Двухфазная система для гемокультур HiMedia LQ035A-10BT (10 фл.) с 20 мл твёрдой агаровой и 40 мл жидкой селективной среды HEA в одном стеклянном флаконе. Предназначена для качественного определения и быстрого выделения Salmonella из образцов крови взрослых, с инкубацией при 35–37 °C в течение 18–24 ч и возможностью получения изолированных колоний на поверхности агара.

Назначение

HiMedia LQ035A-10BT рекомендована для качественного тестирования, быстрого роста и подтверждения присутствия Salmonella. Система сочетает твёрдую фазу объёмом 20 мл и жидкую фазу объёмом 40 мл в одном флаконе.

Основное назначение — выделение сальмонелл из образцов крови взрослых при исследовании гемокультур. Оригинальная двухфазная система содержит селективный агар HEA — агар Хектона для энтеробактерий — и селективный бульон.

Система позволяет за одну процедуру внести исследуемый материал и выделить изолированные колонии на поверхности плотной фазы без применения стандартного набора рутинных микробиологических методов. Бульонная фаза содержит факторы роста, поддерживающие культивирование факультативных и облигатных анаэробов, способных вызывать бактериемию.

Подтверждение результатов культивирования и серотипирование выделенных культур выполняют реакцией агглютинации. Для детской гемокультуры предусмотрена аналогичная двухфазная система LQ035.

Принцип действия и интерпретация

Среда HEA разработана в 1967 году Кингом и Мецгером из Института Хектона для повышения частоты выделения Shigella и Salmonella по сравнению с другими средами, применявшимися в клинических лабораториях.

Дезоксихолат натрия заменён желчными солями в пониженной концентрации. Это позволяет поддерживать рост Shigella и Salmonella при одновременном подавлении нормальной кишечной микрофлоры. Повышенная концентрация пептонов компенсирует ингибирующее действие желчных солей.

Повышенное содержание углеводов и протеозного пептона уменьшает ингибирующее влияние желчных солей и индикаторов, обеспечивая хороший рост видов Salmonella и Shigella. В среду входят три углевода — лактоза, сахароза и салицин — для дифференциации кишечных патогенов.

Повышенная концентрация лактозы улучшает визуализацию кишечных патогенов и уменьшает вероятность ошибки, связанной с замедленной ферментацией лактозы. Салицин ферментируется многими колиформными бактериями, включая микроорганизмы, не ферментирующие лактозу и сахарозу.

Сочетание цитрата аммония железа и тиосульфата натрия позволяет обнаруживать образование сероводорода (H₂S). Признаком продукции H₂S служит формирование колоний с чёрным центром, что используется для дифференциации микроорганизмов.

Индикаторная система на основе кислого фуксина и бромтимолового синего характеризуется меньшей токсичностью по сравнению с другими средами для энтеробактерий и способствует восстановлению кишечных патогенов.

Для повышения селективности среды Хобеном было предложено добавление новобиоцина в концентрации 15 мг/л; новобиоцин подавляет виды Citrobacter и Proteus. Тейлор и Схельхаут отмечали пригодность среды для дифференциации патогенных кишечных микроорганизмов и улучшения роста Shigella.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

Методика применения

1. Промаркируйте готовый к применению флакон LQ035A.
2. Снимите верхнюю пломбу с крышки.
3. Продезинфицируйте открывшуюся часть резиновой пробки.
4. Немедленно перенесите образец во флакон с культуральной средой, проколов резиновую пробку иглой.
5. Для вентилирования используйте стерильную иглу для вентиляции LA038.
6. Установите флакон вертикально, предпочтительно в шкафу биологической безопасности.
7. Наложите спиртовую салфетку на резиновую пробку и введите через неё иглу для вентиляции с фильтром.
8. Ввод и извлечение иглы выполняйте по прямой линии.
9. Удалите иглу.
10. Перемешайте содержимое, осторожно перевернув флакон 2–3 раза.
11. Для анаэробных культур не выполняйте вентилирование флакона.
12. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Рекомендуемый объём крови для внесения во флакон LQ035A для взрослых: 8–10 мл.

Типы образцов

• Клинические образцы: моча, фекалии.
• Пищевые продукты.
• Вода.
• Образцы крови взрослых для исследования гемокультур.

Пробоотбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным лабораторным руководствам.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Для подтверждения видовой принадлежности требуется дальнейшая биохимическая идентификация.

Контроль качества

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, хранении при рекомендованной температуре и использовании до истечения срока годности.

Внешний вид и физико-химические характеристики

• Внешний вид: стерильный стеклянный флакон с комбинацией бульона и одной поверхностью, покрытой агаром.
• Цвет агаровой среды: зелёный.
• Цвет жидкой среды: зелёный.
• Количество твёрдой среды: 20 мл во флаконе из стекла.
• Количество жидкой среды: 40 мл во флаконе из стекла.
• Значение pH агаровой среды: 7,30–7,70.
• Значение pH жидкой среды: 7,30–7,70.
• Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения при получении: 2–8 °C.
• Условия хранения: хранить при температуре 2–8 °C.
• Срок использования: до даты, указанной на этикетке.
• Срок годности: 1 год с даты изготовления.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо утилизировать безопасным способом — автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материал, контактировавший с клиническим образцом, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методами.

Упаковка и регистрационные данные

• Полное название: система двухфазная для гемокультур HiMedia LQ035A-10BT (10 фл.).
• Модель: LQ035A-10BT.
• Производитель: HiMedia.
• Форма поставки: 10 стеклянных квадратных флаконов в картонной короб