Питательная дифференциальная среда HiMedia LQ018-25X5ML OF среда с декстрозой (25×5 мл) — готовая к применению среда с конечным pH 6,8 ± 0,2. HiMedia LQ018-25X5ML предназначена для дифференциации грамотрицательных бактерий по окислительному и ферментативному метаболизму декстрозы и применяется для анализа образцов мяса и мясных продуктов.

Назначение

Среда рекомендована для дифференциации грамотрицательных бактерий на основании окислительного и ферментативного метаболизма декстрозы.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных показателей эффективности.

Эквивалентен ферментативному гидролизату казеина

Форма поставки и основные характеристики

• Тип продукта: готовая к применению питательная среда OF с декстрозой
• Объём среды: 5 мл во флаконе
• Количество: 25 флаконов
• Внешний вид: стерильная прозрачная среда OF с декстрозой во флаконах
• Цвет: зелёный
• Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска
• pH: 6,60–7,00
• Температура хранения при получении: 2–8 °C
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке

Методика применения

1. Перед открыванием прочитайте этикетку флакона с готовой к применению средой LQ018.
2. Внесите образец в количестве 50–100 КОЕ.
3. Инкубируйте при заданных температуре и времени.

Принцип дифференциации и интерпретация результатов

Среда OF разработана Хью и Лейфсоном для изучения окислительного и ферментативного метаболизма углеводов грамотрицательными бактериями. Этот критерий используют при таксономических исследованиях представителей семейства Enterobacteriaceae.

Глюкоза является основным углеводом для базовой среды OF. Однако некоторые микроорганизмы могут метаболизировать другие углеводы даже при неспособности использовать декстрозу.

Разложение углевода с образованием кислоты определяется по индикатору pH — бромтимоловому синему, который изменяет цвет среды на жёлтый. Окислительное использование углевода происходит при контакте среды с воздухом, а ферментативное использование — в условиях исключения контакта с воздухом.

Для определения типа метаболизма грамотрицательный микроорганизм вносят в две одинаковые пробирки со средой, содержащей углевод. Одну пробирку покрывают минеральным маслом для исключения кислорода, вторую оставляют открытой. По реакциям в двух пробирках определяют тип метаболизма:

• ферментативные микроорганизмы вызывают кислую реакцию как в закрытой, так и в открытой среде;
• окислительные микроорганизмы вызывают кислую реакцию в открытой среде, а в закрытой среде дают слабый рост без изменения цвета;
• микроорганизмы, которые не относятся к окислительным или ферментативным, не изменяют закрытую среду и вызывают щелочную реакцию в открытой среде.

Кислая реакция, вызываемая окислительными микроорганизмами, наиболее заметна на поверхности среды и постепенно распространяется по всему объёму. При слабой или медленной окислительной реакции первоначальная щелочная реакция на поверхности открытой пробирки может сохраняться несколько дней и затем перейти в кислую реакцию.

Триптон обеспечивает бактерии необходимыми источниками углерода и азота, витаминами и другими компонентами, необходимыми для роста. Фосфат выполняет буферную функцию. Низкая концентрация агара определяет подвижность микроорганизмов и способствует распространению кислоты, образующейся на поверхности среды. Бромтимоловый синий используется как индикатор pH.

Подвижность выявляют по диффузной зоне, расходящейся от линии посева. Неподвижные микроорганизмы растут вдоль линии посева.

Тип образца

Пищевые образцы:

• мясо;
• мясные продукты.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов используйте подходящие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее обозначался как Enterobacter aerogenes

^ Ранее обозначался как Pseudomonas aeruginosa.

Контроль качества

Внешний вид

Стерильная прозрачная среда OF с декстрозой во флаконах.

Цвет

Среда зелёного цвета.

Проверка стерильности

Среда соответствует критериям выпуска.

Количество среды

5 мл среды во флаконе.

pH

6,60–7,00.

Оценка эффективности

Ожидаемые показатели эффективности среды обеспечиваются при использовании в соответствии с указаниями на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Каждая серия среды проверена на микроорганизмы, указанные в сертификате анализа. Для применения с конкретным микроорганизмом, не указанным в сертификате анализа, рекомендуется предварительно валидировать среду с учётом требований пользователя.

Ограничения

1. Отдельные микроорганизмы различаются по требованиям к росту и могут демонстрировать вариабельные реакции на среде.
2. Каждая серия среды испытана на микроорганизмы, указанные в сертификате анализа. При необходимости применения среды для другого конкретного микроорганизма пользователь должен самостоятельно подтвердить пригодность среды с учётом специфики задачи.

Меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные действующими руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Хранение

При получении хранить при температуре 2–8 °C. Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке. Наилучшие показатели среды обеспечиваются при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов следует соблюдать утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.