HiMedia KBM006-20KT Биохимический набор для подвижности Shigella HiMotility (20 наборов)

Биохимический набор для подвижности Shigella HiMotility KBM006-20KT производства HiMedia (20 наборов) предназначен для идентификации бактерий рода Shigella. Система основана на определении подвижности, утилизации углеводов и других биохимических тестов в соответствии со спецификацией IS 5887 Part VII.

Область применения

Набор KBM006 используется для скрининга проб пищевых продуктов, а также для анализа соответствующих клинических образцов и проб воды.

Принцип измерения

Идентификация основана на определении метаболических изменений бактерий Shigella (грамнегативных, факультативно-анаэробных, неспорообразующих, неподвижных палочек), которые приводят к изменению pH и утилизации субстратов. Эти изменения фиксируются колориметрически по смене цвета питательных сред, что позволяет интерпретировать результат визуально или после добавления специфических реагентов.

Методика проведения анализа

Подготовка посевной дозы

Набор KBM006 нельзя использовать напрямую для анализа клинических или пищевых проб; микроорганизм должен быть предварительно изолирован и очищен.

1. Изолируйте целевой организм на питательном агаре (с кровью или без).
2. Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл питательного бульона.
3. Инкубируйте при температуре 35–37 °C в течение 6–8 часов до достижения мутности посевной дозы $\ge$1,0 OD при 620 нм. Примечание: при мутности менее 1,0 OD возможны ошибочные ложноотрицательные результаты.

Способ инокуляции

1. Асептически откройте набор и снимите защитную фольгу.
2. Выполните укольный посев в 1-ю лунку. Вторую лунку не инокулировать.
3. В остальные лунки (с №3 по №12) внесите по одной петле посевной дозы методом укольного посева так, чтобы инокулят достиг дна лунок.

Инкубация

• Температура: 35–37 °C.
• Продолжительность: 24–48 часов.

Интерпретация результатов

Подвижность (Лунки №1 и 2: Питательный агар + TTC)

• Положительная реакция: наблюдается перемещение роста из 1-й лунки во 2-ю, сопровождающееся покраснением среды.
• Отрицательная реакция: покраснение наблюдается только в 1-й лунке и в тех местах 2-й лунки, куда был внесен инокулят.

Тест на индол (Лунка №3)

Добавьте 1–2 капли реагента Ковача (R008). Появление красно-розового окрашивания в течение 10 секунд указывает на положительную реакцию. Отсутствие изменения цвета означает отрицательный результат.

Тест Фогеса-Проскауэра (Лунка №4)

Добавьте 2–3 капли реагента Баритта А (R029) и 1–2 капли реагента Баритта B (R030). Появление розово-красного цвета в течение 5–10 минут указывает на положительный тест. Отсутствие изменения цвета или слабый медный оттенок (реакция реагентов А и B) означает отрицательный результат.

Утилизация цитрата и малоната (Лунки №5, 6)

Положительная реакция характеризуется изменением цвета среды на синий после инкубации.

Ферментация углеводов (Лунки №7–12)

Положительная реакция (продукция кислоты) характеризуется изменением цвета среды с соломенного/светло-розового на темно-розовый. Соломенный цвет указывает на отрицательный результат.

Таблица интерпретации результатов HiMotility™ (KBM006)

Особенности интерпретации и эксплуатации

Важные примечания

• Перед использованием реагенты должны прогреться до комнатной температуры.
• При слабой реакции в тестах на ферментацию углеводов результат фиксируется как «±» и инкубация продлевается еще на 24 часа. Соломенный цвет через 72 часа инкубации считается отрицательным результатом.
• Возможны противоречивые результаты из-за мутаций микроорганизмов или особенностей сред, использованных для изоляции и культивирования.

Меры предосторожности и утилизация

• Образцы и культуры следует считать потенциально патогенными.
• Соблюдайте строгие асептические условия при инокуляции.
• Избегайте контакта реагентов с кожей, глазами и одеждой.
• 3% H₂O₂ является крайне едким раствором; при попадании на кожу немедленно промойте область 70% этанолом (не водой) для нейтрализации действия.
• После использования наборы и инструменты (пипетки, петли) подлежат дезинфекции с последующим сжиганием или автоклавированием в одноразовых пакетах.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: 12 месяцев.