неспорообразующих. Она способна инициировать рост бактерий даже при очень малых посевных дозах и поддерживать жизнеспособность культур в течение длительного периода.

Основные механизмы и признаки роста:

• Сахаролитическая активность: при разложении сахаров с образованием масляной и уксусной кислот, а также спиртов, частицы мяса в среде окрашиваются в красный цвет и выделяется газ.
• Протеолитическая активность: протеолитические виды атакуют аминокислоты, что проявляется почернением и дезинтеграцией мясных частиц.
• Визуализация роста: рост характеризуется помутнением среды или образованием пузырьков газа.
• Зонирование: аэробные организмы растут в верхнем слое, в то время как строго анаэробные виды развиваются в более глубоких слоях среды.

Среда рекомендована FDA для подсчета и идентификации Clostridium perfringens в пищевых продуктах. Состав включает пептон HMH B, обеспечивающий азотистые и углеродные соединения, длинноцепочечные аминокислоты и другие питательные вещества. Сульфгидрильные группы, обеспечивающие восстановительный эффект, более доступны в денатурированном белке, что делает среду эффективной для анаэробов. Добавление декстрозы способствует быстрому и интенсивному росту.

Методика проведения анализа

Подготовка и посев

1. Промаркируйте флакон с готовой средой LQ080.
2. Открутите крышку и внесите образец (инокулят).
3. Инкубируйте при заданной температуре и в течение указанного времени.

Изоляция Clostridium из пищевых продуктов

1. Подготовьте 10 % суспензию продукта в разбавителе — пептонной воде (LQ089) с помощью гомогенизатора (stomacher).
2. Выполните серию разведений.
3. Высейте суспензии и разведения на среды: базис среды Уиллиса и Хоббса (M1375) и базис агара Tryptose Sulphite Cycloserine (T.C.S.) (M837).
4. Поместите на инокулят диск с метронидазолом.
5. Инкубируйте в анаэробных условиях при 37 °C в течение ночи.
6. Для подсчета клостридий перенесите разведения на чашки с агаром для перфрингенса (MP579).
7. Инкубируйте дубликаты чашек в аэробных и анаэробных условиях для дифференциации клостридий от других организмов.
8. Добавьте часть суспензии в две пробирки со средой Cooked M. Одну пробирку прогрейте 10 мин при 80 °C, затем инкубируйте как указано выше. Рост Clostridia визуализируется как помутнение или газовые пузырьки.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Контроль качества

• Внешний вид: стерильная прозрачная среда Cooked M в стеклянных флаконах.
• Цвет: янтарный супернатант над нерастворимыми гранулами.
• Объем среды: 10 мл во флаконе.
• pH: 7,00–7,40.
• Стерильность: соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.

Область применения

Среда используется для анализа следующих типов образцов:

• Клинические образцы: фекалии, экссудат/выделения из ран, мазки с кожи и тканей вокруг раны.
• Пищевые и молочные продукты.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.
• Утилизация: загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией или подвергнуты инсинерации.

Ограничения и предупреждения

• Среда предназначена для диагностики in vitro и профессионального использования.
• Индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативные паттерны на среде.
• Рекомендуется проводить валидацию среды для конкретных микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа (COA), исходя из уникальных требований пользователя.
• Для окончательного подтверждения необходимо проведение дальнейшей изоляции и биохимических тестов.
• При работе с клиническими образцами следует соблюдать стандартные меры предосторожности и правила микробиологической лабораторной практики.