Система двухфазная для гемокультур HiMedia LQ030-10BT (10 фл.)

Двухфазная система для гемокультур HiMedia LQ030-10BT (10 фл.) на основе ксилозо-лизинового дезоксихолатного (КЛД) агара. Предназначена для быстрого обогащения и идентификации бактерий сальмонеллезной группы из проб крови детей; позволяет получить первые результаты в течение 24 часов.

Область применения

Система используется для качественного подтверждения присутствия бактерий тифо-паратифозной группы в клинических образцах крови (педиатрическая практика). Двухфазный формат позволяет в один этап осуществлять посев материала и выделение изолированных колоний, обеспечивая рост прихотливых анаэробов и факультативно анаэробных микроорганизмов.

Принцип измерения и интерпретация

Система HiCombi™ Dual Performance сочетает в одном флаконе 20 мл жидкой среды (бульона) и поверхность, покрытую 7 мл плотного агара (XLD). Оба типа сред обогащены факторами роста.

Агар XLD является селективной дифференциально-диагностической средой для идентификации семейства Enterobacteriaceae.

• Дифференциация по углеводам: Ксилоза, лактоза и сахароза служат источниками ферментируемых углеводов. Ксилоза ферментируется практически всеми энтеробактериями, но не ферментируется Shigellae, что позволяет различать эти виды.
• Роль лизина: Лизин добавлен для дифференциации группы Salmonella от непатогенных микроорганизмов. Сальмонеллы быстро ферментируют ксилозу, после чего фермент лизин-декарбоксилаза расщепляет лизин с образованием аминов, что приводит к возврату pH в щелочную область (реакция, имитирующая рост Shigella).
• Подавление колиформ: Лактоза и сахароза добавлены для того, чтобы лизин-положительные колиформы вырабатывали избыток кислоты, предотвращая щелочную реакцию. Расщепление сахаров до кислот окрашивает индикатор феноловый красный в жёлтый цвет. Бактерии, декарбоксилирующие лизин до кадаверина, характеризуются красным окрашиванием вокруг колоний из-за повышения pH.
• Индикация H₂S: Система из тиосульфата натрия и цитрата аммония-железа визуализирует выделение сероводорода, что приводит к формированию колоний с чёрными центрами. Непатогенные продуценты H₂S не декарбоксилируют лизин, поэтому кислая реакция среды препятствует почернению их колоний.

Интерпретация результатов:

• Черные колонии: типичны для большинства сальмонелл.
• Бесцветные/красные колонии: характерны для Salmonella серовара Paratyphi A.
• Для окончательного дифференцирования рекомендуется проведение серотипирования в реакции агглютинации (РА).

Методика проведения анализа

Рекомендуемый объём крови для анализа в системе LQ030: 3–5 мл (для детей).

1. Маркируйте флакон с готовой средой HiCombi™. Крышку не откручивать.
2. Снимите верхнюю защитную пломбу с колпачка. Дезинфицируйте открывшуюся часть резиновой пробки.
3. Перенесите пробу во флакон, проколов резиновую пробку стерильной одноразовой иглой и шприцем.
4. Для аэробных культур проведите вентиляцию (используйте стерильную иглу с фильтром LA038): держите флакон вертикально, введите иглу через спиртовую салфетку строго перпендикулярно, затем извлеките её и осторожно переверните флакон 2–3 раза для перемешивания. Для анаэробных культур вентиляция не проводится.
5. Инкубируйте флакон при температуре 30–35 °C в течение 4–6 часов для адсорбции микроорганизмов на плотной поверхности.
6. Положите флакон горизонтально так, чтобы плотная среда была полностью покрыта жидкой фазой. Важно: не встряхивать и не удерживать в таком положении более 15 секунд.
7. Верните флакон в вертикальное положение и инкубируйте при 30–35 °C в течение 18–24 часов (или дольше при необходимости).

Состав среды

Культуральные характеристики

Инкубация при 35–37 °C в течение 18–72 часов.

Ограничения и предостережения

1. Допускается незначительное осаждение компонентов, что не влияет на свойства среды.
2. Некоторые штаммы Proteus могут давать ложноположительные реакции (красно-желтые колонии с черными центрами).
3. Неэнтеробактерии (Pseudomonas, Providencia) могут образовывать красные колонии.
4. S. Paratyphi A, S. Choleraesuis, S. Pullorum и S. Gallinarum могут формировать красные колонии без H₂S, напоминая Shigella.

Хранение и утилизация

Хранить при температуре +2...+8 °C. Срок годности — 1 год. Использованные материалы подлежат обязательному автоклавированию перед утилизацией.