Система двухфазная для гемокультур HiMedia LQ030-10BT (10 фл.)

Двухфазная система для гемокультур HiMedia LQ030-10BT (10 фл.) — готовая питательная среда на основе ксилозо-лизинового дезоксихолатного агара (КЛД, XLD) с 7 мл твёрдой и 20 мл жидкой фазы в одном флаконе. Система предназначена для качественного выявления и предварительной идентификации Salmonella в образцах крови детей с инкубацией 4–6 ч и последующим выделением изолированных колоний за 18–24 ч.

Назначение

Система HiCombi™ Dual Performance Salmonella Medium-XLD предназначена для качественного тестирования, быстрого роста и подтверждения присутствия Salmonella в клинических образцах крови.

• Тип образца: клинические образцы — кровь.
• Назначение изделия: питательная среда.
• Объём образца крови для LQ030: 3–5 мл; применение — для детей.
• Формат: комбинация твёрдой и жидкой питательных сред в одном стеклянном флаконе.
• Количество во флаконе: 7 мл твёрдой среды и 20 мл жидкой среды.
• Количество во флаконе в упаковке: 10 стеклянных квадратных флаконов.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03708.
• Регистрационные сведения: продукция зарегистрирована в ФСЗ, ОКП 9385.
• Упаковка: картонная коробка с 10 стеклянными квадратными флаконами.
• Маркировка: полиграфическая этикетка с инструкцией по применению на русском языке.

Принцип работы и интерпретация

В одном стеклянном флаконе система содержит 20 мл бульона и поверхность, покрытую агаром. Обе среды обогащены факторами роста. Система обеспечивает выполнение двух операций в один этап: внесение образца и одновременное выделение микроорганизмов на поверхности плотной среды.

Ксилозо-лизиновый дезоксихолатный агар (XLD) является селективной и дифференциальной средой, рекомендованной для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae.

Компоненты среды выполняют следующие функции:

• дрожжевой экстракт обеспечивает азот и витамины, необходимые для роста;
• ксилоза, лактоза и сахароза служат источниками ферментируемых углеводов;
• ксилоза включена в состав, поскольку не ферментируется Shigellae, но практически всегда ферментируется энтеробактериями, что способствует дифференциации видов Shigella;
• хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды;
• L-лизин используется для дифференциации группы Salmonella от непатогенных микроорганизмов;
• Salmonellae быстро ферментируют ксилозу, после чего запас ксилозы истощается; затем лизин под действием лизиндекарбоксилазы декарбоксилируется с образованием аминов и возвратом pH в щелочную область, что имитирует реакцию Shigella;
• лактоза и сахароза добавлены для образования избытка кислоты и предотвращения аналогичной реакции у лизин-положительных колиформных бактерий;
• разложение ксилозы, лактозы и сахарозы до кислот вызывает изменение цвета индикатора фенолового красного на жёлтый;
• бактерии, декарбоксилирующие лизин до кадаверина, распознаются по появлению красной окраски вокруг колоний вследствие повышения pH;
• реакции могут протекать одновременно или последовательно, поэтому при длительной инкубации индикатор pH может приобретать различные оттенки или менять цвет с жёлтого на красный;
• система индикации H₂S на основе тиосульфата натрия и железоаммонийного цитрата позволяет визуализировать образующийся сероводород: формируются колонии с чёрными центрами;
• непатогенные продуценты H₂S не декарбоксилируют лизин, поэтому вызываемая ими кислая реакция препятствует почернению колоний.

Система используется для качественного подтверждения присутствия бактерий тифо-паратифозной группы. На поверхности агара обычно вырастают чёрные колонии; бесцветные колонии формируют только сальмонеллы серовара Paratyphi A. Для дифференцирования результатов рекомендуется серотипирование в реакции агглютинации (РА).

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

Методика проведения анализа

1. Нанесите маркировку на готовый к применению флакон с двухфазной средой HiCombi™. Не откручивайте крышку.
2. Снимите верхнюю пломбу с крышки.
3. Продезинфицируйте открывшуюся часть резиновой пробки.
4. Перенесите образец в культуральный флакон, проколов резиновую пробку стерильной одноразовой иглой и шприцем.
5. Для аэробных культур при необходимости выполните вентиляцию, как в системе культивирования Hisafe Dual Performance.
6. Инкубируйте флакон в течение 4–6 ч при температуре 30–35 °C.
7. Для адсорбции образца на твёрдой поверхности наклоните флакон горизонтально так, чтобы твёрдая среда была погружена в жидкую фазу.
8. Не встряхивайте флакон и не удерживайте его в горизонтальном положении более 15 с.
9. Верните флакон в вертикальное положение и инкубируйте 18–24 ч при температуре 30–35 °C или дольше при необходимости.
10. Для вентиляции используйте стерильную вентиляционную иглу LA038. Держите флакон вертикально, предпочтительно в шкафу биологической безопасности.
11. Поместите спиртовую салфетку на резиновую пробку и введите через неё вентиляционную иглу с фильтром.
12. Вводите и извлекайте иглу по прямой линии.
13. Утилизируйте иглу, затем осторожно перемешайте содержимое, перевернув флакон 2–3 раза.
14. Для анаэробных культур вентиляцию флакона не выполняйте.

Требования к образцам и обращению

При работе с клиническими образцами соблюдайте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. В среде может наблюдаться небольшое выпадение осадка. Это свойство среды не влияет на её рабочие характеристики.
2. Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост вследствие различий в пищевых потребностях.
3. Некоторые штаммы Proteus могут давать окраску от красной до жёлтой, при этом у большинства колоний формируются чёрные центры, что приводит к ложноположительным реакциям.
4. Неэнтеробактерии, включая Pseudomonas и Providencia, могут формировать красные колонии.
5. S. Paratyphi A, S. Choleraesuis, S. Pullorum и S. Gallinarum могут образовывать красные колонии без H₂S, имитируя виды Shigella.

Технические характеристики

• Фаза 1: твёрдая питательная среда, 7 мл.
• Фаза 2: жидкая питательная среда, 20 мл.
• Конечное значение pH: 7,4 ± 0,2 при 25 °C.
• pH твёрдой среды: 7,20–7,60.
• pH жидкой среды: 7,20–7,60.
• Цвет твёрдой среды: красный.
• Цвет жидкой среды: красный.
• Внешний вид: стерильный стеклянный флакон с бульоном и поверхностью, покрытой агаром.
• Контроль стерильности: соответствует критериям