Система двухфазная для гемокультур HiMedia LQ031A-10BT (10 фл.)

Система двухфазная для гемокультур HiMedia LQ031A-10BT (10 фл.) — готовая комбинированная питательная среда с 20 мл плотной и 40 мл жидкой фаз. Предназначена для качественного выявления, быстрого роста и последующего подтверждения Salmonella в крови взрослых; рекомендуемый объём исследуемой крови составляет 8–10 мл.

Назначение

HiMedia LQ031A-10BT предназначена для качественного тестирования, быстрого роста и подтверждения Salmonella в клинических образцах крови взрослых. Система объединяет плотную и жидкую питательные среды в одном стеклянном флаконе.

• Тип образца: клиническая кровь
• Назначение: качественное выявление Salmonella spp. в образцах крови
• Объём крови для анализа: 8–10 мл
• Возрастная группа: взрослые
• Состав системы: плотная и жидкая фазы в одном флаконе
• Форма выпуска: 10 стеклянных квадратных флаконов в картонной коробке
• Регистрационное удостоверение: ФСЗ 2009/03708
• ОКП: 9385

Принцип работы и интерпретация

Среда представляет собой модифицированную дезоксихолат-цитратную среду по прописи Лейфсона. Дезоксихолат-цитратный агар применяется для выделения и максимального восстановления кишечных патогенов групп Salmonella и Shigella.

Селективность среды позволяет использовать достаточно большие посевные дозы без риска чрезмерного подавления роста Salmonella и Shigella другой микрофлорой. По сравнению с дезоксихолатным агаром среда является умеренно более селективной для энтеропатогенов вследствие повышенной концентрации цитрата и дезоксихолатных солей.

• Дезоксихолат натрия при pH 7,3–7,5 ингибирует грамположительные бактерии.
• Цитратные соли в концентрации, предусмотренной рецептурой, подавляют грамположительные бактерии и большинство других представителей нормальной кишечной микрофлоры.
• Твёрдые компоненты HI являются источником углерода и азота; их используют, поскольку подавление колиформных бактерий выражено сильнее, чем при применении экстракта или простого пептона.
• Протеазо-пептон является источником углерода, азота, витаминов и минеральных веществ.
• Колиформные и грамположительные бактерии ингибируются или значительно подавляются дезоксихолатом натрия, цитратом натрия и цитратом аммонийного железа.
• Лактоза используется для дифференциации энтеробактерий: лактозоферментирующие бактерии образуют красные колонии, а неферментирующие лактозу — бесцветные.
• Колиформные бактерии при наличии формируют на среде розовые колонии.
• Расщепление лактозы подкисляет среду вокруг соответствующих колоний; индикатор нейтральный красный изменяет цвет на красный.
• Такие колонии обычно окружены мутной зоной осаждённой дезоксихолевой кислоты, образующейся в результате подкисления среды.
• В кислой среде дезоксихолат натрия соединяется с нейтральным красным, в результате чего краситель выходит из раствора и происходит последующее осаждение дезоксихолата.
• Восстановление цитрата аммонийного железа до сульфида железа выявляется по образованию чёрного сульфида железа.
• Виды Salmonella и Shigella не ферментируют лактозу, однако Salmonella может образовывать H₂S, формируя бесцветные колонии с чёрным центром или без него.
• Сочетание цитрата и железа оказывает выраженное гидролизующее действие на агар при нагревании, вследствие чего агар становится мягким и неэластичным. После автоклавирования агар становится мягким, и его практически невозможно штриховать.
• Salmonella gallinarum подавляется при увеличении концентрации дезоксихолата натрия до 0,1 % и выше.
• Поверхностные колонии неферментирующих лактозу бактерий часто адсорбируют небольшое количество красителя из среды и приобретают розоватый оттенок, из-за чего микроорганизмы можно ошибочно принять за колиформные.

В отличие от раздельного применения жидкой и плотной сред, система объединяет обе фазы в одном флаконе и позволяет сразу инокулировать образец и выделять изолированные колонии на поверхности агара.

Для окончательного подтверждения результатов культивирования требуется серотипирование в реакции агглютинации. Для выделения Shigella рекомендуется использовать менее ингибирующую питательную среду.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с рабочими характеристиками среды. Твёрдые компоненты HI эквивалентны компонентам сердечного настоя.

Методика проведения анализа

1. Промаркируйте готовый к применению флакон LQ031A.
2. Снимите верхнюю пломбу с крышки.
3. Продезинфицируйте открывшуюся часть резиновой пробки.
4. Немедленно перенесите образец во флакон с питательной средой, проколов резиновую пробку иглой.
5. Для выпуска воздуха используйте стерильную иглу с фильтром LA038.
6. Установите флакон в вертикальное положение, предпочтительно в шкафу биологической безопасности.
7. Положите спиртовую салфетку на резиновую пробку и введите через неё иглу для выпуска воздуха с фильтром.
8. Ввод и извлечение иглы выполняйте по прямой линии.
9. Утилизируйте иглу.
10. Осторожно перемешайте содержимое, перевернув флакон 2–3 раза.
11. Не выпускайте воздух из флакона при культивировании анаэробных культур.
12. Инкубируйте при температуре 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Флаконы с двухфазной системой комплектуются специальными иглами с воздушным фильтром LA038 для культивирования аэробов. Жидкая среда, обогащённая факторами роста, поддерживает рост факультативных и облигатных анаэробов, вызывающих бактериемию.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при температуре 35–37 °C в течение 18–24 ч.