HiMedia KBM006-10KT Биохимический набор для подвижности Shigella HiMotility (10 наборов)

Биохимический набор HiMedia KBM006-10KT Биохимический набор для подвижности Shigella HiMotility (10 наборов) — стандартизированная колориметрическая система из 12 лунок для идентификации Shigella по подвижности, утилизации углеводов и другим биохимическим реакциям. Набор предназначен для анализа предварительно выделенных и очищенных культур из пищевых, клинических и водных образцов и не применяется непосредственно к исходным пробам.

Назначение и идентификация

Идентификационные данные

HiMedia KBM006 предназначен для проведения биохимических тестов при идентификации Shigella в соответствии со спецификацией IS 5887, часть VII. Набор может применяться для скрининга пищевых образцов, а также соответствующих клинических проб и проб воды.

Исследуемые микроорганизмы

Shigella — род грамотрицательных факультативно-анаэробных неспорообразующих неподвижных бактерий палочковидной формы, генетически близких к E. coli. К роду Shigella относят четыре вида: S. flexneri, S. boydii, S. sonnei, S. dysenteriae.

Принцип анализа

Каждый набор представляет собой стандартизированную колориметрическую систему, основанную на определении подвижности, утилизации углеводов и других биохимических реакциях, специфичных для идентификации Shigella. Методика основана на изменении pH и утилизации субстратов.

При инкубации шигеллы вызывают метаболические изменения, сопровождающиеся изменением цвета питательных сред. Результат интерпретируют визуально либо после добавления соответствующего реагента, если это предусмотрено методикой.

Подготовка посевного материала

KBM006 нельзя использовать непосредственно с клиническими или пищевыми образцами. Идентифицируемый микроорганизм предварительно выделяют и очищают.

1. Выделите исследуемый микроорганизм на питательном агаре с кровью или без добавления крови.
2. Отберите одну изолированную колонию.
3. Засейте колонию в 5 мл питательного бульона.
4. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 6–8 ч до достижения мутности посевного материала не менее 1,0 OD при 620 нм.

При мутности посевного материала менее 1,0 OD может быть получен ошибочный ложноотрицательный результат.

Методика инокуляции

1. Вскройте набор с соблюдением асептических условий.
2. Снимите герметизирующую фольгу.
3. Выполните прокалывающий посев в первую лунку.
4. Вторую лунку не инокулируйте.
5. Оставшиеся лунки с номерами 3–12 инокулируйте, выполняя прокалывающий посев в каждую отдельную лунку петлёй с посевным материалом; вторую лунку при этом не инокулируйте.
6. Посевной материал должен достигать дна каждой лунки.

Инкубация

• Температура инкубации: 35–37 °C
• Продолжительность инкубации: 24–48 ч

Состав панели биохимических тестов

Набор содержит комбинацию из 12 биохимических тестов для идентификации видов Shigella по подвижности и другим биохимическим признакам:

• две первые лунки со стерильной средой для определения подвижности;
• лунка 3 — индольная реакция;
• лунка 4 — реакция Фогеса—Проскауэра;
• лунка 5 — утилизация цитрата;
• лунка 6 — утилизация малоната;
• лунки 7–12 — тесты утилизации углеводов: глюкоза, лактоза, маннитол, сахароза, салицин, дульцитол.

Интерпретация биохимических реакций

Подвижность: питательный агар + TTC, лунки 1 и 2

Подвижность определяют по перемещению роста из первой лунки во вторую, сопровождающемуся покраснением среды. Питательный агар с TTC приобретает красную окраску в первой лунке и в тех участках второй лунки, куда переместились подвижные микроорганизмы.

Индольная реакция: лунка 3

Добавьте 1–2 капли реактива Ковача R008.

• Положительная реакция: появление красновато-розовой окраски в течение 10 с.
• Отрицательная реакция: реактив сохраняет бледную окраску.

Реакция Фогеса—Проскауэра: лунка 4

Добавьте 2–3 капли реактива Барритта A R029 и 1–2 капли реактива Барритта B R030.

• Положительная реакция: появление розовато-красной окраски в течение 5–10 мин.
• Отрицательная реакция: отсутствие изменения окраски либо появление лёгкой медной окраски вследствие реакции между реактивами Барритта A и B.

Утилизация цитрата и малоната: лунки 5 и 6

После инкубации изменение окраски среды на синюю указывает на положительную реакцию.

Ферментация углеводов: лунки 7–12

При положительной реакции образование кислоты вызывает изменение окраски среды от соломенной до светло-розовой. При отрицательной реакции среда сохраняет соломенную окраску.

Таблица интерпретации результатов